| 摘要 | 第3-5页 |
| abstract | 第5-6页 |
| 第1章 引言 | 第14-27页 |
| 1.1 食品蛋白质的糖基化修饰 | 第15-17页 |
| 1.1.1 食品蛋白质的糖基化方法 | 第15-16页 |
| 1.1.1.1 干热法 | 第15页 |
| 1.1.1.2 湿热法 | 第15-16页 |
| 1.1.2 蛋白质糖基化的影响因素 | 第16-17页 |
| 1.1.2.1 内在反应条件 | 第16页 |
| 1.1.2.2 外在加工条件 | 第16-17页 |
| 1.1.3 糖基化蛋白质的结构 | 第17页 |
| 1.2 基于生物质谱的蛋白质组学方法 | 第17-25页 |
| 1.2.1 生物质谱技术简介 | 第18-22页 |
| 1.2.1.1 质谱分析的基本原理 | 第19-20页 |
| 1.2.1.2 质谱的离子源 | 第20-21页 |
| 1.2.1.3 质谱的裂解技术 | 第21-22页 |
| 1.2.2 FTICR-MS简介 | 第22-23页 |
| 1.2.3 氢氘交换质谱 | 第23-25页 |
| 1.3 生物质谱技术在食品蛋白质中的应用 | 第25页 |
| 1.4 本论文的研究意义 | 第25-26页 |
| 1.5 本论文的主要研究内容 | 第26页 |
| 1.6 本课题的主要创新点 | 第26-27页 |
| 第2章 二硫键对蛋白质糖基化的影响机理 | 第27-45页 |
| 2.1 引言 | 第27-28页 |
| 2.2 材料和方法 | 第28-31页 |
| 2.2.1 实验材料 | 第28页 |
| 2.2.2 实验仪器 | 第28页 |
| 2.2.3 实验方法 | 第28-31页 |
| 2.2.3.1 卵清蛋白的还原 | 第28-29页 |
| 2.2.3.2 干热反应样品的制备 | 第29页 |
| 2.2.3.3 湿热反应样品的制备 | 第29页 |
| 2.2.3.4 乳化性的测定 | 第29页 |
| 2.2.3.5 泡沫性质的测定 | 第29-30页 |
| 2.3.3.6 样品的酶解 | 第30页 |
| 2.3.3.7 高效液相-质谱(HPLC-MS)分析 | 第30-31页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第31-44页 |
| 2.3.1 功能性质 | 第31-32页 |
| 2.3.2 糖基化程度分析 | 第32-39页 |
| 2.3.3 糖基化位点的鉴定 | 第39-44页 |
| 2.4 本章小结 | 第44-45页 |
| 第3章 卵清蛋白与不同糖在高温湿热下的糖基化反应 | 第45-57页 |
| 3.1 引言 | 第45页 |
| 3.2 实验部分 | 第45-48页 |
| 3.2.1 实验材料 | 第45-46页 |
| 3.2.2 实验仪器 | 第46页 |
| 3.2.3 实验方法 | 第46-48页 |
| 3.2.3.1 卵清蛋白糖基化样品的制备 | 第46页 |
| 3.2.3.2 紫外吸收和褐变程度的测定 | 第46页 |
| 3.2.3.3 自由氨基含量的测定 | 第46-47页 |
| 3.2.3.4 热力学性质 | 第47页 |
| 3.2.3.5 内源荧光光谱的测定 | 第47页 |
| 3.2.3.6 抗氧化性的测定 | 第47-48页 |
| 3.2.4 数据分析 | 第48页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第48-56页 |
| 3.3.1 紫外吸收和褐变程度 | 第48-49页 |
| 3.3.2 自由氨基含量 | 第49-50页 |
| 3.3.3 热力学性质 | 第50-51页 |
| 3.3.4 内源荧光光谱 | 第51-52页 |
| 3.3.5 还原力 | 第52-53页 |
| 3.3.6 DPPH清除力 | 第53-55页 |
| 3.3.7 Trolox当量抗氧化能力(TEAC值) | 第55-56页 |
| 3.4 本章小结 | 第56-57页 |
| 第4章 氢氘交换质谱研究卵清蛋白糖基化后的构象变化 | 第57-67页 |
| 4.1 引言 | 第57-58页 |
| 4.2 材料与方法 | 第58-60页 |
| 4.2.1 实验材料与设备 | 第58页 |
| 4.2.2 样品制备 | 第58页 |
| 4.2.3 糖基化肽的鉴定 | 第58-59页 |
| 4.2.3.1 样品酶解 | 第58页 |
| 4.2.3.2 液相-质谱分析 | 第58-59页 |
| 4.2.4 氢氘交换实验 | 第59页 |
| 4.2.4.1 氢氘交换、液相-质谱实验装置和肽的鉴定 | 第59页 |
| 4.2.4.2 氢氘交换-质谱实验 | 第59页 |
| 4.2.5 数据分析 | 第59-60页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第60-66页 |
| 4.3.1 卵清蛋白的糖基化位点 | 第60-63页 |
| 4.3.2 糖基化程度 | 第63-64页 |
| 4.3.3 糖基化蛋白质的构象变化 | 第64-66页 |
| 4.4 结论 | 第66-67页 |
| 第5章 动态高压微射流对蛋白质糖基化的影响机理 | 第67-82页 |
| 5.1 引言 | 第67-68页 |
| 5.2 材料与方法 | 第68-69页 |
| 5.2.1 实验材料 | 第68页 |
| 5.2.2 实验仪器 | 第68页 |
| 5.2.3 实验方法 | 第68-69页 |
| 5.2.3.1 DHPM改性 | 第68页 |
| 5.2.3.2 糖基化反应 | 第68-69页 |
| 5.2.3.3 吸光度的测定 | 第69页 |
| 5.2.3.4 样品的酶解 | 第69页 |
| 5.2.3.5 高效液-质谱分析 | 第69页 |
| 5.3 结果与讨论 | 第69-80页 |
| 5.3.1 褐变程度 | 第69-71页 |
| 5.3.2 糖基化位点的鉴定 | 第71-76页 |
| 5.3.3 DHPM对BSA糖基化程度的影响 | 第76-77页 |
| 5.3.4 DHPM处理后BSA构象的变化 | 第77-80页 |
| 5.4 本章小结 | 第80-82页 |
| 第6章 氢氘交换质谱研究BSA经DHPM改性后的构象 | 第82-88页 |
| 6.1 引言 | 第82-83页 |
| 6.2 材料与方法 | 第83-84页 |
| 6.2.1 实验材料与仪器 | 第83页 |
| 6.2.2 DHPM处理 | 第83页 |
| 6.2.3 氢氘交换实验 | 第83-84页 |
| 6.2.3.1 氢氘交换、液相-质谱实验装置和肽的鉴定 | 第83页 |
| 6.2.3.2 氢氘交换-质谱实验 | 第83-84页 |
| 6.3 数据分析 | 第84页 |
| 6.4 结果与讨论 | 第84-87页 |
| 6.5 结论 | 第87-88页 |
| 第7章 蛋白质组学方法鉴定蛋清蛋白及其各组分的糖基化差异 | 第88-103页 |
| 7.1 引言 | 第88-89页 |
| 7.2 材料与方法 | 第89-91页 |
| 7.2.1 试剂与仪器 | 第89页 |
| 7.2.1.1 材料与试剂 | 第89页 |
| 7.2.1.2 实验仪器 | 第89页 |
| 7.2.2 样品制备 | 第89页 |
| 7.2.3 蛋白质的提取 | 第89-90页 |
| 7.2.4 SDS-PAGE | 第90页 |
| 7.2.5 酶解 | 第90页 |
| 7.2.6 HPLC-LTQ-MS/MS | 第90-91页 |
| 7.2.7 数据搜索 | 第91页 |
| 7.3 结果与讨论 | 第91-102页 |
| 7.3.1 蛋清蛋白的鉴定 | 第91-95页 |
| 7.3.2 蛋清蛋白的糖基化鉴定 | 第95-102页 |
| 7.4 本章小结 | 第102-103页 |
| 第8章 结论与展望 | 第103-107页 |
| 8.1 引言 | 第103页 |
| 8.2 结论 | 第103-105页 |
| 8.3 展望 | 第105-107页 |
| 致谢 | 第107-108页 |
| 参考文献 | 第108-122页 |
| 攻读博士学位期间的研究成果 | 第122页 |
