| 摘要 | 第4-5页 |
| ABSTRACT | 第5页 |
| 1 前言 | 第8-17页 |
| 1.1 抗菌肽 | 第8页 |
| 1.2 抗菌肽分类 | 第8-10页 |
| 1.2.1 根据抗菌肽来源分类 | 第8-10页 |
| 1.2.2 根据抗菌肽二级结构分类 | 第10页 |
| 1.2.3 抗菌肽其它分类 | 第10页 |
| 1.3 抗菌肽作用机理 | 第10-13页 |
| 1.3.1 抗细菌肽 | 第10-12页 |
| 1.3.2 抗真菌肽 | 第12-13页 |
| 1.4 抗菌肽的应用 | 第13-14页 |
| 1.4.1 抗菌肽在食品领域的应用 | 第13页 |
| 1.4.2 抗菌肽在农业领域的应用 | 第13页 |
| 1.4.3 抗菌肽在畜禽业领域的应用 | 第13页 |
| 1.4.4 抗菌肽在临床医学领域的应用 | 第13-14页 |
| 1.5 大肠杆菌表达系统 | 第14页 |
| 1.5.1 谷胱甘肽转移酶(GST)标签融合表达 | 第14页 |
| 1.5.2 麦芽糖结合蛋白(MBP)标签融合表达 | 第14页 |
| 1.6 毕赤酵母表达系统 | 第14-16页 |
| 1.6.1 毕赤酵母表达菌株 | 第15页 |
| 1.6.2 毕赤酵母表达载体 | 第15页 |
| 1.6.3 筛选转化子 | 第15-16页 |
| 1.7 生物信息学分析 | 第16页 |
| 1.8 本论文的研究目的、意义及内容 | 第16-17页 |
| 1.8.1 研究目的、意义 | 第16页 |
| 1.8.2 研究内容 | 第16-17页 |
| 2 材料与方法 | 第17-34页 |
| 2.1 实验材料 | 第17-22页 |
| 2.1.1 菌种和质粒 | 第17-18页 |
| 2.1.2 主要药品 | 第18-19页 |
| 2.1.3 仪器与设备 | 第19-20页 |
| 2.1.4 大肠杆菌表达系统标准溶液配制 | 第20-21页 |
| 2.1.5 大肠杆菌培养基配制 | 第21页 |
| 2.1.6 毕赤酵母表达系统标准溶液配制 | 第21-22页 |
| 2.1.7 酵母培养基配制 | 第22页 |
| 2.2 实验方法 | 第22-34页 |
| 2.2.1 生物信息学分析 | 第23页 |
| 2.2.2 大肠杆菌表达系统 | 第23-27页 |
| 2.2.3 毕赤酵母表达系统 | 第27-34页 |
| 3 结果与讨论 | 第34-53页 |
| 3.1 抗菌肽CFBD-1、UyCT5和Hispidalin生物信息学分析 | 第34-36页 |
| 3.1.1 CFBD-1、UyCT5和Hispidalin理化特性 | 第34页 |
| 3.1.2 CFBD-1、UyCT5和Hispidalin蛋白一级结构分析 | 第34页 |
| 3.1.3 CFBD-1、UyCT5和Hispidalin蛋白二级结构分析 | 第34-36页 |
| 3.2 大肠杆菌表达系统 | 第36-41页 |
| 3.2.1 pMAL-c2X-CFBD-1和pGEX-2T-UyCT5重组质粒构建 | 第36页 |
| 3.2.2 pMAL-c2X-CFBD-1和pGEX-2T-UyCT5双酶切验证 | 第36-37页 |
| 3.2.3 pMAL-c2X-CFBD-1和pGEX-2T-UyCT5测序验证 | 第37-38页 |
| 3.2.4 MBP-CFBD-1和GST-UyCT5融合蛋白诱导表达 | 第38-39页 |
| 3.2.5 MBP-CFBD-1和GST-UyCT5融合蛋白纯化 | 第39-40页 |
| 3.2.6 GST-UyCT5融合蛋白抑菌活性研究 | 第40-41页 |
| 3.3 毕赤酵母表达系统 | 第41-53页 |
| 3.3.1 pPICZαA-Hispidalin和pPICZαA-CFBD-1重组质粒构建 | 第41-42页 |
| 3.3.2 pPICZαA-Hispidalin和pPICZαA-CFBD-1双酶切验证 | 第42-43页 |
| 3.3.3 pPICZαA-Hispidalin和pPICZαA-CFBD-1测序验证 | 第43-44页 |
| 3.3.4 pPICZαA-Hispidαlin、pPICZαA-CFBD-1和pPICZαA线性化 | 第44-45页 |
| 3.3.5 pPICZαA-Hispidαlin、pPICZαA-CFBD-1和pPICZαA电击转化 | 第45页 |
| 3.3.6 pPICZαA-Hispidalin和pPICZαA-CFBD-1阳性克隆筛选 | 第45页 |
| 3.3.7 His-Hispidalin和His-CFBD-1融合蛋白诱导表达 | 第45-46页 |
| 3.3.8 His-Hispidalin融合蛋白抑菌活性研究 | 第46-47页 |
| 3.3.9 His-Hispidalin融合蛋白纯化 | 第47-48页 |
| 3.3.10 His-Hispidalin融合蛋白最小抑制浓度测定(MIC) | 第48-49页 |
| 3.3.11 His-Hispidalin融合蛋白诱导条件优化 | 第49-53页 |
| 4 结论 | 第53-54页 |
| 4.1 大肠杆菌表达系统 | 第53页 |
| 4.2 毕赤酵母表达系统 | 第53页 |
| 4.3 诱导条件优化 | 第53-54页 |
| 5 展望 | 第54-55页 |
| 6 参考文献 | 第55-62页 |
| 7 致谢 | 第62页 |
