摘要 | 第4-5页 |
abstract | 第5-6页 |
第一章 综述 | 第12-23页 |
1.1 前言 | 第12-13页 |
1.2 含硫香料 | 第13-16页 |
1.2.1 含硫香料简介 | 第13页 |
1.2.2 含硫香料的分类 | 第13-14页 |
1.2.3 异硫氰酸酯类香料 | 第14页 |
1.2.4 硫醚类香料 | 第14-15页 |
1.2.5 含硫香料的发展及研究现状 | 第15-16页 |
1.3 沙门氏菌 | 第16-21页 |
1.3.1 沙门氏菌简介 | 第16页 |
1.3.2 沙门氏菌生物特性及形态学特征 | 第16页 |
1.3.3 沙门氏菌的流行病学 | 第16-17页 |
1.3.4 沙门氏菌的检测手段 | 第17页 |
1.3.5 沙门氏菌的致病机理 | 第17-18页 |
1.3.6 沙门氏菌毒力因子 | 第18-19页 |
1.3.6.1 毒力岛(Salmonella pathogenicity island,SPI) | 第18-19页 |
1.3.6.2 毒力质粒 | 第19页 |
1.3.6.3 黏附素 | 第19页 |
1.3.6.4 鞭毛和趋化性 | 第19页 |
1.3.7 影响SPI-1表达的关键调节子 | 第19-20页 |
1.3.7.1 HilA | 第19-20页 |
1.3.7.2 InvF | 第20页 |
1.3.7.3 HilD,HilC和RtsA | 第20页 |
1.3.7.4 HilE | 第20页 |
1.3.8 沙门氏菌中SdiA介导的群体感应系统 | 第20-21页 |
1.4 天然来源抑菌剂对沙门氏菌的抑菌机制 | 第21-22页 |
1.5 研究目的及意义 | 第22-23页 |
第二章 含硫香料对沙门氏菌抑菌活性的研究 | 第23-30页 |
2.1 材料与仪器 | 第23-25页 |
2.1.1 实验样品 | 第23页 |
2.1.2 实验菌株 | 第23-24页 |
2.1.3 主要试剂 | 第24页 |
2.1.4 主要仪器 | 第24-25页 |
2.1.5 培养基的配制 | 第25页 |
2.2 实验方法 | 第25-26页 |
2.2.1 样品处理 | 第25页 |
2.2.2 菌株活化及培养 | 第25页 |
2.2.2.1 菌株活化 | 第25页 |
2.2.2.2 菌株培养 | 第25页 |
2.2.3 最低抑菌浓度(minimuminhibitoryconcentration,MIC)的测定 | 第25-26页 |
2.2.4 生长曲线的测定 | 第26页 |
2.3 结果与讨论 | 第26-29页 |
2.3.1 含硫香料对沙门氏菌的最低抑菌浓度(MIC) | 第26-27页 |
2.3.2 含硫香料对沙门氏菌生长曲线的影响 | 第27-29页 |
2.3.2.1 异硫氰酸苄酯(BITC)对沙门氏菌生长曲线的影响 | 第27-28页 |
2.3.2.2 二烯丙基二硫醚(DADS)对沙门氏菌生长曲线的影响 | 第28页 |
2.3.2.3 甲基糠基二硫醚(MFDS)对沙门氏菌生长曲线的影响 | 第28-29页 |
2.4 本章小结 | 第29-30页 |
第三章 含硫香料对沙门氏菌毒力岛1毒力基因和QS基因表达的影响 | 第30-56页 |
3.1 材料与仪器 | 第30-32页 |
3.1.1 实验样品 | 第30页 |
3.1.2 实验菌株 | 第30页 |
3.1.3 主要试剂 | 第30-31页 |
3.1.4 主要仪器 | 第31页 |
3.1.5 培养基的配制 | 第31-32页 |
3.2 实验方法 | 第32-36页 |
3.2.1 样品处理 | 第32页 |
3.2.2 菌株活化及培养 | 第32页 |
3.2.2.1 菌株活化 | 第32页 |
3.2.2.2 菌株培养 | 第32页 |
3.2.3 细菌总DNA提取及检测 | 第32页 |
3.2.3.1 DNA提取 | 第32页 |
3.2.3.2 DNA检测 | 第32页 |
3.2.4 引物特异性检测 | 第32-33页 |
3.2.4.1 引物合成 | 第32-33页 |
3.2.4.2 PCR扩增 | 第33页 |
3.2.5 细菌总RNA提取及质量检测 | 第33-34页 |
3.2.5.1 RNA提取 | 第33-34页 |
3.2.5.2 RNA质量检测 | 第34页 |
3.2.6 cDNA合成 | 第34页 |
3.2.7 引物适用性检测 | 第34-35页 |
3.2.7.1 荧光引物合成 | 第34-35页 |
3.2.7.2 实时荧光定量PCR | 第35页 |
3.2.8 含硫香料对沙门氏菌毒力基因hilA、hilC、hilD表达的影响 | 第35页 |
3.2.9 含硫香料对沙门氏菌QS基因sdiA表达的影响 | 第35页 |
3.2.10 统计分析 | 第35-36页 |
3.3 结果与讨论 | 第36-55页 |
3.3.1 DNA的提取与检测 | 第36页 |
3.3.2 引物特异性检测 | 第36-37页 |
3.3.3 RNA的检测 | 第37-38页 |
3.3.4 引物适用性检测 | 第38-40页 |
3.3.4.1 16S rRNA扩增曲线的制备 | 第38页 |
3.3.4.2 16S rRNA标准曲线的建立 | 第38-39页 |
3.3.4.3 16S rRNA熔解曲线的建立 | 第39-40页 |
3.3.5 含硫香料对沙门氏菌毒力基因hilA、hilC、hilD表达的影响 | 第40-54页 |
3.3.5.1 异硫氰酸苄酯(BITC)对hilA、hilC、hilD表达的影响 | 第40-44页 |
3.3.5.2 二烯丙基二硫醚(DADS)对hilA、hilC、hilD表达的影响 | 第44-49页 |
3.3.5.3 甲基糠基二硫醚(MFDS)对hilA、hilC、hilD表达的影响 | 第49-54页 |
3.3.6 含硫香料对沙门氏菌QS基因sdiA表达的影响 | 第54-55页 |
3.3.6.1 异硫氰酸苄酯(BITC)对沙门氏菌QS基因sdiA表达的影响 | 第54页 |
6.3.6.2 二烯丙基二硫醚(DADS)对沙门氏菌QS基因sdiA表达的影响 | 第54-55页 |
3.4 本章小结 | 第55-56页 |
第四章 含硫香料对沙门氏菌相关生物学特性的影响 | 第56-66页 |
4.1 材料与仪器 | 第56-57页 |
4.1.1 实验样品 | 第56页 |
4.1.2 实验菌株 | 第56页 |
4.1.3 主要试剂 | 第56-57页 |
4.1.4 仪器设备 | 第57页 |
4.1.5 培养基的配制 | 第57页 |
4.2 实验方法 | 第57-59页 |
4.2.1 样品处理 | 第57页 |
4.2.2 菌株活化及培养 | 第57-58页 |
4.2.2.1 菌株活化 | 第57页 |
4.2.2.2 菌株培养 | 第57-58页 |
4.2.3 游动能力的测定 | 第58页 |
4.2.4 细胞形态的观察 | 第58页 |
4.2.4.1 菌液的制备 | 第58页 |
4.2.4.2 扫描电镜样品的制备 | 第58页 |
4.2.5 总ATP和胞外ATP的测定 | 第58-59页 |
4.2.6 统计分析 | 第59页 |
4.3 结果与讨论 | 第59-64页 |
4.3.1 含硫香料对沙门氏菌游动能力的影响 | 第59-62页 |
4.3.1.1 异硫氰酸苄酯(BITC)对沙门氏菌游动能力的影响 | 第59-60页 |
4.3.1.2 二烯丙基二硫醚(DADS)对沙门氏菌游动能力的影响 | 第60-61页 |
4.3.1.3 甲基糠基二硫醚(MFDS)对沙门氏菌游动能力的影响 | 第61-62页 |
4.3.2 含硫香料对沙门氏菌细胞形态的影响 | 第62-63页 |
4.3.3 含硫香料对沙门氏菌总ATP和胞外ATP含量的影响 | 第63-64页 |
4.4 本章小结 | 第64-66页 |
第五章 结论 | 第66-67页 |
参考文献 | 第67-74页 |
致谢 | 第74-76页 |
附录A 发表的学术论文 | 第76页 |