| 摘要 | 第3-6页 |
| ABSTRACT | 第6-9页 |
| 第1章 引言 | 第14-26页 |
| 1.1 水产品腐败菌群 | 第14-20页 |
| 1.1.1 水产品腐败与微生物 | 第14-15页 |
| 1.1.2 特定腐败菌 | 第15-20页 |
| 1.1.2.1 特定腐败菌定义和种类 | 第15-17页 |
| 1.1.2.2 特定腐败菌的鉴定 | 第17-18页 |
| 1.1.2.3 特定腐败菌腐败能力的分析 | 第18-19页 |
| 1.1.2.4 希瓦氏菌 | 第19-20页 |
| 1.2 氧化三甲胺还原酶的研究 | 第20-23页 |
| 1.2.1 氧化三甲胺 | 第20页 |
| 1.2.2 三甲胺 | 第20-21页 |
| 1.2.3 氧化三甲胺还原酶 | 第21-23页 |
| 1.2.3.1 氧化三甲胺还原酶的来源和分布 | 第21页 |
| 1.2.3.2 氧化三甲胺还原酶的性质 | 第21页 |
| 1.2.3.3 TMAO reductase的基因簇研究 | 第21-23页 |
| 1.3 本课题的研究思路、目的和意义 | 第23-26页 |
| 第2章 大黄鱼源希瓦氏菌的鉴定和致腐能力分析 | 第26-46页 |
| 2.1 引言 | 第26页 |
| 2.2 材料与仪器设备 | 第26-27页 |
| 2.2.1 原料 | 第26页 |
| 2.2.2 主要实验仪器和试剂 | 第26-27页 |
| 2.2.2.1 实验仪器 | 第26-27页 |
| 2.2.2.2 实验试剂 | 第27页 |
| 2.3 实验方法 | 第27-31页 |
| 2.3.1 生化鉴定 | 第27-28页 |
| 2.3.2 16S rRNA PCR | 第28页 |
| 2.3.3 灭菌鱼汁与无菌鱼块的制备 | 第28页 |
| 2.3.4 接种与贮藏实验 | 第28-29页 |
| 2.3.5 生物被膜形成能力的测定 | 第29页 |
| 2.3.6 AI-2的测定 | 第29页 |
| 2.3.7 感官评价 | 第29页 |
| 2.3.8 菌落总数 | 第29-30页 |
| 2.3.9 TMA 测定 | 第30页 |
| 2.3.10 TVB-N 测定 | 第30页 |
| 2.3.11 生物胺测定 | 第30-31页 |
| 2.3.12 数据处理 | 第31页 |
| 2.4 结果与分析 | 第31-44页 |
| 2.4.1 大黄鱼产H_2S分离株的生化鉴定 | 第31-33页 |
| 2.4.2 大黄鱼产H_2S分离株16S rRNA鉴定和分析 | 第33-36页 |
| 2.4.3 希瓦氏菌在鱼汁中腐败能力的初步分析 | 第36-39页 |
| 2.4.3.1 希瓦氏菌在鱼汁中的感官变化和TVB-N的变化 | 第36-37页 |
| 2.4.3.2 希瓦氏菌在生物被膜的形成能力 | 第37-38页 |
| 2.4.3.3 希瓦氏菌AI-2检测 | 第38-39页 |
| 2.4.4 四株希瓦氏菌在无菌鱼块中腐败能力的评价 | 第39-44页 |
| 2.4.4.1 感官变化 | 第39页 |
| 2.4.4.2 细菌总数 | 第39-40页 |
| 2.4.4.3 TMA | 第40页 |
| 2.4.4.4 TVB-N | 第40-41页 |
| 2.4.4.5 生物胺 | 第41-44页 |
| 2.5 本章小结 | 第44-46页 |
| 第3章 致腐能力差异的希瓦氏菌菌株特性研究 | 第46-56页 |
| 3.1 引言 | 第46页 |
| 3.2 实验材料与仪器设备 | 第46页 |
| 3.2.1 实验仪器 | 第46页 |
| 3.2.2 实验试剂 | 第46页 |
| 3.3 实验方法 | 第46-48页 |
| 3.3.1 最适温度和盐浓度 | 第46-47页 |
| 3.3.2 生长曲线 | 第47页 |
| 3.3.3 生物被膜形成能力的测定 | 第47页 |
| 3.3.4 TMAO还原能力的测定 | 第47页 |
| 3.3.5 胞外蛋白酶活性分析 | 第47页 |
| 3.3.6 QS信号分子的测定 | 第47-48页 |
| 3.3.6.1 AI-2信号分子测定 | 第47页 |
| 3.3.6.2 DKPs含量测定 | 第47-48页 |
| 3.3.7 接种与贮藏实验 | 第48页 |
| 3.3.8 数据处理 | 第48页 |
| 3.4 结果与讨论 | 第48-54页 |
| 3.4.1 温度和盐浓度对希瓦氏菌生长的影响 | 第48-49页 |
| 3.4.2 生长曲线 | 第49-50页 |
| 3.4.3 TMAO还原能力 | 第50页 |
| 3.4.4 胞外蛋白酶活性 | 第50-51页 |
| 3.4.5 生物被膜形成能力 | 第51-52页 |
| 3.4.6 AI-2和DKPs的检测 | 第52-53页 |
| 3.4.7 DKPs(cyclo-(L-Pro-L-Phe))添加对希瓦氏菌在鱼汁中TMA形成的影响 | 第53-54页 |
| 3.5 本章小结 | 第54-56页 |
| 第4章 致腐能力差异希瓦氏菌TMAO还原酶基因的分析 | 第56-74页 |
| 4.1 引言 | 第56页 |
| 4.2 实验材料与仪器设备 | 第56-57页 |
| 4.2.1 实验仪器 | 第56-57页 |
| 4.2.2 实验试剂 | 第57页 |
| 4.3 实验方法 | 第57-60页 |
| 4.3.1 DNA的提取 | 第57页 |
| 4.3.2 torA基因扩增及分析 | 第57页 |
| 4.3.3 细菌培养 | 第57页 |
| 4.3.4 TMA测定 | 第57-58页 |
| 4.3.5 RT-PCR测定torA基因表达量 | 第58-59页 |
| 4.3.6 TMAO还原酶基因簇的扩增和测序 | 第59-60页 |
| 4.4 结果与分析 | 第60-73页 |
| 4.4.1 四株希瓦氏菌torA基因序列扩增和分析 | 第60-61页 |
| 4.4.2 torA基因氨基酸序列比较及进化树分析 | 第61-63页 |
| 4.4.3 希瓦氏菌TorA氨基酸理化性质的软件预测 | 第63-66页 |
| 4.4.4 四株希瓦氏菌torA基因表达量的差别 | 第66-69页 |
| 4.4.4.1 定量PCR扩增曲线及引物特异性分析 | 第66-67页 |
| 4.4.4.2 四株希瓦氏菌torA基因表达量的差别 | 第67-69页 |
| 4.4.5 TMAO对S.baltica XH2生长和TMA形成影响 | 第69-70页 |
| 4.4.6 RT-PCR定量S.baltica XH2 torA基因 | 第70页 |
| 4.4.7 S.baltica XH2 TMAO还原酶基因簇序列分析 | 第70-73页 |
| 4.5 本章小结 | 第73-74页 |
| 第5章 总结、创新点与展望 | 第74-76页 |
| 5.1 研究结论 | 第74页 |
| 5.2 创新点 | 第74-75页 |
| 5.3 展望 | 第75-76页 |
| 参考文献 | 第76-86页 |
| 致谢 | 第86-88页 |
| 硕士期间完成的论文 | 第88-90页 |
