| 摘要 | 第3-7页 |
| ABSTRACT | 第7-12页 |
| 第1章 文献综述 | 第18-40页 |
| 1.1 铜与生物体的关系 | 第18-27页 |
| 1.1.1 铜的分布与应用 | 第18页 |
| 1.1.2 铜的吸收与转运 | 第18-22页 |
| 1.1.3 铜对生物体的作用 | 第22-23页 |
| 1.1.4 过量铜的危害 | 第23-27页 |
| 1.2 人体中铜的摄入来源 | 第27-30页 |
| 1.2.1 人体对铜的需要量及限量 | 第27-28页 |
| 1.2.2 铜的膳食标准限量 | 第28页 |
| 1.2.3 饮食对铜摄入的贡献 | 第28-29页 |
| 1.2.4 饮水对铜摄入的贡献 | 第29-30页 |
| 1.3 铜存在形态与其吸收及毒性的关系 | 第30-35页 |
| 1.3.1 金属的形态与其吸收及毒性的关系 | 第30-31页 |
| 1.3.2 不同来源的铜与吸收及毒性的关系 | 第31-33页 |
| 1.3.3 铜存在形态的测定方法 | 第33-35页 |
| 1.4 选题背景和主要研究内容 | 第35-40页 |
| 1.4.1 选题背景 | 第35-37页 |
| 1.4.2 主要研究内容 | 第37-39页 |
| 1.4.3 技术路线 | 第39-40页 |
| 第2章 铜的不同摄入方式对小鼠氧化应激、血清铜等生理参数及效应的影响 | 第40-61页 |
| 2.1 引言 | 第40-41页 |
| 2.2 材料与方法 | 第41-45页 |
| 2.2.1 仪器与设备 | 第41页 |
| 2.2.2 材料与试剂 | 第41页 |
| 2.2.3 动物饲养与试验设计 | 第41-43页 |
| 2.2.4 体重和样本收集 | 第43页 |
| 2.2.5 肝、脾、肾及脑中铜含量的测定 | 第43页 |
| 2.2.6 肝脏和脑中GSH、SOD、GSH-Px及MDA的测定 | 第43-44页 |
| 2.2.7 血清铜、铜蓝蛋白及血清自由铜的测定 | 第44页 |
| 2.2.8 脑中可溶性Aβ1-42的含量 | 第44-45页 |
| 2.2.9 数据统计 | 第45页 |
| 2.3 结果与分析 | 第45-55页 |
| 2.3.1 饲料、饮水和铜的摄入量 | 第45页 |
| 2.3.2 生长性能 | 第45-48页 |
| 2.3.3 肝、脾、肾和脑中的铜含量 | 第48-49页 |
| 2.3.4 肝脏与脑中GSH、SOD、GSH-Px及MDA | 第49-52页 |
| 2.3.5 血清铜、血清自由铜 | 第52-54页 |
| 2.3.6 脑中可溶性Aβ1-42 | 第54-55页 |
| 2.4 讨论 | 第55-60页 |
| 2.4.1 生长效率与器官铜含量 | 第56页 |
| 2.4.2 氧化应激的变化 | 第56-58页 |
| 2.4.3 血清铜及血清自由铜的变化 | 第58-59页 |
| 2.4.4 脑中可溶性Aβ1-42含量的变化 | 第59-60页 |
| 2.5 本章小结 | 第60-61页 |
| 第3章 铜的不同摄入方式对小鼠十二指肠铜转运相关基因水平的影响 | 第61-73页 |
| 3.1 引言 | 第61页 |
| 3.2 材料与方法 | 第61-65页 |
| 3.2.1 仪器与设备 | 第61-62页 |
| 3.2.2 材料与试剂 | 第62页 |
| 3.2.3 小鼠肠道组织中RNA的提取与测定 | 第62-63页 |
| 3.2.4 cDNA制备与合成 | 第63页 |
| 3.2.5 PCR反应 | 第63-65页 |
| 3.2.6 肝脏中金属硫蛋白含量测定 | 第65页 |
| 3.2.7 数据统计 | 第65页 |
| 3.3 结果与分析 | 第65-69页 |
| 3.3.1 Ctr1、DMT1 mRNA水平 | 第66-67页 |
| 3.3.2 ATP7A mRNA水平 | 第67-68页 |
| 3.3.3 MT的表达 | 第68-69页 |
| 3.4 讨论 | 第69-72页 |
| 3.5 本章小结 | 第72-73页 |
| 第4章 体外模拟消化环境下试验铜与食品组(成)分的相互作用 | 第73-92页 |
| 4.1 引言 | 第73页 |
| 4.2 材料与方法 | 第73-77页 |
| 4.2.1 仪器与设备 | 第73-74页 |
| 4.2.2 材料与试剂 | 第74-75页 |
| 4.2.3 模拟消化液的配置 | 第75页 |
| 4.2.4 试验设计 | 第75-76页 |
| 4.2.5 铜离子电势测定 | 第76页 |
| 4.2.6 铜及蛋白质溶解度测定 | 第76页 |
| 4.2.7 数据统计 | 第76-77页 |
| 4.3 结果与分析 | 第77-82页 |
| 4.3.1 水溶液与空白/消化液中的铜电势及溶解度变化 | 第77-78页 |
| 4.3.2 添加小分子组分消化液的铜电势变化 | 第78-80页 |
| 4.3.3 添加小分子组分消化液的铜溶解度 | 第80-81页 |
| 4.3.4 添加大分子组分消化液的铜电势变化 | 第81-82页 |
| 4.3.5 添加大分子组分消化液的铜溶解度 | 第82页 |
| 4.4 讨论 | 第82-90页 |
| 4.4.1 消化液中铜离子的价态 | 第83-84页 |
| 4.4.2 消化液中无机离子对铜溶解度的影响 | 第84页 |
| 4.4.3 胃肠道酸效应对铜络合反应的影响 | 第84-88页 |
| 4.4.4 食糜成分对铜络合反应及溶解度的影响 | 第88-90页 |
| 4.5 本章小结 | 第90-92页 |
| 第5章 不同摄入方式下试验铜的生物可接受度及电势变化 | 第92-116页 |
| 5.1 引言 | 第92-93页 |
| 5.2 材料与方法 | 第93-101页 |
| 5.2.1 仪器与设备 | 第93-94页 |
| 5.2.2 材料与试剂 | 第94页 |
| 5.2.3 体外模拟消化 | 第94-96页 |
| 5.2.4 试验设计 | 第96-98页 |
| 5.2.5 生物可接受度 | 第98-99页 |
| 5.2.6 铜化合物大小原位分析 | 第99-100页 |
| 5.2.7 铜离子电势测定 | 第100页 |
| 5.2.8 数据统计 | 第100-101页 |
| 5.3 结果与分析 | 第101-109页 |
| 5.3.1 硫酸铜生物可接受度 | 第101-102页 |
| 5.3.2 氨基酸铜生物可接受度 | 第102页 |
| 5.3.3 蛋白铜生物可接受度 | 第102-103页 |
| 5.3.4 摄入硫酸铜时铜化合物大小分布 | 第103-105页 |
| 5.3.5 摄入氨基酸铜时铜化合物大小分布 | 第105-106页 |
| 5.3.6 摄入蛋白铜时铜化合物大小分布 | 第106-107页 |
| 5.3.7 试验铜的离子电势变化 | 第107-109页 |
| 5.4 讨论 | 第109-114页 |
| 5.4.1 铜的生物可接受度 | 第110-113页 |
| 5.4.2 铜离子活度 | 第113-114页 |
| 5.5 本章小结 | 第114-116页 |
| 第6章 离子态和络合态铜在Caco-2细胞及HepG2细胞中的转运通路研究 | 第116-142页 |
| 6.1 引言 | 第116-117页 |
| 6.2 材料与方法 | 第117-122页 |
| 6.2.1 仪器与设备 | 第117页 |
| 6.2.2 材料与试剂 | 第117-118页 |
| 6.2.3 细胞试验 | 第118-119页 |
| 6.2.4 铜的离子态和络合态对铜转运的影响 | 第119-120页 |
| 6.2.5 二价离子通路抑制剂 | 第120页 |
| 6.2.6 Ctr1通路抑制剂 | 第120-121页 |
| 6.2.7 细胞转运通路稳定性 | 第121-122页 |
| 6.2.8 数据统计 | 第122页 |
| 6.3 结果与分析 | 第122-134页 |
| 6.3.1 孵育液中离子态和络合态铜的表征 | 第122-123页 |
| 6.3.2 离子态与络合态铜孵育下细胞中铜含量的变化 | 第123-125页 |
| 6.3.3 二价离子通路抑制剂 | 第125-126页 |
| 6.3.4 Ctr1通路抑制剂 | 第126-129页 |
| 6.3.5 细胞转运通路的稳定性 | 第129-134页 |
| 6.4 讨论 | 第134-140页 |
| 6.4.1 细胞及孵育作用液的选择 | 第134-135页 |
| 6.4.2 Caco-2细胞中的转运通路 | 第135-137页 |
| 6.4.3 HepG2细胞中的转运通路 | 第137页 |
| 6.4.4 其他离子的影响及转运通路的稳定性 | 第137-138页 |
| 6.4.5 铜转运通路与小鼠血清自由铜及不同生理效应的关系 | 第138-140页 |
| 6.5 本章小结 | 第140-142页 |
| 第7章 结论与展望 | 第142-145页 |
| 7.1 主要结论 | 第142-144页 |
| 7.2 主要创新点 | 第144页 |
| 7.3 研究展望 | 第144-145页 |
| 参考文献 | 第145-158页 |
| 附录A 术语与缩略语说明 | 第158-160页 |
| 附录B 论文补充材料 | 第160-167页 |
| B.1 动物试验饮水组硫酸铜添加量 | 第160-161页 |
| B.2 每月小鼠饮食、饮水摄入量 | 第161-162页 |
| B.3 小分子组分的化学结构式 | 第162-163页 |
| B.4 细胞孵育液酸度调节剂的选择 | 第163-165页 |
| B.5 不同浓度铜离子下细胞存活率 | 第165-167页 |
| 攻读博士学位期间发表论文及参与项目 | 第167-168页 |
| 致谢 | 第168-169页 |
