摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
第1章 绪论 | 第10-21页 |
1.1 课题背景及研究目的和意义 | 第10-11页 |
1.1.1 研究背景 | 第10页 |
1.1.2 研究目的和意义 | 第10-11页 |
1.2 bLF 的分子结构与生物活性 | 第11-14页 |
1.2.1 bLF 的分子结构特性 | 第11-13页 |
1.2.2 bLF 的生物功能活性 | 第13-14页 |
1.3 bLF 的分离纯化 | 第14-15页 |
1.4 bLF 发挥成骨功能的机制 | 第15-17页 |
1.4.1 bLF 与成骨细胞中 LRP1/2 的相互作用机制 | 第15页 |
1.4.2 bLF 对骨生长代谢的调控机制 | 第15-17页 |
1.5 热处理对 bLF 的分子特性及生物活性的影响 | 第17-18页 |
1.6 本课题主要研究内容 | 第18-21页 |
1.6.1 实验方案与技术路线 | 第18-19页 |
1.6.2 主要研究内容 | 第19-21页 |
第2章 材料与方法 | 第21-33页 |
2.1 材料及仪器 | 第21-23页 |
2.1.1 材料与试剂 | 第21-22页 |
2.1.2 实验仪器 | 第22-23页 |
2.2 牛乳中 bLF 分离纯化 | 第23-24页 |
2.2.1 牛乳 bLF 粗品分离 | 第23页 |
2.2.2 牛乳 bLF 纯化 | 第23-24页 |
2.2.3 bLF 的鉴定和纯度测定 | 第24页 |
2.3 热处理对 bLF 分子结构及性质的影响研究 | 第24-27页 |
2.3.1 差示扫描量热法研究 bLF 的热变性 | 第25页 |
2.3.2 bLF 的热聚集分析 | 第25-26页 |
2.3.3 bLF 的圆二色性分析 | 第26页 |
2.3.4 bLF 疏水性测定 | 第26-27页 |
2.4 bLF 对成骨细胞增殖作用影响 | 第27-30页 |
2.4.1 成骨细胞的分离鉴定 | 第27-29页 |
2.4.2 MTT 法测定 bLF 对成骨细胞的增殖作用 | 第29-30页 |
2.5 测定方法 | 第30-32页 |
2.5.1 蛋白质浓度测定 | 第30-31页 |
2.5.2 蛋白质分子量以及纯度测定 | 第31-32页 |
2.6 统计学及绘图 | 第32-33页 |
第3章 牛乳中 bLF 分离纯化 | 第33-39页 |
3.1 牛乳 bLF 粗品分离 | 第33-35页 |
3.1.1 阳离子交换层析 | 第33-34页 |
3.1.2 SDS-PAGE 电泳法确定目的蛋白峰 | 第34-35页 |
3.2 牛乳 bLF 纯化 | 第35-37页 |
3.3 bLF 的纯度测定 | 第37-38页 |
3.4 本章小结 | 第38-39页 |
第4章 热处理对 bLF 分子结构及性质的影响研究 | 第39-46页 |
4.1 差示扫描量热法研究 bLF 热变性 | 第39-40页 |
4.2 bLF 的自身热聚合分析 | 第40-42页 |
4.2.1 热处理 bLF 的电镜观察 | 第40-42页 |
4.2.2 热处理对 bLF 溶液的分子粒度的影响 | 第42页 |
4.3 热处理对 bLF 的高级结构的影响 | 第42-44页 |
4.4 热处理对 bLF 表面疏水性的影响 | 第44-45页 |
4.5 本章小结 | 第45-46页 |
第5章 bLF 对成骨细胞增殖作用影响 | 第46-58页 |
5.1 成骨细胞的分离鉴定 | 第46-49页 |
5.1.1 成骨细胞的形态学观察 | 第46-47页 |
5.1.2 成骨细胞 HE 染色 | 第47-48页 |
5.1.3 碱性磷酸酶染色 | 第48-49页 |
5.1.4 成骨细胞矿化结节染色 | 第49页 |
5.2 bLF 对成骨细胞的增殖作用检测 | 第49-50页 |
5.3 Native-bLF 对成骨细胞增殖的影响 | 第50-52页 |
5.4 不同温度热处理对乳铁蛋白成骨细胞增殖的影响 | 第52-57页 |
5.4.1 65℃加热处理 bLF 对成骨细胞增殖作用影响 | 第52-53页 |
5.4.2 72℃加热处理 bLF 对成骨细胞增殖作用影响 | 第53-54页 |
5.4.3 85℃加热处理 bLF 对成骨细胞增殖作用影响 | 第54-55页 |
5.4.4 95℃加热处理 bLF 对成骨细胞增殖作用影响 | 第55-57页 |
5.5 本章小结 | 第57-58页 |
结论 | 第58-59页 |
参考文献 | 第59-67页 |
攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第67-69页 |
致谢 | 第69页 |