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鱼精蛋白对金黄色葡萄球菌生物膜干预作用的初步研究

目录第1-9页
摘要第9-11页
Abstract第11-13页
英文缩略语及中文对照第13-14页
第一章 绪论第14-23页
 1 鱼精蛋白概述第14-17页
   ·鱼精蛋白的理化性质第14-15页
   ·鱼精蛋白提取与纯化第15页
   ·鱼精蛋白的抗菌特性第15-16页
   ·鱼精蛋白的抑菌机理第16页
   ·鱼精蛋白在食品中的应用第16-17页
 2 金黄色葡萄球菌概述第17页
 3 细菌生物膜概述第17-21页
   ·生物膜的形成过程第18-19页
   ·人工生物膜发生装置第19页
   ·生物膜的检测技术第19-20页
   ·生物膜的控制方法第20页
   ·生物膜胞外聚合物第20-21页
   ·细菌生物膜与食品安全第21页
 4 立题背景与意义第21-22页
 5 主要研究内容第22-23页
   ·金黄色葡萄球菌生物膜模型的构建第22页
   ·鱼精蛋白对金黄色葡萄球菌生物膜形态及活菌的影响第22页
   ·鱼精蛋白对金黄色葡萄球菌生物胞外多糖的影响第22页
   ·鱼精蛋白对金黄色葡萄球菌生物膜PIA表达和eDNA合成的影响第22-23页
第二章 金黄色葡萄球菌生物膜模型的构建第23-32页
 1 实验材料与仪器第23-25页
   ·菌株第23页
   ·主要试剂与耗材第23-24页
   ·常用缓冲液及其它试剂的配制第24页
   ·仪器第24-25页
 2 实验方法第25-27页
   ·金黄色葡萄球菌生物膜形成能力的鉴定第25页
     ·菌种复苏第25页
     ·刚果红平板法定性生物膜形成菌株第25页
   ·金黄色葡萄球菌静置生物膜模型的建立第25-27页
     ·标准菌悬液制备第25-26页
     ·盖玻片的清洗第26页
     ·金黄色葡萄球菌生物膜模型建立第26页
     ·金黄色葡萄球菌黏附观察第26页
     ·金黄色葡萄球菌生物膜鉴定和观察第26页
     ·连续稀释法测生物膜内活菌数第26-27页
 3 实验结果第27-30页
   ·金黄色葡萄球菌生物膜形成能力的鉴定第27页
   ·金黄色葡萄球菌静置生物膜模型的建立第27-30页
     ·金黄色葡萄球菌黏附观察第27-28页
     ·金黄色葡萄球菌生物膜鉴定和观察第28-29页
     ·连续稀释法对生物膜内活菌数的测定第29-30页
 4 小结第30页
 5 讨论第30-32页
第三章 鱼精蛋白对金黄色葡萄球菌生物膜形态和细菌数量的影响第32-43页
 1 实验材料与仪器第32-34页
   ·菌株第32页
   ·主要试剂与耗材第32-33页
   ·常用缓冲液及其它试剂的配制第33页
   ·仪器第33-34页
 2 实验方法第34-37页
   ·鱼精蛋白对金黄色葡萄球菌MIC及MBC的测定第34-35页
     ·标准菌悬液制备第34页
     ·鱼精蛋白溶液配制第34页
     ·抑菌实验第34-35页
   ·鱼精蛋白对金黄色葡萄球菌生物膜的影响第35-37页
     ·标准菌悬液制备第35页
     ·鱼精蛋白溶液的配制第35页
     ·鱼精蛋白对金黄色葡萄球菌生物膜形成的影响第35-36页
       ·金黄色葡萄球菌生物膜模型建立第35页
       ·银染法观察金黄色葡萄球菌生物膜第35页
       ·连续稀释法测生物膜内活菌数第35-36页
       ·统计分析第36页
     ·鱼精蛋白对成熟的金黄色葡萄球菌生物膜的影响第36-37页
       ·金黄色葡萄球菌生物膜模型建立第36页
       ·银染法观察金黄色葡萄球菌生物膜第36页
       ·连续稀释法测生物膜内活菌数第36页
       ·统计分析第36-37页
 3 实验结果第37-41页
   ·鱼精蛋白对金黄色葡萄球菌MIC及MBC的测定第37页
   ·鱼精蛋白对金黄色葡萄球菌生物膜的影响第37-41页
     ·鱼精蛋白对金黄色葡萄球菌生物膜形成的影响第37-39页
       ·银染法观察金黄色葡萄球菌生物膜第37-39页
       ·连续稀释法测定生物膜内活菌数第39页
     ·鱼精蛋白对成熟的金黄色葡萄球菌生物膜的影响第39-41页
       ·银染法观察金黄色葡萄球菌生物膜第39-41页
       ·连续稀释法测定生物膜内活菌数第41页
 4 小结第41-42页
 5 讨论第42-43页
第四章 鱼精蛋白对金黄色葡萄球菌生物膜胞外多糖的影响第43-61页
 1 实验材料与仪器第43-45页
   ·菌株第43页
   ·主要试剂与耗材第43-44页
   ·常用缓冲液及其它试剂的配制第44页
   ·仪器第44-45页
 2 实验方法第45-49页
   ·菌种复苏第45页
   ·标准菌悬液制备第45页
   ·鱼精蛋白对金黄色葡萄球菌生物膜胞外多糖的影响第45-47页
     ·鱼精蛋白溶液的配制第45页
     ·生物膜标本制备第45-46页
       ·初始加入鱼精蛋白对金黄色葡萄球菌生物膜的影响第45-46页
       ·鱼精蛋白对成熟金黄色葡萄球菌生物膜的影响第46页
     ·生物膜中胞外多糖荧光染色第46页
     ·荧光显微镜观察第46页
     ·图像分析第46页
     ·统计分析第46-47页
   ·金黄色葡葡球菌生物膜胞外多糖的提取第47-49页
     ·蒽酮法测定总糖含量标准曲线的制作第47页
     ·生物膜标本制备第47-48页
       ·初始加入鱼精蛋白对金黄色葡萄球菌生物膜形成的影响第47-48页
       ·鱼精蛋白对成熟金黄色葡萄球生物膜的影响第48页
     ·黏附金黄色葡萄球菌的菌量测定第48页
     ·黏附金黄色葡萄球菌合成水溶性与水不溶性胞外多糖的测定第48页
     ·黏附状态金黄色葡萄球菌产糖能力的计算第48-49页
   ·统计学分析第49页
 3 结果与分析第49-59页
   ·观察鱼精蛋白对金黄色葡萄球菌生物膜胞外多糖的影响第49-54页
     ·初始加入鱼精蛋白对金黄色葡萄球菌生物膜形成胞外多糖的影响第49-51页
     ·鱼精蛋白对培养不同时间的金黄色葡萄球菌生物膜胞外多糖的影响第51-54页
   ·鱼精蛋白对金黄色葡萄球菌生物膜水溶性及水不溶性胞外多糖的影响第54-57页
     ·蒽酮法测定总糖含量标准曲线第54页
     ·不同培养条件下金黄色葡萄球菌生物膜黏附菌的质量第54-55页
     ·初始加入鱼精蛋白对黏附细菌产胞外多糖能力的影响第55-57页
       ·初始加入鱼精蛋白对黏附细菌产水溶性胞外多糖能力的影响第55-56页
       ·初始加入鱼精蛋白对黏附细菌产水不溶性胞外多糖能力的影响第56-57页
   ·生物膜形成后加入鱼精蛋白对黏附细菌产胞外多糖的影响第57-59页
     ·生物膜形成后加入鱼精蛋白对黏附细菌产水溶性胞外多糖能力的影响第57-58页
     ·生物膜形成后加入鱼精蛋白对粘附细菌产水不溶性胞外多糖能力的影响第58-59页
 4 小结第59-60页
 5 讨论第60-61页
第五章 鱼精蛋白对金黄色葡萄球菌生物膜PIA表达和eDNA分泌的影响第61-70页
 1 实验材料与仪器第61-63页
   ·菌株第61页
   ·主要试剂与耗材第61-62页
   ·常用缓冲液及其它试剂的配制第62-63页
   ·仪器第63页
 2 实验方法第63-66页
   ·标准菌悬液的制备第63页
   ·金黄色葡萄球菌生物膜培养第63-64页
   ·PIA提取与检测第64页
   ·eDNA提取与检测第64-66页
     ·荧光扫描波长的确定第64-65页
     ·标准曲线的绘制第65页
     ·eDNA提取第65-66页
     ·eDNA含量检测第66页
     ·统计分析第66页
 3 结果第66-69页
   ·鱼精蛋白对PIA表达的影响第66-67页
   ·鱼精蛋白对eDNA分泌的影响第67-69页
     ·荧光光度法测定eDNA含量标准曲线的绘制第67-68页
     ·eDNA含量的测定第68-69页
 4 小结第69页
 5 讨论第69-70页
第六章 总结与展望第70-72页
 1 总结第70-71页
 2 展望第71-72页
参考文献第72-79页
致谢第79页

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