| 摘要 | 第7-9页 |
| ABSTRACT | 第9-10页 |
| 英文缩写词表 | 第11-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-20页 |
| 1.1 我国肉类消费产品消费概述 | 第12-13页 |
| 1.2 肉类及肉制品中动物源性成分检测方法概述 | 第13-16页 |
| 1.2.1 基于蛋白水平的检测方法 | 第13-14页 |
| 1.2.2 基于DNA水平的检测方法 | 第14-16页 |
| 1.3 重组酶聚合酶扩增法(Recombinase Polymerase Amplification,RPA) | 第16-18页 |
| 1.3.1 RPA概述 | 第16页 |
| 1.3.2 重组酶聚合酶扩增法基本原理 | 第16-17页 |
| 1.3.3 重组酶聚合酶扩增法技术特点 | 第17页 |
| 1.3.4 RPA及PCR扩增结果观察方式的优化 | 第17-18页 |
| 1.3.5 RPA的应用 | 第18页 |
| 1.4 主要研究内容 | 第18-20页 |
| 第二章 PCR与RPA方法检测牛、羊、鸡、鸭和猪肉成分 | 第20-38页 |
| 1 材料与方法 | 第20-28页 |
| 1.1 试验动物 | 第20页 |
| 1.2 试验试剂 | 第20-21页 |
| 1.3 基因组DNA的提取 | 第21页 |
| 1.4 种属特异性的引物设计 | 第21-22页 |
| 1.5 物种动物源性成分检测用引物目的序列的克隆 | 第22-27页 |
| 1.6 5种动物源成分检测用引物的RPA扩增 | 第27页 |
| 1.7 5种动物源成分检测引物的最低检测拷贝数 | 第27-28页 |
| 1.8 用人体体表温度进行RPA反应 | 第28页 |
| 2 结果与分析 | 第28-34页 |
| 2.1 5种动物源成分检测引物的筛选 | 第28-30页 |
| 2.2 引物进行PCR与RPA扩增的灵敏度 | 第30-34页 |
| 2.3 用人体体表温度进行RPA反应 | 第34页 |
| 3 讨论 | 第34-38页 |
| 3.1 5种动物源成分检测引物的设计 | 第34-35页 |
| 3.2 引物在PCR与RPA扩增的假阳性防治与建议 | 第35-36页 |
| 3.3 PCR与RPA动物源成分检测引物灵敏度的对比 | 第36-37页 |
| 3.4 PCR与RPA检测的比较 | 第37-38页 |
| 第三章 5种动物源性成分PCR与RPA的可视化鉴定 | 第38-64页 |
| 1 材料与方法 | 第38-40页 |
| 1.1 试验材料 | 第38页 |
| 1.2 试验试剂 | 第38页 |
| 1.3 动物源成分PCR与RPA可视化鉴定最低质粒拷贝数的检测 | 第38-39页 |
| 1.4 动物源成分PCR与RPA可视化鉴定最低总DNA浓度的检测 | 第39页 |
| 1.5 不同热处理方式对可视化检测的影响 | 第39-40页 |
| 1.6 模拟掺假肉的制备与检测模拟样品 | 第40页 |
| 2 结果与分析 | 第40-60页 |
| 2.1 可视化结果的最低质粒模板浓度 | 第40-45页 |
| 2.2 动物源成分PCR与RPA可视化鉴定最低总DNA浓度的检测 | 第45-51页 |
| 2.3 不同热处理方式对可视化检测的影响 | 第51-58页 |
| 2.4 PCR与RPA对模拟掺假样品检测结果 | 第58-60页 |
| 3 讨论 | 第60-64页 |
| 3.1 质粒模板PCR与RPA可视化及电泳检测的比较 | 第60-61页 |
| 3.2 总DNA模板PCR与RPA可视化及电泳检测的比较 | 第61-62页 |
| 3.3 RPA与PCR的可视化对比 | 第62页 |
| 3.4 不同热处理方式对可视化检测的影响 | 第62-64页 |
| 第四章 UvsX、UvsY和Gp32的原核表达及纯化条件分析 | 第64-78页 |
| 1 材料与方法 | 第64-68页 |
| 1.1 试验材料 | 第64页 |
| 1.2 uvsX、uvsY和gp32的全基因合成与重组质粒构建 | 第64页 |
| 1.3 质粒的小量提取 | 第64-65页 |
| 1.4 小量菌液的诱导表达 | 第65页 |
| 1.5 变性条件下蛋白纯化 | 第65-68页 |
| 1.6 大量菌液的诱导表达 | 第68页 |
| 2 结果与分析 | 第68-74页 |
| 2.1 诱导表达及蛋白纯化条件 | 第68-73页 |
| 2.2 大量菌液的诱导表达 | 第73-74页 |
| 3 讨论 | 第74-78页 |
| 3.1 UvsX、UvsY和Gp32的原核表达菌株的选取 | 第74页 |
| 3.2 密码子优化对UvsX、UvsY和Gp32表达的影响 | 第74-75页 |
| 3.3 UvsX、UvsY和Gp32小量诱导与大量连续诱导的条件 | 第75-76页 |
| 3.4 蛋白纯化条件 | 第76-78页 |
| 结论 | 第78-80页 |
| 参考文献 | 第80-88页 |
| 附录 | 第88-92页 |
| 致谢 | 第92页 |
