摘要 | 第6-7页 |
ABSTRACT | 第7-8页 |
第一章 文献综述 | 第9-17页 |
1.1 纳豆激酶与血栓性疾病 | 第9-11页 |
1.1.1 纳豆激酶 | 第9-10页 |
1.1.2 血栓性疾病及溶栓剂 | 第10-11页 |
1.1.3 纳豆激酶和溶栓剂 | 第11页 |
1.2 纳豆激酶胶囊的制备 | 第11-15页 |
1.2.1 纳豆激酶活性的测定方法 | 第11-12页 |
1.2.2 纳豆激酶的制备 | 第12-13页 |
1.2.3 纳豆激酶的分离纯化 | 第13-14页 |
1.2.4 纳豆激酶的理化性质 | 第14-15页 |
1.2.5 纳豆激酶胶囊 | 第15页 |
1.3 课题研究的内容及意义 | 第15-17页 |
1.3.1 课题研究的意义 | 第15-16页 |
1.3.2 研究的内容 | 第16页 |
1.3.3 创新点 | 第16-17页 |
第二章 高产纳豆激酶菌株的筛选及鉴定 | 第17-25页 |
2.1 材料与仪器 | 第17-18页 |
2.1.1 材料 | 第17页 |
2.1.2 试剂 | 第17页 |
2.1.3 培养基 | 第17页 |
2.1.4 仪器与设备 | 第17-18页 |
2.2 方法 | 第18-19页 |
2.2.1 菌株的初筛 | 第18页 |
2.2.2 菌株的复筛 | 第18页 |
2.2.3 生理生化试验 | 第18页 |
2.2.4 菌株的分子生物学鉴定 | 第18-19页 |
2.3 结果与分析 | 第19-23页 |
2.3.1 菌株初筛结果 | 第19页 |
2.3.2 菌株的复筛 | 第19-20页 |
2.3.3 BN菌株的菌落特征和细胞形态 | 第20页 |
2.3.4 BN菌株的生理生化试验 | 第20-21页 |
2.3.5 BN菌株的分子生物学鉴定 | 第21-23页 |
2.4 结论 | 第23-25页 |
第三章 纳豆芽孢杆菌液态发酵产纳豆激酶条件的优化 | 第25-37页 |
3.1 材料与仪器 | 第25-26页 |
3.1.1 材料与试剂 | 第25页 |
3.1.2 仪器与设备 | 第25-26页 |
3.2 方法 | 第26-27页 |
3.2.1 纳豆芽孢杆菌的生长曲线 | 第26页 |
3.2.2 粗酶液的制备 | 第26页 |
3.2.3 纳豆激酶活力的测定方法 | 第26页 |
3.2.4 发酵培养基的优化 | 第26页 |
3.2.5 发酵条件的优化 | 第26-27页 |
3.3 结果与分析 | 第27-35页 |
3.3.1 生长曲线 | 第27-28页 |
3.3.2 碳源对产纳豆激酶活性的影响 | 第28页 |
3.3.3 氮源对产纳豆激酶活性的影响 | 第28-29页 |
3.3.4 无机盐对产酶的影响 | 第29-30页 |
3.3.5 发酵温度对产纳豆激酶活性的影响 | 第30-31页 |
3.3.6 初始pH对产纳豆激酶活性的影响 | 第31页 |
3.3.7 发酵时间对产纳豆激酶活性的影响 | 第31-32页 |
3.3.8 接种量对产纳豆激酶活性的影响 | 第32-33页 |
3.3.9 响应面法对纳豆芽孢杆菌发酵生产纳豆激酶条件的优化结果 | 第33-35页 |
3.4 结论 | 第35-37页 |
第四章 纳豆激酶的分离纯化及其性质的测定 | 第37-46页 |
4.1 材料与仪器 | 第37-38页 |
4.1.1 菌种 | 第37页 |
4.1.2 培养基 | 第37页 |
4.1.3 试剂 | 第37页 |
4.1.4 主要仪器设备 | 第37-38页 |
4.2 方法 | 第38-39页 |
4.2.1 蛋白质浓度的测定 | 第38页 |
4.2.2 纳豆激酶酶活的测定 | 第38页 |
4.2.3 纳豆激酶的液态发酵及粗酶液的制备 | 第38页 |
4.2.4 硫酸铵分级盐析 | 第38页 |
4.2.5 透析 | 第38页 |
4.2.6 SDS-PAGE电泳检测 | 第38页 |
4.2.7 纳豆激酶性质的测定 | 第38-39页 |
4.3 结果与分析 | 第39-45页 |
4.3.1 考马斯亮蓝标准曲线 | 第39页 |
4.3.2 硫酸铵盐析曲线 | 第39-40页 |
4.3.3 透析后对纳豆激酶酶活的影响 | 第40-41页 |
4.3.4 SDS-PAGE电泳检测 | 第41页 |
4.3.5 纳豆激酶的性质 | 第41-45页 |
4.4 结论 | 第45-46页 |
第五章 纳豆激酶胶囊真空冷冻保护剂配方的优化及稳定性的测定 | 第46-56页 |
5.1 材料与设备 | 第46-47页 |
5.1.1 菌种 | 第46页 |
5.1.2 培养基 | 第46页 |
5.1.3 试剂 | 第46页 |
5.1.4 主要仪器设备 | 第46-47页 |
5.1.5 溶液 | 第47页 |
5.2 方法 | 第47-48页 |
5.2.1 保护剂对纳豆激酶活性的保护作用 | 第47-48页 |
5.2.2 纳豆激酶胶囊的生化特性 | 第48页 |
5.3 结果与分析 | 第48-55页 |
5.3.1 麦芽糊精对纳豆激酶活性的保护作用 | 第48-49页 |
5.3.2 葡萄糖对纳豆激酶活性的保护作用 | 第49-50页 |
5.3.3 明胶对纳豆激酶活性的保护作用 | 第50页 |
5.3.4 可溶性淀粉对纳豆激酶活性的保护作用 | 第50-51页 |
5.3.5 海藻糖对纳豆激酶活性的保护作用 | 第51页 |
5.3.6 保护剂优化的正交试验结果 | 第51-53页 |
5.3.7 大豆卵磷脂对纳豆激酶胶囊在胃液中的保护作用 | 第53页 |
5.3.8 纳豆激酶胶囊在人工模拟胃肠液中稳定性 | 第53-54页 |
5.3.9 纳豆激酶胶囊的贮藏性 | 第54-55页 |
5.4 结论 | 第55-56页 |
第六章 结论与展望 | 第56-58页 |
6.1 总结 | 第56-57页 |
6.2 展望 | 第57-58页 |
参考文献 | 第58-65页 |
致谢 | 第65-66页 |
作者简介 | 第66页 |