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罗伦隐球酵母rho1基因的克隆及其在酿酒酵母中的转化和表达

致谢第6-9页
摘要第9-10页
Abstract第10-11页
1 文献综述第15-30页
    1.1 果实采后病害第15页
    1.2 拮抗微生物防治第15-18页
        1.2.1 营养和空间的竞争第16-17页
        1.2.2 重寄生作用第17页
        1.2.3 诱导果实产生抗性机制第17页
        1.2.4 分泌水解酶和杀菌物质第17-18页
    1.3 采后逆境胁迫第18-20页
        1.3.1 高温胁迫第18页
        1.3.2 氧化胁迫第18-19页
        1.3.3 渗透压胁迫第19-20页
    1.4 酵母细胞壁结构与功能第20-21页
    1.5 细胞壁完整性(CWI)信号通路架构第21-25页
        1.5.1 细胞表面感受器第22页
        1.5.2 Rho1活性调节因子第22-23页
        1.5.3 Rho1 GTP酶第23-24页
        1.5.4 MAPK信号通路第24-25页
        1.5.5 转录因子第25页
    1.6 提高拮抗微生物生防效力概况第25-28页
        1.6.1 从逆境下分离拮抗微生物第26页
        1.6.2 逆境胁迫预处理第26页
        1.6.3 培养条件优化第26-28页
        1.6.4 外源基因向酵母转化第28页
    1.7 本论文研究意义及主要内容第28-30页
2 罗伦隐球酵母rho1基因的序列分析第30-49页
    2.1 前言第30页
    2.2 材料与方法第30-34页
        2.2.1 试验材料第30-31页
        2.2.2 罗伦隐球酵母转录组测序第31-32页
        2.2.3 罗伦隐球酵母rho1基因序列的获取第32页
        2.2.4 多序列对比及进化树绘制第32-33页
        2.2.5 RHO1蛋白结构和功能预测第33-34页
    2.3 结果与分析第34-48页
        2.3.1 转录组组装结果分析和功能注释第34-36页
        2.3.2 罗伦隐球酵母rho1基因cDNA序列第36-39页
        2.3.3 Rho1蛋白氨基酸多序列对比第39-41页
        2.3.4 构建系统进化树第41-42页
        2.3.5 Rho1蛋白质结构和功能预测第42-48页
    2.4 讨论第48-49页
3 罗伦隐球酵母rho1基因的克隆及转化第49-70页
    3.1 前言第49-50页
    3.2 材料与方法第50-63页
        3.2.1 菌株和质粒第50页
        3.2.2 培养基第50-51页
        3.2.3 引物第51页
        3.2.4 试验试剂和溶液第51-52页
        3.2.5 试验仪器第52-53页
        3.2.6 试验方法第53-63页
    3.3 结果与分析第63-69页
        3.3.1 罗伦隐球酵母rho1基因检验第63页
        3.3.2 罗伦隐球酵母总RNA提取和cDNA合成第63-64页
        3.3.3 rho1基因扩增和回收第64-65页
        3.3.4 目的基因与载体连接第65-66页
        3.3.5 大肠杆菌感受态细胞转化第66-67页
        3.3.6 酿酒酵母电转化第67-69页
    3.4 小结第69-70页
4 重组酿酒酵母抗逆性和生防效力评价第70-86页
    4.1 前言第70页
    4.2 材料与方法第70-75页
        4.2.1 菌株第70页
        4.2.2 培养基第70-71页
        4.2.3 试验试剂和材料第71页
        4.2.4 试验方法第71-75页
    4.3 结果与分析第75-84页
        4.3.1 酵母生长动态测定第75-76页
        4.3.2 重组酿酒酵母表达时间优化第76-77页
        4.3.3 温度梯度对于重组酵母存活率影响第77-78页
        4.3.4 渗透压梯度对重组酵母存活率影响第78页
        4.3.5 渗透压梯度对重组酵母生长动态影响第78-80页
        4.3.6 酿酒酵母对梨果实青霉病害的抑制作用第80-81页
        4.3.7 高温条件下重组酵母对梨果实青霉病的抑制作用第81-82页
        4.3.8 高渗透压条件下重组酵母对梨果实青霉病的抑制作用第82-84页
    4.4 讨论第84-86页
5 结论与展望第86-88页
    5.1 研究结论第86页
    5.2 主要创新点第86-87页
    5.3 研究展望第87-88页
参考文献第88-100页
作者简介第100页

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