| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 目录 | 第9-12页 |
| 图表目录 | 第12-14页 |
| 英文缩略词表 | 第14-15页 |
| 1 引言 | 第15-18页 |
| 实验技术路线 | 第17-18页 |
| 2 T7 噬菌体尾蛋白 P11 的表达、纯化及鉴定 | 第18-36页 |
| 2.1 实验材料 | 第18-20页 |
| 2.1.1 实验动物 | 第18页 |
| 2.1.2 实验用菌株 | 第18页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第18-19页 |
| 2.1.4 主要仪器型号及厂家 | 第19页 |
| 2.1.5 主要试剂的配制 | 第19-20页 |
| 2.2 实验方法 | 第20-30页 |
| 2.2.1 重组克隆载体 pMD18-T 的构建与鉴定 | 第20-23页 |
| 2.2.2 重组表达载体 PTIG-TRX-P11 的构建与鉴定 | 第23-25页 |
| 2.2.3 P11 蛋白的原核表达 | 第25-26页 |
| 2.2.4 P11 蛋白纯化 | 第26-27页 |
| 2.2.5 多克隆抗体的制备 | 第27-30页 |
| 2.3 实验结果 | 第30-34页 |
| 2.3.1 pMD18-T-P11 阳性克隆子验证 | 第30-31页 |
| 2.3.2 PTIG-TRX-P11 阳性克隆子鉴定 | 第31页 |
| 2.3.3 PTIG-TRX-P11 的诱导表达 | 第31-32页 |
| 2.3.4 重组 P11 蛋白的纯化 | 第32-33页 |
| 2.3.5 新西兰大白兔抗血清的效价 | 第33页 |
| 2.3.6 多克隆抗体的纯化及鉴定 | 第33-34页 |
| 2.4 讨论 | 第34-36页 |
| 2.4.1 表达载体的选择 | 第34-35页 |
| 2.4.2 重组蛋白纯化方法的选择 | 第35-36页 |
| 3 P11 蛋白单克隆抗体的制备 | 第36-52页 |
| 3.1 材料 | 第36-37页 |
| 3.1.1 实验动物 | 第36页 |
| 3.1.2 主要试剂 | 第36页 |
| 3.1.3 主要仪器设备 | 第36-37页 |
| 3.1.4 主要试剂的配制 | 第37页 |
| 3.2 实验方法 | 第37-44页 |
| 3.2.1 P11 蛋白抗原表面多肽的选择与合成 | 第37-38页 |
| 3.2.2 实验动物的准备 | 第38页 |
| 3.2.3 细胞融合及阳性杂交瘤细胞的筛选 | 第38-43页 |
| 3.2.4 P11 蛋白单克隆抗体的大量制备、纯化及鉴定 | 第43-44页 |
| 3.3 实验结果 | 第44-50页 |
| 3.3.1 抗原表位多肽序列的设计、合成及鉴定 | 第44-48页 |
| 3.3.2 细胞融合及阳性杂交瘤细胞株的建立 | 第48-49页 |
| 3.3.3 P11 蛋白单克隆抗体的亚类鉴定 | 第49-50页 |
| 3.3.4 P11 蛋白单克隆抗体的纯化及鉴定 | 第50页 |
| 3.4 讨论 | 第50-52页 |
| 4 抗雌二醇单链抗体的筛选与表达 | 第52-67页 |
| 4.1 实验材料 | 第52-53页 |
| 4.1.1 主要试剂 | 第52页 |
| 4.1.2 主要仪器 | 第52-53页 |
| 4.1.3 主要试剂的配制 | 第53页 |
| 4.2 实验方法 | 第53-58页 |
| 4.2.1 T7 噬菌体展示人源抗体库的扩增及多样性的鉴定 | 第53-55页 |
| 4.2.2 噬菌体展示人源抗体库固相筛选雌二醇单链抗体 | 第55-57页 |
| 4.2.3 单链抗体的表达及性质鉴定 | 第57-58页 |
| 4.2.4 单链抗体的纯化 | 第58页 |
| 4.3 实验结果 | 第58-66页 |
| 4.3.1 T7 噬菌体人源抗体库的鉴定 | 第58-59页 |
| 4.3.2 抗雌二醇噬菌体的富集 | 第59页 |
| 4.3.3 特异性噬菌体的筛选 | 第59-60页 |
| 4.3.4 筛选后 ScFv 基因序列表达载体的构建、蛋白表达及鉴定 | 第60-66页 |
| 4.4 讨论 | 第66-67页 |
| 4.4.1 T7 噬菌体库筛选雌二醇单链抗体筛选方式的选择 | 第66页 |
| 4.4.2 噬菌体 ELISA 筛选 E2特异性单链抗体 | 第66-67页 |
| 5 结论 | 第67-68页 |
| 参考文献 | 第68-71页 |
| 综述 | 第71-84页 |
| 参考文献 | 第78-84页 |
| 个人简历 | 第84-85页 |
| 致谢 | 第85页 |
