摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-7页 |
中英文缩写词对照表 | 第8-13页 |
第一章 绪论 | 第13-22页 |
1.1 食品蛋白质酶解物的研究应用现状 | 第13-15页 |
1.1.1 食品蛋白质酶解物产品性能的研究现状 | 第13-14页 |
1.1.2 食品蛋白质酶解物的生产和加工方式 | 第14-15页 |
1.2 含巯基蛋白质及其衍生物的研究现状 | 第15-19页 |
1.2.1 巯基的性质 | 第15页 |
1.2.2 含巯基蛋白质及其衍生物的生物活性 | 第15-16页 |
1.2.3 巯基肽的检测和制备 | 第16-19页 |
1.2.3.1 巯基肽的检测 | 第16-18页 |
1.2.3.2 巯基肽的制备 | 第18-19页 |
1.3 重金属离子的毒害及防治策略 | 第19-20页 |
1.3.1 重金属离子的来源 | 第19页 |
1.3.2 重金属离子的毒害及发挥毒性的作用机理 | 第19-20页 |
1.3.3 重金属离子中毒的防治策略 | 第20页 |
1.4 论文的立题依据 | 第20-21页 |
1.5 论文的主要研究内容 | 第21-22页 |
第二章 mBBr标记巯基肽及其对巯基肽色谱保留行为的影响 | 第22-36页 |
2.1 引言 | 第22-23页 |
2.2 材料与设备 | 第23页 |
2.2.1 实验材料 | 第23页 |
2.2.2 主要设备 | 第23页 |
2.3 实验方法 | 第23-25页 |
2.3.1 mBBr标记巯基产物荧光激发波长、发射波长的确定 | 第23页 |
2.3.2 mBBr用量的确定 | 第23-24页 |
2.3.3 反应pH的影响 | 第24页 |
2.3.4 反应温度的影响 | 第24页 |
2.3.5 荧光强度的稳定性 | 第24页 |
2.3.6 mBBr对巯基的专一性 | 第24页 |
2.3.7 大豆球蛋白(11S)的制备 | 第24-25页 |
2.3.8 巯基肽与非巯基肽的制备 | 第25页 |
2.3.9 尺寸凝胶高效液相(SEC-HPLC) | 第25页 |
2.3.10 反相高效液相(RP-HPLC) | 第25页 |
2.3.11 统计分析 | 第25页 |
2.4 结果与讨论 | 第25-35页 |
2.4.1 mBBr标记SH产物(mBBr-S-R)荧光激发波长、发射波长的确定 | 第25-27页 |
2.4.2 mBBr用量对mBBr标记SH的影响 | 第27页 |
2.4.3 反应pH对mBBr标记SH的影响 | 第27-28页 |
2.4.4 反应温度对mBBr标记SH的影响 | 第28-29页 |
2.4.5 分析方法的评价 | 第29-32页 |
2.4.5.1 mBBr对SH的专一性 | 第29-30页 |
2.4.5.2 mBBr标记SH产物的稳定性 | 第30-31页 |
2.4.5.3 标准曲线、精密度、准确度和加标回收率 | 第31-32页 |
2.4.6 大豆蛋白巯基肽的分析 | 第32-35页 |
2.4.6.1 不同巯基肽的荧光强度 | 第32-33页 |
2.4.6.2 mBBr标记SH对巯基肽色谱保留行为的影响 | 第33-35页 |
2.5 本章小结 | 第35-36页 |
第三章 还原大豆球蛋白酶解过程中巯基含量及其分布的研究 | 第36-49页 |
3.1 引言 | 第36页 |
3.2 材料与设备 | 第36-37页 |
3.2.1 材料 | 第36-37页 |
3.2.2 主要设备 | 第37页 |
3.3 实验方法 | 第37-38页 |
3.3.1 大豆球蛋白(11S)的制备 | 第37页 |
3.3.2 还原 11S的制备 | 第37页 |
3.3.3 还原 11S酶解物的制备 | 第37页 |
3.3.4 巯基的荧光标记 | 第37-38页 |
3.3.5 RP-HPLC | 第38页 |
3.3.6 SEC-HPLC | 第38页 |
3.4 结果与讨论 | 第38-47页 |
3.4.1 还原 11S的酶解进程曲线 | 第38-39页 |
3.4.2 酶解对还原 11S酶解物中巯基含量的影响 | 第39-40页 |
3.4.3 酶解对还原 11S酶解物中巯基在疏水性肽段分布的影响 | 第40-45页 |
3.4.4 酶解对还原 11S酶解物中巯基在不同分子量肽段分布的影响 | 第45-47页 |
3.5 本章小结 | 第47-49页 |
第四章 大豆巯基肽的共价色谱法制备及其MALDI-TOF-MS分析 | 第49-60页 |
4.1 引言 | 第49页 |
4.2 材料与设备 | 第49-50页 |
4.2.1 实验材料 | 第49页 |
4.2.2 主要设备 | 第49-50页 |
4.3 实验方法 | 第50-51页 |
4.3.1 大豆球蛋白(11S)的制备 | 第50页 |
4.3.2 大豆球蛋白酶解物的制备 | 第50页 |
4.3.3 大豆球蛋白酶解物的还原 | 第50页 |
4.3.4 还原酶解物中巯基含量的测定 | 第50页 |
4.3.5 酶解物中巯基肽的制备 | 第50-51页 |
4.3.6 尺寸排阻-高效液相(SEC-HPLC) | 第51页 |
4.3.7 巯基肽中巯基的烷基化及基质辅助离子解析 - 飞行时间 - 质谱(MALDI-TOF-MS)分析 | 第51页 |
4.3.8 数据处理 | 第51页 |
4.4 结果与讨论 | 第51-59页 |
4.4.1 DTT浓度对大豆球蛋白酶解物中巯基含量的影响 | 第51-53页 |
4.4.2 还原酶解物中巯基肽的富集 | 第53-57页 |
4.4.2.1 巯基肽吸附条件的优化 | 第53-55页 |
4.4.2.2 TCPs解吸条件的优化 | 第55-56页 |
4.4.2.3 巯基肽的进一步纯化 | 第56-57页 |
4.4.3 MALDI-TOF-MS分析共价色谱对巯基肽的专一性 | 第57-59页 |
4.5 本章小结 | 第59-60页 |
第五章 巯基含量和分子量对巯基肽与Hg~(2+)、Pb~(2+)、Cd~(2+)作用的影响 | 第60-73页 |
5.1 引言 | 第60页 |
5.2 材料与设备 | 第60-61页 |
5.2.1 实验材料 | 第60-61页 |
5.2.2 主要设备 | 第61页 |
5.3 实验方法 | 第61-63页 |
5.3.1 大豆蛋球白(11S)的制备 | 第61页 |
5.3.2 11S酶解物(SGHs)的制备 | 第61页 |
5.3.3 巯基含量测定 | 第61页 |
5.3.4 总巯基含量的测定 | 第61-62页 |
5.3.5 TCPs的制备 | 第62页 |
5.3.6 分子量分布的测定 | 第62页 |
5.3.7 电位测量 | 第62页 |
5.3.8 稳定常数的计算 | 第62-63页 |
5.3.9 数据分析 | 第63页 |
5.4 结果与讨论 | 第63-72页 |
5.4.1 SGHs与TCPs的表征 | 第63-66页 |
5.4.2 pH电位法研究巯基肽与Hg~(2+)、Pb~(2+)、Cd~(2+)作用 | 第66-70页 |
5.4.2.1 TCPs的pKa值 | 第66-68页 |
5.4.2.2 在金属离子存在时的pH滴定曲线 | 第68-70页 |
5.4.3 巯基含量与稳定常数的关系 | 第70-71页 |
5.4.4 分子量分布与稳定常数之间的关系 | 第71-72页 |
5.5 本章小结 | 第72-73页 |
第六章 带电性质对巯基肽与Hg~(2+)作用的影响 | 第73-84页 |
6.1 引言 | 第73页 |
6.2 材料与设备 | 第73-74页 |
6.2.1 实验材料 | 第73页 |
6.2.2 主要设备 | 第73-74页 |
6.3 实验方法 | 第74-76页 |
6.3.1 大豆球蛋白(11S)的制备 | 第74页 |
6.3.2 11S酶解物的制备 | 第74页 |
6.3.3 巯基肽的制备 | 第74页 |
6.3.4 巯基肽的分离 | 第74页 |
6.3.5 氨基酸分析 | 第74-75页 |
6.3.6 巯基含量的测定 | 第75页 |
6.3.7 UV-Vis光谱法研究巯基肽与Hg~(2+)的作用 | 第75页 |
6.3.8 圆二色(CD)光谱法研究巯基肽与Hg~(2+)的作用 | 第75页 |
6.3.9 凝胶高效液相色谱(SEC-HPLC) | 第75-76页 |
6.4 结果与讨论 | 第76-83页 |
6.4.1 不同带电性质巯基肽的制备及表征 | 第76-78页 |
6.4.1.1 不同带电性质巯基肽的制备 | 第76页 |
6.4.1.2 不同带电性质的巯基肽的表征 | 第76-78页 |
6.4.2 不同带电性质的巯基肽与Hg~(2+)的结合特性 | 第78-83页 |
6.4.2.1 UV-Vis光谱法研究巯基肽与Hg~(2+)的作用 | 第78-79页 |
6.4.2.2 CD光谱法研究巯基肽与Hg~(2+)的作用 | 第79-80页 |
6.4.2.3 SEC-HPLC法研究TCPs与Hg~(2+)的作用 | 第80-82页 |
6.4.2.4 巯基肽与Hg~(2+)作用的热力学分析 | 第82-83页 |
6.5 本章小结 | 第83-84页 |
主要结论与展望 | 第84-86页 |
论文创新点 | 第86-87页 |
致谢 | 第87-88页 |
参考文献 | 第88-98页 |
附录:作者在攻读博士学位期间发表的论文 | 第98页 |