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大豆球蛋白酶解物中巯基肽的分布、制备及其与重金属离子作用的研究

摘要第3-5页
Abstract第5-7页
中英文缩写词对照表第8-13页
第一章 绪论第13-22页
    1.1 食品蛋白质酶解物的研究应用现状第13-15页
        1.1.1 食品蛋白质酶解物产品性能的研究现状第13-14页
        1.1.2 食品蛋白质酶解物的生产和加工方式第14-15页
    1.2 含巯基蛋白质及其衍生物的研究现状第15-19页
        1.2.1 巯基的性质第15页
        1.2.2 含巯基蛋白质及其衍生物的生物活性第15-16页
        1.2.3 巯基肽的检测和制备第16-19页
            1.2.3.1 巯基肽的检测第16-18页
            1.2.3.2 巯基肽的制备第18-19页
    1.3 重金属离子的毒害及防治策略第19-20页
        1.3.1 重金属离子的来源第19页
        1.3.2 重金属离子的毒害及发挥毒性的作用机理第19-20页
        1.3.3 重金属离子中毒的防治策略第20页
    1.4 论文的立题依据第20-21页
    1.5 论文的主要研究内容第21-22页
第二章 mBBr标记巯基肽及其对巯基肽色谱保留行为的影响第22-36页
    2.1 引言第22-23页
    2.2 材料与设备第23页
        2.2.1 实验材料第23页
        2.2.2 主要设备第23页
    2.3 实验方法第23-25页
        2.3.1 mBBr标记巯基产物荧光激发波长、发射波长的确定第23页
        2.3.2 mBBr用量的确定第23-24页
        2.3.3 反应pH的影响第24页
        2.3.4 反应温度的影响第24页
        2.3.5 荧光强度的稳定性第24页
        2.3.6 mBBr对巯基的专一性第24页
        2.3.7 大豆球蛋白(11S)的制备第24-25页
        2.3.8 巯基肽与非巯基肽的制备第25页
        2.3.9 尺寸凝胶高效液相(SEC-HPLC)第25页
        2.3.10 反相高效液相(RP-HPLC)第25页
        2.3.11 统计分析第25页
    2.4 结果与讨论第25-35页
        2.4.1 mBBr标记SH产物(mBBr-S-R)荧光激发波长、发射波长的确定第25-27页
        2.4.2 mBBr用量对mBBr标记SH的影响第27页
        2.4.3 反应pH对mBBr标记SH的影响第27-28页
        2.4.4 反应温度对mBBr标记SH的影响第28-29页
        2.4.5 分析方法的评价第29-32页
            2.4.5.1 mBBr对SH的专一性第29-30页
            2.4.5.2 mBBr标记SH产物的稳定性第30-31页
            2.4.5.3 标准曲线、精密度、准确度和加标回收率第31-32页
        2.4.6 大豆蛋白巯基肽的分析第32-35页
            2.4.6.1 不同巯基肽的荧光强度第32-33页
            2.4.6.2 mBBr标记SH对巯基肽色谱保留行为的影响第33-35页
    2.5 本章小结第35-36页
第三章 还原大豆球蛋白酶解过程中巯基含量及其分布的研究第36-49页
    3.1 引言第36页
    3.2 材料与设备第36-37页
        3.2.1 材料第36-37页
        3.2.2 主要设备第37页
    3.3 实验方法第37-38页
        3.3.1 大豆球蛋白(11S)的制备第37页
        3.3.2 还原 11S的制备第37页
        3.3.3 还原 11S酶解物的制备第37页
        3.3.4 巯基的荧光标记第37-38页
        3.3.5 RP-HPLC第38页
        3.3.6 SEC-HPLC第38页
    3.4 结果与讨论第38-47页
        3.4.1 还原 11S的酶解进程曲线第38-39页
        3.4.2 酶解对还原 11S酶解物中巯基含量的影响第39-40页
        3.4.3 酶解对还原 11S酶解物中巯基在疏水性肽段分布的影响第40-45页
        3.4.4 酶解对还原 11S酶解物中巯基在不同分子量肽段分布的影响第45-47页
    3.5 本章小结第47-49页
第四章 大豆巯基肽的共价色谱法制备及其MALDI-TOF-MS分析第49-60页
    4.1 引言第49页
    4.2 材料与设备第49-50页
        4.2.1 实验材料第49页
        4.2.2 主要设备第49-50页
    4.3 实验方法第50-51页
        4.3.1 大豆球蛋白(11S)的制备第50页
        4.3.2 大豆球蛋白酶解物的制备第50页
        4.3.3 大豆球蛋白酶解物的还原第50页
        4.3.4 还原酶解物中巯基含量的测定第50页
        4.3.5 酶解物中巯基肽的制备第50-51页
        4.3.6 尺寸排阻-高效液相(SEC-HPLC)第51页
        4.3.7 巯基肽中巯基的烷基化及基质辅助离子解析 - 飞行时间 - 质谱(MALDI-TOF-MS)分析第51页
        4.3.8 数据处理第51页
    4.4 结果与讨论第51-59页
        4.4.1 DTT浓度对大豆球蛋白酶解物中巯基含量的影响第51-53页
        4.4.2 还原酶解物中巯基肽的富集第53-57页
            4.4.2.1 巯基肽吸附条件的优化第53-55页
            4.4.2.2 TCPs解吸条件的优化第55-56页
            4.4.2.3 巯基肽的进一步纯化第56-57页
        4.4.3 MALDI-TOF-MS分析共价色谱对巯基肽的专一性第57-59页
    4.5 本章小结第59-60页
第五章 巯基含量和分子量对巯基肽与Hg~(2+)、Pb~(2+)、Cd~(2+)作用的影响第60-73页
    5.1 引言第60页
    5.2 材料与设备第60-61页
        5.2.1 实验材料第60-61页
        5.2.2 主要设备第61页
    5.3 实验方法第61-63页
        5.3.1 大豆蛋球白(11S)的制备第61页
        5.3.2 11S酶解物(SGHs)的制备第61页
        5.3.3 巯基含量测定第61页
        5.3.4 总巯基含量的测定第61-62页
        5.3.5 TCPs的制备第62页
        5.3.6 分子量分布的测定第62页
        5.3.7 电位测量第62页
        5.3.8 稳定常数的计算第62-63页
        5.3.9 数据分析第63页
    5.4 结果与讨论第63-72页
        5.4.1 SGHs与TCPs的表征第63-66页
        5.4.2 pH电位法研究巯基肽与Hg~(2+)、Pb~(2+)、Cd~(2+)作用第66-70页
            5.4.2.1 TCPs的pKa值第66-68页
            5.4.2.2 在金属离子存在时的pH滴定曲线第68-70页
        5.4.3 巯基含量与稳定常数的关系第70-71页
        5.4.4 分子量分布与稳定常数之间的关系第71-72页
    5.5 本章小结第72-73页
第六章 带电性质对巯基肽与Hg~(2+)作用的影响第73-84页
    6.1 引言第73页
    6.2 材料与设备第73-74页
        6.2.1 实验材料第73页
        6.2.2 主要设备第73-74页
    6.3 实验方法第74-76页
        6.3.1 大豆球蛋白(11S)的制备第74页
        6.3.2 11S酶解物的制备第74页
        6.3.3 巯基肽的制备第74页
        6.3.4 巯基肽的分离第74页
        6.3.5 氨基酸分析第74-75页
        6.3.6 巯基含量的测定第75页
        6.3.7 UV-Vis光谱法研究巯基肽与Hg~(2+)的作用第75页
        6.3.8 圆二色(CD)光谱法研究巯基肽与Hg~(2+)的作用第75页
        6.3.9 凝胶高效液相色谱(SEC-HPLC)第75-76页
    6.4 结果与讨论第76-83页
        6.4.1 不同带电性质巯基肽的制备及表征第76-78页
            6.4.1.1 不同带电性质巯基肽的制备第76页
            6.4.1.2 不同带电性质的巯基肽的表征第76-78页
        6.4.2 不同带电性质的巯基肽与Hg~(2+)的结合特性第78-83页
            6.4.2.1 UV-Vis光谱法研究巯基肽与Hg~(2+)的作用第78-79页
            6.4.2.2 CD光谱法研究巯基肽与Hg~(2+)的作用第79-80页
            6.4.2.3 SEC-HPLC法研究TCPs与Hg~(2+)的作用第80-82页
            6.4.2.4 巯基肽与Hg~(2+)作用的热力学分析第82-83页
    6.5 本章小结第83-84页
主要结论与展望第84-86页
论文创新点第86-87页
致谢第87-88页
参考文献第88-98页
附录:作者在攻读博士学位期间发表的论文第98页

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