| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 第一章 微生物铝毒及其耐铝机制研究现状(文献综述) | 第8-14页 |
| 1.引言 | 第8页 |
| 2.有机酸在耐Al~(3+)机制中的作用 | 第8-9页 |
| 3.某些金属离子和离子通道蛋白与耐Al~(3+)毒害的关系 | 第9-10页 |
| 4.ATPase在耐Al~(3+)毒害中所起的作用 | 第10-12页 |
| 5.氧化胁迫在耐Al~(3+)毒害中所起的作用 | 第12页 |
| 6.展望 | 第12-14页 |
| 第二章 酿酒酵母耐铝机制中可能包含抗氧化作用 | 第14-55页 |
| 1.前言 | 第14页 |
| 2.材料和方法 | 第14-29页 |
| ·使用的酿酒酵母菌株(种)与菌种培养条件 | 第15页 |
| ·S.cerevisiae细胞的染色与显微观察 | 第15-16页 |
| ·生长曲线与相对生长率测定 | 第16-17页 |
| ·存活率(Cell Survival Rate)的测定 | 第17页 |
| ·Al~(3+)浓度的测定与吸收情况的分析 | 第17-18页 |
| ·蛋白质浓度测定 | 第18页 |
| ·细胞内分子氧化作用(Molecular Oxidation)测定 | 第18-19页 |
| ·膜脂过氧化测定 | 第19-20页 |
| ·细胞破壁及萃取物的制备 | 第20页 |
| ·氧化自由基(ROS：Reactive Oxygen Species)清除系统的测定 | 第20-22页 |
| ·提取S.cerevisiae细胞的基因组DNA与Total RNA | 第22-23页 |
| ·逆转录 | 第23-24页 |
| ·PCR(Polymerase Chain Reaction) | 第24-25页 |
| ·DNA和RNA电泳分析 | 第25-27页 |
| ·海藻糖(Trehalose)浓度测定 | 第27页 |
| ·酿酒酵母呼吸缺陷型菌株的诱变、鉴定及呼吸缺陷菌株产生的频率计算 | 第27-28页 |
| ·改变酵母细胞胞内GSH含量的处理方法 | 第28-29页 |
| ·酵母细胞数量与OD_(600)值的转换计算方法 | 第29页 |
| ·数据的统计分析 | 第29页 |
| 3.结果与分析 | 第29-48页 |
| ·Al~(3+)对酿酒酵母EGY48菌株细胞生长的抑制作用 | 第29-30页 |
| ·酵母细胞EGY48经Al~(3+)处理后细胞形态的观察 | 第30-32页 |
| ·野生型CY4和gshl突变体CY8细胞的生长曲线与固体平板上的生长情况 | 第32-33页 |
| ·CY4和CY8经Al~(3+)处理后的相对生长情况 | 第33-34页 |
| ·CY4和CY8对Al~(3+)的吸收积累效应 | 第34页 |
| ·CY4和CY8经Al~(3+)处理后细胞内活性氧自由基(ROS)水平的变化 | 第34-36页 |
| ·CY4和CY8经Al~(3+)处理后膜脂过氧化水平情况 | 第36-37页 |
| ·CY4和CY8经Al~(3+)处理后SOD酶活性变化分析 | 第37页 |
| ·CY4经Al~(3+)处理后胞内GSH含量的变化 | 第37-39页 |
| ·RT-PCR分析CY4经Al~(3+)处理后相关基因的mRNA转录水平 | 第39页 |
| ·CY4和CY8经Al~(3+)处理后胞内海藻糖含量的变化 | 第39-40页 |
| ·CY4和CY8经Al~(3+)处理后呼吸缺陷型(RD)形成的频率 | 第40-42页 |
| ·CY4经EB诱变后筛选呼吸缺陷型菌株CY4p | 第42-43页 |
| ·CY4和呼吸缺陷型菌株CY4p经Al~(3+)处理后的相对生长情况 | 第43页 |
| ·CY4、CY8和呼吸缺陷型菌株CY4p固体平板点样 | 第43-45页 |
| ·CY4和CY8改变细胞内GSH含量的处理结果 | 第45页 |
| ·CY4改变胞内GSH含量后经Al~(3+)处理4h后的存活率 | 第45-46页 |
| ·CY4和CY8改变细胞内GSH含量后微量点样 | 第46-48页 |
| 4.讨论 | 第48-54页 |
| ·酿酒酵母细胞Al~(3+)胁迫和gshl缺陷体Al~(3+)毒害实验体系的改进 | 第48页 |
| ·Al~(3+)能引起氧化胁迫，抑制酵母细胞的生长并致死 | 第48-51页 |
| ·Al~(3+)处理引起酵母细胞内GSH浓度、SOD酶活海藻糖含量及相关基因表达的变化 | 第51-52页 |
| ·Al~(3+)处理对酵母细胞线粒体功能的影响 | 第52-53页 |
| ·GSH在酿酒酵母细胞Al~(3+)耐性中的作用 | 第53-54页 |
| 5.结论 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-62页 |
| 附录一 | 第62-64页 |
| 附录二 | 第64-67页 |
| 致谢 | 第67页 |
