| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-15页 |
| 前言 | 第15-39页 |
| 第一章 鸡肉食品中金刚烷胺残留的调查分析 | 第39-51页 |
| 0 引言 | 第39-40页 |
| 1 材料 | 第40-41页 |
| ·实验仪器 | 第40页 |
| ·化学试剂 | 第40页 |
| ·溶液体系 | 第40-41页 |
| 2 方法 | 第41-43页 |
| ·采集地点 | 第41页 |
| ·采集批次及数量 | 第41页 |
| ·样品前处理 | 第41-42页 |
| ·色谱条件 | 第42页 |
| ·质谱条件 | 第42页 |
| ·方法的线性范围和检出限 | 第42-43页 |
| ·鸡肉样品的分析 | 第43页 |
| ·养殖领域的金刚烷胺使用情况调查 | 第43页 |
| 3 结果 | 第43-47页 |
| ·线性范围和最低检出限 | 第43-44页 |
| ·不同鸡肉样品中金刚烷胺残留 | 第44-46页 |
| ·金刚烷胺的使用情况调查结果 | 第46-47页 |
| 4 讨论 | 第47-48页 |
| 5 结论 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-51页 |
| 第二章 金刚烷胺生物识别材料的制备 | 第51-90页 |
| 0 引言 | 第51-52页 |
| 1 材料 | 第52-56页 |
| ·仪器 | 第52-53页 |
| ·材料 | 第53-54页 |
| ·实验用试剂 | 第54-56页 |
| 2 方法 | 第56-68页 |
| ·M2 蛋白的编码基因合成及 pET11a-M2 载体的构建 | 第56页 |
| ·大肠杆菌感受态的制备及质粒转化 | 第56-57页 |
| ·阳性大肠杆菌表达菌株的筛选 | 第57-59页 |
| ·SDS-PAGE 胶片配制及样品处理 | 第57-58页 |
| ·SDS-PAGE 电泳步骤 | 第58-59页 |
| ·重组菌种的遗传稳定性筛选 | 第59页 |
| ·阳性菌株的 PCR 鉴定及酶切鉴定 | 第59-61页 |
| ·表达菌种的粗筛及质粒提取 | 第59-60页 |
| ·PCR 鉴定 | 第60-61页 |
| ·双酶切鉴定 | 第61页 |
| ·重组大肠杆菌生长曲线的建立及诱导时间的优化 | 第61页 |
| ·目的蛋白的 IPTG 诱导浓度优化 | 第61-62页 |
| ·诱导转速的优化 | 第62页 |
| ·诱导温度的优化 | 第62-63页 |
| ·重组大肠杆菌表达条件的验证 | 第63页 |
| ·重组蛋白的 western blotting 分析 | 第63-64页 |
| ·菌体培养及电泳分析 | 第63页 |
| ·电转移 | 第63-64页 |
| ·PVDF 膜转印效果判定 | 第64页 |
| ·抗原抗体反应 | 第64页 |
| ·重组蛋白的制备 | 第64-65页 |
| ·菌体的培养 | 第64-65页 |
| ·菌体的前处理 | 第65页 |
| ·粗提蛋白的含量测定 | 第65-66页 |
| ·复性辅助因子的优化 | 第66页 |
| ·重组蛋白的纯化 | 第66-67页 |
| ·重组蛋白的复性 | 第67-68页 |
| 3 结果 | 第68-85页 |
| ·重组大肠杆菌表达系统的构建 | 第68-72页 |
| ·重组蛋白表达菌株的筛选 | 第72-73页 |
| ·重组表达菌株的传代稳定性筛选 | 第73-75页 |
| ·质粒 PCR 及双酶切鉴定结果 | 第75-77页 |
| ·大肠杆菌 EC06 株生长曲线的测定及诱导表达时间的确定 | 第77-78页 |
| ·IPTG 诱导浓度的优化结果 | 第78-79页 |
| ·重组大肠杆菌 EC06 株诱导转速的优化结果 | 第79-80页 |
| ·IPTG诱导温度与培养转速的优化 | 第80-81页 |
| ·重组大肠杆菌 EC06 株在优化后培养条件验证 | 第81-82页 |
| ·重组蛋白的 Western Blotting 分析 | 第82-83页 |
| ·蛋白含量测定及蛋白复性辅助因子的浓度筛选 | 第83-85页 |
| ·重组蛋白的纯化及复性 | 第85页 |
| 4 讨论 | 第85-87页 |
| 5 结论 | 第87页 |
| 参考文献 | 第87-90页 |
| 第三章 金刚烷胺生物识别材料的亲和活性评价 | 第90-113页 |
| 0 引言 | 第90页 |
| 1 材料 | 第90-93页 |
| ·实验仪器 | 第90-91页 |
| ·实验材料 | 第91-92页 |
| ·实验用溶液 | 第92-93页 |
| 2 方法 | 第93-101页 |
| ·重组蛋白的生物活性分析 | 第93-95页 |
| ·直接法—平衡透析法 | 第93页 |
| ·数据处理 | 第93页 |
| ·ELISA 法 | 第93-95页 |
| ·载体蛋白（cOVA）的活化 | 第95页 |
| ·金刚烷胺包被偶联物的合成 | 第95-96页 |
| ·偶联物的鉴定及筛选 | 第96页 |
| ·测试条件优化 | 第96-98页 |
| ·最佳测定浓度的筛选 | 第96-97页 |
| ·最佳酶标抗体稀释度选择 | 第97-98页 |
| ·特异性测定 | 第98-100页 |
| ·交叉反应率的测定 | 第100-101页 |
| ·重组蛋白与金刚乙胺的交叉反应率 | 第100页 |
| ·重组蛋白与利巴韦林的交叉反应率 | 第100-101页 |
| ·重组蛋白与吗啉胍的交叉反应率 | 第101页 |
| 3 结果与分析 | 第101-108页 |
| ·重组 M2 受体蛋白对于金刚烷胺的亲和活性分析 | 第101-102页 |
| ·重组 M2 受体蛋白的 ELISA 检测实验结果 | 第102-103页 |
| ·偶联物的鉴定 | 第103页 |
| ·特异性测定 | 第103-108页 |
| ·最佳测试条件的筛选 | 第103-104页 |
| ·特异性测定结果（IC50值测定） | 第104-106页 |
| ·重组蛋白与其他药物的交叉反应率测定 | 第106-108页 |
| 4 讨论 | 第108-109页 |
| 5 结论 | 第109-111页 |
| 参考文献 | 第111-113页 |
| 第四章 金刚烷胺残留检测体系的评价 | 第113-121页 |
| 0 引言 | 第113页 |
| 1 材料 | 第113-114页 |
| ·实验仪器 | 第113页 |
| ·实验耗材 | 第113-114页 |
| ·实验用溶液 | 第114页 |
| 2 方法 | 第114-116页 |
| ·生物基质的处理 | 第114-115页 |
| ·生物基质对金刚烷胺生物识别材料的影响评价 | 第115-116页 |
| ·金刚烷胺残留亲和检测体系的稳定性评价 | 第116页 |
| 3 结果与分析 | 第116-119页 |
| ·生物基质对金刚烷胺生物识别材料的影响评价结果 | 第116-118页 |
| ·金刚烷胺残留亲和检测体系的稳定性评价结果 | 第118-119页 |
| 4 讨论 | 第119-120页 |
| 5 结论 | 第120页 |
| 参考文献 | 第120-121页 |
| 结论与展望 | 第121-123页 |
| 1 本研究的主要成果 | 第121-122页 |
| 2 论文的创新性及展望 | 第122-123页 |
| ·论文的创新性 | 第122页 |
| ·下一步研究展望 | 第122-123页 |
| 致谢 | 第123-124页 |
| 个人简历 | 第124-125页 |
| 发表的学术论文 | 第125-126页 |
