| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4页 |
| 引言 | 第9-10页 |
| 1 文献综述 | 第10-15页 |
| 1.1 乳铁蛋白的来源及分布 | 第10页 |
| 1.2 乳铁蛋白的分子结构 | 第10页 |
| 1.3 乳铁蛋白的性质 | 第10-11页 |
| 1.3.1 乳铁蛋白的理化性质 | 第10-11页 |
| 1.3.2 铁结合性质 | 第11页 |
| 1.3.3 热稳定性 | 第11页 |
| 1.4 乳铁蛋白的生物学功能 | 第11-12页 |
| 1.4.1 促进铁的吸收 | 第11页 |
| 1.4.2 抗菌和杀菌作用 | 第11-12页 |
| 1.4.3 调节免疫功能 | 第12页 |
| 1.4.4 抗病毒作用 | 第12页 |
| 1.4.5 抗氧化作用 | 第12页 |
| 1.4.6 抗肿瘤作用 | 第12页 |
| 1.5 乳铁蛋白的分离纯化及其应用前景 | 第12页 |
| 1.6 乳铁蛋白的检测方法 | 第12-15页 |
| 1.6.1 高效液相色谱法 | 第12-13页 |
| 1.6.2 酶联免疫吸附测定法 | 第13页 |
| 1.6.3 S D S - PA G E电泳法 | 第13页 |
| 1.6.4 放射免疫法 | 第13页 |
| 1.6.5 高效毛细管电泳法 | 第13-15页 |
| 2 牛乳铁蛋白单克隆抗体的制备与鉴定 | 第15-24页 |
| 2.1 实验试剂 | 第15页 |
| 2.2 实验仪器 | 第15页 |
| 2.3 实验动物 | 第15页 |
| 2.4 实验方法 | 第15-18页 |
| 2.4.1 抗原的制备 | 第15页 |
| 2.4.2 动物免疫 | 第15-16页 |
| 2.4.3 血清效价测定 | 第16页 |
| 2.4.4 细胞融合 | 第16-17页 |
| 2.4.4.1 细胞融合前的准备 | 第16-17页 |
| 2.4.4.2 细胞融合 | 第17页 |
| 2.4.4.3 单克隆抗体的制备 | 第17页 |
| 2.4.5 单克隆抗体的特性测定 | 第17-18页 |
| 2.4.5.1 单克隆抗体亚型测定 | 第17页 |
| 2.4.5.2 单克隆抗体效价测定 | 第17页 |
| 2.4.5.3 单克隆抗体亲和力测定 | 第17页 |
| 2.4.5.4 单克隆抗体特异性测定 | 第17-18页 |
| 2.4.6 单克隆抗体的纯化及浓度测定 | 第18页 |
| 2.5 实验结果 | 第18-23页 |
| 2.5.1 免疫小鼠血清效价测定 | 第18页 |
| 2.5.2 抗牛乳铁蛋白单克隆抗体细胞株的建立及抗体的 | 第18-19页 |
| 2.5.3 单克隆抗体的特性测定 | 第19-22页 |
| 2.5.3.1 单克隆抗体效价及特异性测定 | 第19-21页 |
| 2.5.3.2 单克隆抗体亚型测定 | 第21-22页 |
| 2.5.3.3 单克隆抗体亲和力测定 | 第22页 |
| 2.5.4 单克隆抗体的纯化 | 第22-23页 |
| 2.6 结果分析 | 第23-24页 |
| 3 牛乳铁蛋白多克隆抗体的制备与鉴定 | 第24-27页 |
| 3.1 实验试剂 | 第24页 |
| 3.2 实验仪器 | 第24页 |
| 3.3 实验动物 | 第24页 |
| 3.4 实验方法 | 第24-25页 |
| 3.4.1 抗原的制备 | 第24页 |
| 3.4.2 动物免疫及多克隆抗体的获得 | 第24页 |
| 3.4.3 多克隆抗体的效价测定 | 第24-25页 |
| 3.4.4 多克隆抗体的特异性测定 | 第25页 |
| 3.4.5 多克隆抗体的纯化 | 第25页 |
| 3.5 实验结果 | 第25-26页 |
| 3.5.1 多克隆抗体效价测定 | 第25页 |
| 3.5.2 多克隆抗体特异性测定 | 第25-26页 |
| 3.5.3 多克隆抗体纯化 | 第26页 |
| 3.6 结果分析 | 第26-27页 |
| 4 牛乳铁蛋白双抗体夹心ELISA检测方法的建立 | 第27-36页 |
| 4.1 实验试剂 | 第27页 |
| 4.2 实验仪器 | 第27页 |
| 4.3 实验方法 | 第27-29页 |
| 4.3.1 双抗体夹心检测体系的筛选 | 第27-28页 |
| 4.3.2 多克隆抗体最适包被浓度和一抗最适工作浓度的确定 | 第28页 |
| 4.3.3 不同封闭剂的选择 | 第28页 |
| 4.3.4 标准品稀释液的选择 | 第28-29页 |
| 4.3.5 一抗稀释液的选择 | 第29页 |
| 4.3.6 反应标准曲线的建立 | 第29页 |
| 4.3.7 特异性测定 | 第29页 |
| 4.3.8 奶粉样品的检测 | 第29页 |
| 4.4 实验结果 | 第29-34页 |
| 4.4.1 双抗体夹心实验检测体系筛选结果 | 第29-30页 |
| 4.4.2 多克隆抗体最适包被浓度和一抗最适工作浓度的确定 | 第30-31页 |
| 4.4.3 封闭剂的确定 | 第31页 |
| 4.4.4 标准品稀释液的确定 | 第31页 |
| 4.4.5 一抗稀释液的确定 | 第31-32页 |
| 4.4.6 牛乳铁蛋白标准曲线的建立 | 第32页 |
| 4.4.7 特异性测定结果 | 第32-33页 |
| 4.4.8 样品的检测结果 | 第33-34页 |
| 4.5 结果分析 | 第34-36页 |
| 结论 | 第36-38页 |
| 附录 | 第38-39页 |
| 参考文献 | 第39-42页 |
| 致谢 | 第42-43页 |
| 攻读学位期间取得的科研成果清单 | 第43页 |
