摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
第1章 绪论 | 第11-20页 |
1.1 课题背景及研究目的和意义 | 第11页 |
1.2 乳酸菌化学合成培养基 | 第11页 |
1.3 高密度培养的限制因素 | 第11-16页 |
1.3.1 营养成分限制 | 第12-14页 |
1.3.2 代谢产物因素 | 第14-15页 |
1.3.3 培养条件限制 | 第15-16页 |
1.4 细胞分裂机制 | 第16-18页 |
1.4.1 细胞分裂环-Z 环形成 | 第16-17页 |
1.4.2 FtsZ 蛋白 | 第17页 |
1.4.3 青霉素结合蛋白 | 第17-18页 |
1.5 国内外文研究现状 | 第18-19页 |
1.6 本课题主要研究内容 | 第19-20页 |
第2章 材料与方法 | 第20-29页 |
2.1 实验试剂及材料 | 第20-21页 |
2.1.1 实验菌株 | 第20页 |
2.1.2 实验试剂 | 第20-21页 |
2.1.3 实验仪器 | 第21页 |
2.2 化学合成培养基优化 | 第21-24页 |
2.2.1 培养基的配制 | 第21-22页 |
2.2.2 单因素实验水平选取 | 第22-24页 |
2.2.3 菌体生长曲线绘制 | 第24页 |
2.3 分段培养策略研究 | 第24-25页 |
2.3.1 变温培养对菌体浓度的影响 | 第24-25页 |
2.3.2 变 pH 培养对菌体浓度的影响 | 第25页 |
2.3.3 菌体活力的测定 | 第25页 |
2.3.4 菌体密度测定 | 第25页 |
2.4 青霉素结合蛋白与生长关系研究 | 第25-28页 |
2.4.1 提取膜蛋白 | 第25页 |
2.4.2 Pierce BCA Protein Assay Kit 测定蛋白浓度 | 第25-26页 |
2.4.3 S.thermophilus sp1.1 青霉素结合蛋白的鉴定 | 第26页 |
2.4.4 蛋白含量对荧光强度的影响 | 第26-27页 |
2.4.5 荧光青霉素加量对荧光强度的影响 | 第27页 |
2.4.6 不同生长阶段青霉素结合蛋白含量变化 | 第27页 |
2.4.7 SDS-PAGE 电泳测定膜总蛋白分子量 | 第27-28页 |
2.4.8 青霉素结合蛋白荧光标记凝胶电泳及荧光定量 | 第28页 |
2.5 实验数据处理及分析 | 第28-29页 |
第3章 化学合成培养基优化 | 第29-44页 |
3.1 化学合成培养基与 MRS 培养基比较 | 第29页 |
3.2 组分单因素实验 | 第29-33页 |
3.3 Plackett-Burman 实验设计 | 第33-36页 |
3.4 最陡爬坡实验 | 第36页 |
3.5 响应面实验 | 第36-43页 |
3.5.1 响应面实验因素水平 | 第36-37页 |
3.5.2 响应面实验设计及结果 | 第37-39页 |
3.5.3 菌体密度响应面分析 | 第39-43页 |
3.6 本章小结 | 第43-44页 |
第4章 营养成分必要性研究 | 第44-50页 |
4.1 单一因素扣除实验 | 第44-46页 |
4.2 多因素扣除实验 | 第46-49页 |
4.3 本章小结 | 第49-50页 |
第5章 分段培养条件对菌体生长研究 | 第50-58页 |
5.1 变温培养研究 | 第50-53页 |
5.1.1 延滞期末期变温培养研究 | 第50-52页 |
5.1.2 对数期末期变温培养研究 | 第52-53页 |
5.2 变 pH 培养培养 | 第53-57页 |
5.2.1 延滞期末期变 pH 培养研究 | 第54-55页 |
5.2.2 对数期末期变 pH 培养研究 | 第55-57页 |
5.3 本章小结 | 第57-58页 |
第6章 青霉素结合蛋白与菌体生长关系 | 第58-67页 |
6.1 荧光青霉素标记方法可行性研究 | 第58-62页 |
6.1.1 膜蛋白提取 | 第58-59页 |
6.1.2 S.thermophilus sp1.1 青霉素结合蛋白的鉴定 | 第59-60页 |
6.1.3 蛋白含量对荧光强度的影响 | 第60-61页 |
6.1.4 荧光青霉素加量对成像的影响 | 第61-62页 |
6.2 不同生长阶段青霉素结合蛋白含量变化 | 第62-65页 |
6.3 本章小结 | 第65-67页 |
结论 | 第67-69页 |
参考文献 | 第69-76页 |
附录 | 第76-80页 |
附录 1 | 第76-78页 |
附录 2 | 第78-80页 |
致谢 | 第80页 |