致谢 | 第6-9页 |
摘要 | 第9-10页 |
Abstract | 第10-11页 |
1 文献综述 | 第15-30页 |
1.1 果实采后病害 | 第15页 |
1.2 拮抗微生物防治 | 第15-18页 |
1.2.1 营养和空间的竞争 | 第16-17页 |
1.2.2 重寄生作用 | 第17页 |
1.2.3 诱导果实产生抗性机制 | 第17页 |
1.2.4 分泌水解酶和杀菌物质 | 第17-18页 |
1.3 采后逆境胁迫 | 第18-20页 |
1.3.1 高温胁迫 | 第18页 |
1.3.2 氧化胁迫 | 第18-19页 |
1.3.3 渗透压胁迫 | 第19-20页 |
1.4 酵母细胞壁结构与功能 | 第20-21页 |
1.5 细胞壁完整性(CWI)信号通路架构 | 第21-25页 |
1.5.1 细胞表面感受器 | 第22页 |
1.5.2 Rho1活性调节因子 | 第22-23页 |
1.5.3 Rho1 GTP酶 | 第23-24页 |
1.5.4 MAPK信号通路 | 第24-25页 |
1.5.5 转录因子 | 第25页 |
1.6 提高拮抗微生物生防效力概况 | 第25-28页 |
1.6.1 从逆境下分离拮抗微生物 | 第26页 |
1.6.2 逆境胁迫预处理 | 第26页 |
1.6.3 培养条件优化 | 第26-28页 |
1.6.4 外源基因向酵母转化 | 第28页 |
1.7 本论文研究意义及主要内容 | 第28-30页 |
2 罗伦隐球酵母rho1基因的序列分析 | 第30-49页 |
2.1 前言 | 第30页 |
2.2 材料与方法 | 第30-34页 |
2.2.1 试验材料 | 第30-31页 |
2.2.2 罗伦隐球酵母转录组测序 | 第31-32页 |
2.2.3 罗伦隐球酵母rho1基因序列的获取 | 第32页 |
2.2.4 多序列对比及进化树绘制 | 第32-33页 |
2.2.5 RHO1蛋白结构和功能预测 | 第33-34页 |
2.3 结果与分析 | 第34-48页 |
2.3.1 转录组组装结果分析和功能注释 | 第34-36页 |
2.3.2 罗伦隐球酵母rho1基因cDNA序列 | 第36-39页 |
2.3.3 Rho1蛋白氨基酸多序列对比 | 第39-41页 |
2.3.4 构建系统进化树 | 第41-42页 |
2.3.5 Rho1蛋白质结构和功能预测 | 第42-48页 |
2.4 讨论 | 第48-49页 |
3 罗伦隐球酵母rho1基因的克隆及转化 | 第49-70页 |
3.1 前言 | 第49-50页 |
3.2 材料与方法 | 第50-63页 |
3.2.1 菌株和质粒 | 第50页 |
3.2.2 培养基 | 第50-51页 |
3.2.3 引物 | 第51页 |
3.2.4 试验试剂和溶液 | 第51-52页 |
3.2.5 试验仪器 | 第52-53页 |
3.2.6 试验方法 | 第53-63页 |
3.3 结果与分析 | 第63-69页 |
3.3.1 罗伦隐球酵母rho1基因检验 | 第63页 |
3.3.2 罗伦隐球酵母总RNA提取和cDNA合成 | 第63-64页 |
3.3.3 rho1基因扩增和回收 | 第64-65页 |
3.3.4 目的基因与载体连接 | 第65-66页 |
3.3.5 大肠杆菌感受态细胞转化 | 第66-67页 |
3.3.6 酿酒酵母电转化 | 第67-69页 |
3.4 小结 | 第69-70页 |
4 重组酿酒酵母抗逆性和生防效力评价 | 第70-86页 |
4.1 前言 | 第70页 |
4.2 材料与方法 | 第70-75页 |
4.2.1 菌株 | 第70页 |
4.2.2 培养基 | 第70-71页 |
4.2.3 试验试剂和材料 | 第71页 |
4.2.4 试验方法 | 第71-75页 |
4.3 结果与分析 | 第75-84页 |
4.3.1 酵母生长动态测定 | 第75-76页 |
4.3.2 重组酿酒酵母表达时间优化 | 第76-77页 |
4.3.3 温度梯度对于重组酵母存活率影响 | 第77-78页 |
4.3.4 渗透压梯度对重组酵母存活率影响 | 第78页 |
4.3.5 渗透压梯度对重组酵母生长动态影响 | 第78-80页 |
4.3.6 酿酒酵母对梨果实青霉病害的抑制作用 | 第80-81页 |
4.3.7 高温条件下重组酵母对梨果实青霉病的抑制作用 | 第81-82页 |
4.3.8 高渗透压条件下重组酵母对梨果实青霉病的抑制作用 | 第82-84页 |
4.4 讨论 | 第84-86页 |
5 结论与展望 | 第86-88页 |
5.1 研究结论 | 第86页 |
5.2 主要创新点 | 第86-87页 |
5.3 研究展望 | 第87-88页 |
参考文献 | 第88-100页 |
作者简介 | 第100页 |