摘要 | 第4-6页 |
ABSTRACT | 第6-8页 |
符号说明 | 第9-13页 |
1 绪论 | 第13-21页 |
1.1 牛羊乳过敏及主要过敏原 | 第13-15页 |
1.1.1 牛羊乳过敏 | 第13页 |
1.1.2 牛羊乳过敏的免疫学机制 | 第13-14页 |
1.1.3 牛羊乳酪蛋白过敏研究进展 | 第14-15页 |
1.2 牛羊乳酪蛋白抗原表位研究进展 | 第15-16页 |
1.2.1 抗原表位概念 | 第15页 |
1.2.2 牛羊乳酪蛋白抗原表位预测 | 第15-16页 |
1.3 Caco-2细胞模型在合成抗原表位肽转运吸收研究中的应用 | 第16-17页 |
1.3.1 Caco-2细胞模型的概述 | 第16-17页 |
1.3.2 合成抗原表位肽在Caco-2细胞的转运吸收研究 | 第17页 |
1.4 加工对牛羊乳酪蛋白抗原性的影响 | 第17-19页 |
1.4.1 酶水解方式 | 第17-18页 |
1.4.2 发酵处理方式 | 第18页 |
1.4.3 热处理方式 | 第18-19页 |
1.5 研究目的及意义 | 第19-20页 |
1.6 研究内容及技术路线 | 第20-21页 |
1.6.1 主要研究内容 | 第20页 |
1.6.2 技术路线 | 第20-21页 |
2 牛羊乳酪蛋白抗原表位预测及免疫学检测验证 | 第21-39页 |
2.1 引言 | 第21页 |
2.2 实验材料与仪器 | 第21-23页 |
2.2.1 材料与试剂 | 第21-22页 |
2.2.2 仪器与设备 | 第22页 |
2.2.3 主要试剂配制 | 第22-23页 |
2.3 实验方法 | 第23-27页 |
2.3.1 牛羊乳酪蛋白抗原表位预测 | 第23-25页 |
2.3.2 抗原表位肽的合成 | 第25页 |
2.3.3 完全抗原的制备及鉴定 | 第25页 |
2.3.4 合成抗原表位肽免疫原性的检测 | 第25-27页 |
2.4 结果与讨论 | 第27-38页 |
2.4.1 牛羊乳酪蛋白表位的预测及选择 | 第27-32页 |
2.4.2 酪蛋白合成抗原表位肽的鉴定检测结果 | 第32-34页 |
2.4.3 完全抗原的制备结果 | 第34页 |
2.4.4 合成抗原表位肽的免疫检测结果 | 第34-38页 |
2.5 本章小结 | 第38-39页 |
3 合成抗原表位肽在Caco-2细胞的转运吸收研究 | 第39-53页 |
3.1 引言 | 第39页 |
3.2 实验材料与仪器 | 第39-41页 |
3.2.1 材料与试剂 | 第39-40页 |
3.2.2 仪器与设备 | 第40页 |
3.2.3 主要试剂配制 | 第40-41页 |
3.3 实验方法 | 第41-44页 |
3.3.1 Caco-2细胞模型的建立及评价 | 第41-43页 |
3.3.2 合成抗原表位肽的浓度对细胞毒性的实验 | 第43页 |
3.3.3 合成抗原表位肽跨膜转运研究 | 第43-44页 |
3.4 结果与讨论 | 第44-51页 |
3.4.1 Caco-2细胞模型的验证结果 | 第44-48页 |
3.4.2 合成抗原表位肽对细胞毒性的实验结果 | 第48-49页 |
3.4.3 合成抗原表位肽跨膜转运量的实验结果 | 第49-51页 |
3.5 本章小结 | 第51-53页 |
4 热处理对牛羊乳酪蛋白抗原性影响的研究 | 第53-71页 |
4.1 引言 | 第53页 |
4.2 实验材料与仪器 | 第53-56页 |
4.2.1 材料与试剂 | 第53-54页 |
4.2.2 仪器与设备 | 第54-55页 |
4.2.3 ELISA主要试剂配制 | 第55页 |
4.2.4 SDS-PAGE主要试剂配制 | 第55-56页 |
4.2.5 人工胃液肠液的配置 | 第56页 |
4.3 实验方法 | 第56-60页 |
4.3.1 牛羊乳酪蛋白的制备及处理 | 第56-57页 |
4.3.2 牛羊乳酪蛋白纯度的检测 | 第57-58页 |
4.3.3 牛羊乳酪蛋白圆二色谱分析 | 第58页 |
4.3.4 牛羊乳酪蛋白紫外光谱分析 | 第58页 |
4.3.5 牛羊乳酪蛋白疏水性的检测 | 第58-59页 |
4.3.6 牛羊乳酪蛋白多克隆抗体的制备及抗原性的检测 | 第59-60页 |
4.4 结果与讨论 | 第60-69页 |
4.4.1 牛羊乳酪蛋白纯度的鉴定 | 第60-61页 |
4.4.2 热处理对牛羊乳酪蛋白二级结构的影响 | 第61-63页 |
4.4.3 热处理对牛羊乳酪蛋白紫外吸收的影响 | 第63-64页 |
4.4.4 热处理对牛羊乳酪蛋白疏水性的影响 | 第64-66页 |
4.4.5 热处理对牛羊乳酪蛋白抗原性的影响 | 第66-69页 |
4.5 本章小结 | 第69-71页 |
5 结论与展望 | 第71-73页 |
5.1 主要结论 | 第71-72页 |
5.2 尚存问题 | 第72页 |
5.3 创新点 | 第72页 |
5.4 展望 | 第72-73页 |
致谢 | 第73-74页 |
参考文献 | 第74-83页 |
附录A:RP-HPLC和TC-MC检测合成抗原表位多肽纯度的谱图 | 第83-88页 |
攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第88-90页 |