| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 缩略语表 | 第7-12页 |
| 第一章 绪论 | 第12-26页 |
| 1.1 秀丽隐杆线虫概述 | 第12-15页 |
| 1.1.1 秀丽隐杆线虫的生物学特性 | 第12-14页 |
| 1.1.2 秀丽隐杆线虫作为外源毒物毒性评价模式动物的研究进展 | 第14-15页 |
| 1.2 真菌毒素概述 | 第15-18页 |
| 1.2.1 黄曲霉毒素 | 第15-16页 |
| 1.2.2 脱氧雪腐镰刀菌烯醇 | 第16页 |
| 1.2.3 伏马菌素 | 第16-17页 |
| 1.2.4 T-2 毒素 | 第17页 |
| 1.2.5 玉米赤霉烯酮 | 第17-18页 |
| 1.3 真菌毒素研究常用模式生物 | 第18-23页 |
| 1.3.1 急性毒性试验 | 第21-22页 |
| 1.3.2 亚急性毒性试验 | 第22页 |
| 1.3.3 亚慢性毒性试验 | 第22-23页 |
| 1.3.4 毒理代谢试验 | 第23页 |
| 1.3.5 致畸实验 | 第23页 |
| 1.4 玉米赤霉烯酮毒理机制 | 第23-24页 |
| 1.4.1 类雌性激素效应 | 第23页 |
| 1.4.2 氧化损伤机制 | 第23-24页 |
| 1.4.3 染色体畸变 | 第24页 |
| 1.4.4 诱发细胞凋亡 | 第24页 |
| 1.5 本文立题背景及意义 | 第24-25页 |
| 1.6 论文研究目的和技术路线 | 第25-26页 |
| 第二章 利用秀丽隐杆线虫建立真菌毒素的评价体系 | 第26-36页 |
| 2.1 引言 | 第26页 |
| 2.2 材料与方法 | 第26-27页 |
| 2.2.1 材料 | 第26页 |
| 2.2.2 线虫培养 | 第26页 |
| 2.2.3 毒素暴露 | 第26页 |
| 2.2.4 致死率测定 | 第26-27页 |
| 2.2.5 体长测量 | 第27页 |
| 2.2.6 后代数目测定 | 第27页 |
| 2.2.7 最长寿命测定 | 第27页 |
| 2.2.8 数据统计 | 第27页 |
| 2.3 结果与分析 | 第27-33页 |
| 2.3.1 致死率 | 第27页 |
| 2.3.2 对生长发育的影响 | 第27-30页 |
| 2.3.3 对生殖能力的影响 | 第30-31页 |
| 2.3.4 对线虫寿命的影响 | 第31-33页 |
| 2.4 讨论 | 第33-35页 |
| 2.5 本章小结 | 第35-36页 |
| 第三章 玉米赤霉烯酮暴露对秀丽线虫生殖系统损伤作用的研究 | 第36-45页 |
| 3.1 引言 | 第36页 |
| 3.2 材料与方法 | 第36-37页 |
| 3.2.1 试剂与线虫品系 | 第36页 |
| 3.2.2 线虫同期化 | 第36-37页 |
| 3.2.3 暴露方法 | 第37页 |
| 3.2.4 单侧性腺臂卵母细胞体积和数目测定 | 第37页 |
| 3.2.5 统计学分析 | 第37页 |
| 3.3 结果与分析 | 第37-42页 |
| 3.3.1 ZEN暴露可以导致C. elegans性腺臂近端臂形态变化 | 第37-38页 |
| 3.3.2 ZEN暴露可以导致C. elegans卵母细胞形态变化 | 第38-39页 |
| 3.3.3 ZEN暴露可以导致C. elegans卵母细胞数目减少 | 第39-40页 |
| 3.3.4 ZEN暴露可以导致C. elegans产卵器畸形 | 第40-42页 |
| 3.4 讨论 | 第42-43页 |
| 3.5 本章小结 | 第43-45页 |
| 第四章 玉米赤霉烯酮暴露导致的秀丽隐杆线虫生殖及发育毒性的世代间比较 | 第45-54页 |
| 4.1 引言 | 第45-46页 |
| 4.2 材料与方法 | 第46-47页 |
| 4.2.1 试剂与线虫品系 | 第46页 |
| 4.2.2 暴露方法 | 第46页 |
| 4.2.3 体长的测定 | 第46页 |
| 4.2.4 后代数目的测定 | 第46页 |
| 4.2.5 转基因品系线虫荧光测定 | 第46页 |
| 4.2.6 统计学分析 | 第46-47页 |
| 4.3 结果与分析 | 第47-52页 |
| 4.3.1 ZEN暴露导致的发育缺陷可在子代中恢复 | 第47-48页 |
| 4.3.2 ZEN暴露可导致线虫子代产生体长发育代偿作用 | 第48-50页 |
| 4.3.3 ZEN暴露导致的世代间可传递的生殖缺陷 | 第50-51页 |
| 4.3.4 ZEN暴露可使线虫子代产生生殖能力的代偿作用 | 第51页 |
| 4.3.5 转基因品系线虫荧光表达结果 | 第51-52页 |
| 4.4 讨论 | 第52-53页 |
| 4.5 本章小结 | 第53-54页 |
| 第五章 应用微阵列技术对玉米赤霉烯酮处理线虫基因表达谱的研究 | 第54-71页 |
| 5.1 引言 | 第54页 |
| 5.2 材料与方法 | 第54-56页 |
| 5.2.0 试剂与仪器 | 第54-55页 |
| 5.2.1 秀丽线虫总RNA的提取 | 第55页 |
| 5.2.2 cDNA片段的合成 | 第55页 |
| 5.2.3 生物素标记cRNA合成 | 第55页 |
| 5.2.4 纯化以及片段化cRNA探针 | 第55页 |
| 5.2.5 基因芯片杂交及洗脱 | 第55页 |
| 5.2.6 RT-PCR 检验相关基因 | 第55页 |
| 5.2.7 数据处理 | 第55-56页 |
| 5.3 结果与分析 | 第56-66页 |
| 5.3.1 秀丽线虫组织标本提取总RNA和质量鉴定 | 第56-57页 |
| 5.3.2 基因芯片扫描截图 | 第57-58页 |
| 5.3.3 基因芯片数据的尺度归一化 | 第58-59页 |
| 5.3.4 基因芯片数据的初步分析结果 | 第59-60页 |
| 5.3.5 ZEN对秀丽线虫基因表达的影响 | 第60-62页 |
| 5.3.6 差异基因的功能性分析 | 第62-64页 |
| 5.3.7 玉米赤霉烯酮对秀丽线虫基因信号通路的影响分析 | 第64-65页 |
| 5.3.8 RT-PCR结果 | 第65-66页 |
| 5.4 讨论 | 第66-69页 |
| 5.4.1 ZEN调控线虫生命活动机制的模型分析 | 第66-68页 |
| 5.4.2 表皮胶原蛋白合成通路 | 第68页 |
| 5.4.3 DAF-2 insuli-like信号通路 | 第68-69页 |
| 5.4.4 秀丽线虫可能受ZEN影响的其他信号通路 | 第69页 |
| 5.5 本章小结 | 第69-71页 |
| 第六章 玉米赤霉烯酮暴露对秀丽隐杆线虫表皮胶原蛋白合成信号通路的干扰作用 | 第71-81页 |
| 6.1 引言 | 第71页 |
| 6.2 材料与方法 | 第71-72页 |
| 6.2.1 线虫品系和培养方法 | 第71页 |
| 6.2.2 线虫世代时间的测定 | 第71页 |
| 6.2.3 线虫形态变化的测定 | 第71页 |
| 6.2.4 线虫RNA提取和RT-PCR验证 | 第71-72页 |
| 6.2.5 荧光标记品系线虫荧光测定 | 第72页 |
| 6.2.6 突变体线虫体长和后代数目测定 | 第72页 |
| 6.3 结果与分析 | 第72-78页 |
| 6.3.1 玉米赤霉烯酮暴露可导致秀丽线虫世代时间延长 | 第72页 |
| 6.3.2 玉米赤霉烯酮暴露可导致秀丽线虫表皮发育畸形 | 第72-73页 |
| 6.3.3 玉米赤霉烯酮对胶原蛋白合成信号通路基因表达的影响 | 第73-74页 |
| 6.3.4 玉米赤霉烯酮暴露对绿色荧光标记品系线虫的影响 | 第74-75页 |
| 6.3.5 玉米赤霉烯酮暴露对突变体线虫品系线虫的影响 | 第75-78页 |
| 6.4 讨论 | 第78-80页 |
| 6.5 本章小结 | 第80-81页 |
| 第七章 玉米赤霉烯酮暴露对秀丽隐杆线虫DAF-2 insulin-like信号通路的干扰作用 | 第81-93页 |
| 7.1 引言 | 第81页 |
| 7.2 材料与方法 | 第81-82页 |
| 7.2.1 实验动物与主要试剂 | 第81页 |
| 7.2.2 线虫ZEN暴露染毒 | 第81-82页 |
| 7.2.3 线虫热刺激存活率测定 | 第82页 |
| 7.2.4 运动行为的测定 | 第82页 |
| 7.2.5 荧光品系线虫荧光测定 | 第82页 |
| 7.2.6 数据处理 | 第82页 |
| 7.3 结果与分析 | 第82-89页 |
| 7.3.1 玉米赤霉烯酮暴露可导致秀丽线虫抗热性降低 | 第82-83页 |
| 7.3.2 玉米赤霉烯酮暴露抑制秀丽线虫的运动行为能力 | 第83-85页 |
| 7.3.3 玉米赤霉烯酮暴露对DAF-2 insulin-like信号通路相关基因表达的影响 | 第85-86页 |
| 7.3.4 ZEN暴露对GFP标记品系线虫的影响 | 第86-88页 |
| 7.3.5 突变体秀丽线虫对于ZEN暴露的反应 | 第88-89页 |
| 7.4 讨论 | 第89-92页 |
| 7.5 本章小结 | 第92-93页 |
| 主要结论与展望 | 第93-96页 |
| 主要结论 | 第93-95页 |
| 展望 | 第95-96页 |
| 论文创新点 | 第96-97页 |
| 致谢 | 第97-98页 |
| 参考文献 | 第98-109页 |
| 附录: 作者在攻读博士学位期间发表的论文 | 第109页 |
