| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 缩略语表 | 第7-12页 |
| 第1章 前言 | 第12-22页 |
| 1.1 引言 | 第12页 |
| 1.2 鸡蛋过敏的危害及研究现状 | 第12-13页 |
| 1.3 食物过敏原致敏性评估 | 第13-20页 |
| 1.3.1 体内法 | 第13-15页 |
| 1.3.1.1 双盲安慰剂对照的食物激发试验(DBPCFC) | 第13-14页 |
| 1.3.1.2 皮肤试验(ST) | 第14-15页 |
| 1.3.1.3 动物模型 | 第15页 |
| 1.3.2 体外法 | 第15-19页 |
| 1.3.2.1 血清学方法 | 第16-17页 |
| 1.3.2.2 细胞学方法 | 第17-18页 |
| 1.3.2.3 其它体外评价技术 | 第18-19页 |
| 1.3.3 生物信息学比对法 | 第19-20页 |
| 1.4 立题背景与研究内容 | 第20-22页 |
| 1.4.1 立题背景 | 第20页 |
| 1.4.2 研究内容 | 第20-22页 |
| 1.4.2.1 鸡蛋卵转铁蛋白及其铁螯合物的制备 | 第21页 |
| 1.4.2.2 鸡蛋卵转铁蛋白及其铁螯合物致敏性的动物学评价 | 第21页 |
| 1.4.2.3 基于DCs抗原加工评价鸡蛋卵转铁蛋白及其铁螯合物致敏性 | 第21-22页 |
| 第2章 鸡蛋卵转铁蛋白及其铁螯合物的制备 | 第22-30页 |
| 2.1 引言 | 第22页 |
| 2.2 材料、设备与方法 | 第22-27页 |
| 2.2.1 试验材料 | 第22-23页 |
| 2.2.2 主要仪器与设备 | 第23页 |
| 2.2.3 实验方法 | 第23-27页 |
| 2.2.3.1 溶液配制 | 第23-25页 |
| 2.2.3.2 鸡蛋卵转铁蛋白的分离纯化 | 第25页 |
| 2.2.3.3 SDS-PAGE | 第25-26页 |
| 2.2.3.4 鸡蛋卵转铁蛋白铁螯合物的制备 | 第26页 |
| 2.2.3.5 Urea-PAGE鉴定鸡蛋卵转铁蛋白及其铁螯合物 | 第26-27页 |
| 2.3 结果 | 第27-28页 |
| 2.3.1 鸡蛋卵转铁蛋白的纯化 | 第27页 |
| 2.3.2 鸡蛋卵转铁蛋白铁螯合物的制备及鉴定 | 第27-28页 |
| 2.4 讨论 | 第28-29页 |
| 2.4.1 鸡蛋卵转铁蛋白纯化方法的选择 | 第28页 |
| 2.4.2 鸡蛋卵转铁蛋白铁螯合物的制备及鉴定 | 第28-29页 |
| 2.5 本章小结 | 第29-30页 |
| 第3章 鸡蛋卵转铁蛋白及其铁螯合物致敏性的动物学评估 | 第30-43页 |
| 3.1 引言 | 第30页 |
| 3.2 材料、设备与方法 | 第30-34页 |
| 3.2.1 试验材料 | 第30页 |
| 3.2.2 主要仪器与设备 | 第30-31页 |
| 3.2.3 实验方法 | 第31-34页 |
| 3.2.3.1 溶液配制 | 第31页 |
| 3.2.3.2 抗原制备 | 第31页 |
| 3.2.3.3 OVT致敏小鼠模型的建立 | 第31-32页 |
| 3.2.3.4 小鼠空肠石蜡切片的制备 | 第32页 |
| 3.2.3.5 苏木精-伊红(HE)染色 | 第32-33页 |
| 3.2.3.5 小鼠血清中特异性抗体及mMCP-1的ELISA分析 | 第33页 |
| 3.2.3.6 小鼠细胞因子的检测 | 第33-34页 |
| 3.2.3.7 数据统计分析 | 第34页 |
| 3.3 结果 | 第34-40页 |
| 3.3.1 小鼠过敏的临床症状评分 | 第34页 |
| 3.3.2 小鼠空肠组织的变化 | 第34-36页 |
| 3.3.3 小鼠血清中抗体水平的变化 | 第36-37页 |
| 3.3.4 小鼠血清中mMCP-1水平的变化 | 第37-38页 |
| 3.3.5 鸡蛋卵转铁蛋白及其铁螯合物对脾细胞增殖的影响 | 第38-39页 |
| 3.3.6 鸡蛋卵转铁蛋白及其铁螯合物对细胞因子的影响 | 第39-40页 |
| 3.4 讨论 | 第40-42页 |
| 3.4.1 关于动物模型的选择 | 第40页 |
| 3.4.2 小鼠过敏的临床症状及肠道损伤 | 第40-41页 |
| 3.4.3 小鼠模型中mMCP-1及异性抗体的水平变化 | 第41页 |
| 3.4.4 体外激发试验中细胞因子水平的变化 | 第41-42页 |
| 3.5 本章小结 | 第42-43页 |
| 第4章 基于DCs抗原加工评价鸡蛋卵转铁蛋白及其铁螯合物的致敏性 | 第43-52页 |
| 4.1 引言 | 第43页 |
| 4.2 材料与方法 | 第43-47页 |
| 4.2.1 试验材料 | 第43-44页 |
| 4.2.2 主要仪器与设备 | 第44页 |
| 4.2.3 实验方法 | 第44-47页 |
| 4.2.3.1 溶液配制 | 第44-45页 |
| 4.2.3.2 抗原制备 | 第45页 |
| 4.2.3.3 DCs的诱导和培养 | 第45页 |
| 4.2.3.4 流式细胞仪检测DCs对过敏原的摄取 | 第45-46页 |
| 4.2.3.5 模拟DCs加工过敏原蛋白 | 第46页 |
| 4.2.3.6 RP-HPLC分析组织蛋白酶D对过敏原的降解作用 | 第46页 |
| 4.2.3.7 数据统计分析 | 第46-47页 |
| 4.3 结果 | 第47-50页 |
| 4.3.1 DCs的纯度检测及形态学观察 | 第47页 |
| 4.3.2 DCs对鸡蛋卵转铁蛋白及其铁螯合物的摄取率分析 | 第47-48页 |
| 4.3.3 组织蛋白酶D对鸡蛋卵转铁蛋白及其铁螯合物的降解作用 | 第48-50页 |
| 4.4 讨论 | 第50-51页 |
| 4.4.1 DCs培养方法的选择 | 第50页 |
| 4.4.2 DCs摄取鸡蛋卵转铁蛋白及其铁螯合物的差异性分析 | 第50页 |
| 4.4.3 组织蛋白酶D用于模拟DCs对过敏原加工的局限性 | 第50-51页 |
| 4.5 本章小结 | 第51-52页 |
| 第5章 结论与展望 | 第52-54页 |
| 5.1 结论 | 第52页 |
| 5.2 创新点 | 第52-53页 |
| 5.3 展望 | 第53-54页 |
| 致谢 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-61页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第61页 |
