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副溶血弧菌的分子检测与基因分型研究

摘要第1-5页
ABSTRACT第5-15页
第1章 引言第15-27页
   ·副溶血弧菌的研究概况第15-19页
     ·副溶血弧菌的生化特性第15-16页
     ·副溶血弧菌的致病因子第16-19页
       ·溶血素第16-19页
       ·尿素酶第19页
       ·其它致病因子(蛋白酶)第19页
     ·小结第19页
   ·副溶血弧菌检测技术的研究进展第19-23页
     ·最大可能数法(MPN)第20页
     ·聚合酶链式反应(PCR)第20-22页
       ·常规 PCR第20页
       ·多重 PCR第20-21页
       ·Real-time PCR第21-22页
     ·DNA杂交第22页
     ·显色培养基第22页
     ·小结第22-23页
   ·副溶血弧菌基因分型技术的研究进展第23-25页
     ·随机扩增多态性分析第23-24页
     ·脉冲场凝胶电泳分析第24页
     ·限制性片断长度多态性分析第24页
     ·核糖体分型第24-25页
     ·小结第25页
   ·课题的研究意义第25-27页
     ·预防副溶血弧菌的感染第25-26页
     ·为副溶血弧菌的分子流行病学研究打下基础第26-27页
第2章 副溶血弧菌毒力基因tdh和trh的PCR检测第27-40页
   ·前言第27页
   ·材料和方法第27-35页
     ·实验材料第27-32页
       ·菌种及其来源第27-31页
       ·试剂第31-32页
       ·培养基第32页
       ·重要仪器设备第32页
     ·实验方法第32-35页
       ·副溶血弧菌的活化第32页
       ·菌种保存第32页
       ·副溶血弧菌毒力基因tdh和trh的检测第32-35页
   ·实验结果第35-38页
     ·副溶血弧菌菌基因组DNA的提取第35页
     ·毒力基因tdh和trh的PCR扩增第35-36页
     ·结果分析第36-38页
   ·讨论第38-39页
     ·PCR扩增条件的优化第38页
     ·毒力基因tdh和trh的携带特征第38-39页
   ·本章小结第39-40页
第3章 副溶血弧菌RAPD的基因分型研究第40-52页
   ·前言第40页
   ·材料和方法第40-43页
     ·实验材料第40-41页
       ·菌种及其来源第40页
       ·试剂第40-41页
       ·培养基第41页
       ·重要仪器设备第41页
     ·实验方法第41-43页
       ·菌种活化第41页
       ·基因组DNA的提取和浓度的测定第41页
       ·RAPD-PCR扩增第41-43页
   ·实验结果第43-50页
     ·基因组DNA的提取第43页
     ·RAPD反应体系的优化第43-45页
     ·引物的筛选第45页
     ·RAPD扩增结果第45-46页
     ·数据分析第46-50页
   ·讨论第50-51页
     ·RAPD标记的重复性第50页
     ·不同来源副溶血弧菌菌群的分析第50-51页
     ·致病性与非致病性副溶血弧菌的特异性分子标记第51页
   ·本章小结第51-52页
第4章 一种新的检测副溶血弧菌PCR方法的建立第52-59页
   ·前言第52页
   ·材料和方法第52-54页
     ·实验材料第52页
       ·菌种及其来源第52页
       ·试剂第52页
       ·重要仪器设备第52页
     ·实验方法第52-54页
       ·RAPD-PCR扩增第52-53页
       ·RAPD条带的割胶纯化第53-54页
       ·PCR产物目的片断的克隆测序第54页
       ·引物设计第54页
       ·副溶血弧菌的PCR检测第54页
   ·实验结果第54-57页
     ·RAPD-PCR扩增第54-55页
     ·测序结果和引物设计第55-56页
     ·PCR扩增结果第56-57页
   ·讨论第57-58页
   ·本章小结第58-59页
第5章 副溶血弧菌的荧光定量 PCR检测第59-68页
   ·前言第59页
   ·材料和方法第59-61页
     ·实验材料第59-60页
       ·菌株及其来源第59页
       ·试剂第59-60页
       ·培养基第60页
       ·重要仪器设备第60页
     ·实验方法第60-61页
       ·菌种活化第60页
       ·基因组DNA的提取第60页
       ·Real-time PCR第60-61页
       ·水产品中副溶血弧菌的检测第61页
   ·实验结果第61-66页
     ·引物设计第61页
     ·引物的特异性检测第61-62页
     ·标准曲线的绘制第62-66页
     ·水产品中副溶血弧菌的检测第66页
   ·讨论第66-67页
   ·本章小结第67-68页
第6章 结论第68-69页
参考文献第69-76页
附录第76-79页
致谢第79-80页

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