摘要 | 第3-4页 |
Abstract | 第4页 |
1 绪论 | 第7-13页 |
1.1 无机磷酸盐摄取研究进展 | 第7页 |
1.2 C. sakazakii研究进展 | 第7-9页 |
1.3 细菌胞外多糖和菌膜的功能 | 第9-10页 |
1.4 立题背景及意义 | 第10页 |
1.5 课题研究方案及目标 | 第10-13页 |
2 材料与方法 | 第13-23页 |
2.1 材料 | 第13-16页 |
2.1.1 菌株、质粒和引物 | 第13-15页 |
2.1.2 试剂和仪器 | 第15-16页 |
2.1.3 培养基和培养条件 | 第16页 |
2.2 分子实验操作 | 第16-19页 |
2.2.1 分子生物学实验基本操作 | 第16-17页 |
2.2.2 敲除突变株的构建 | 第17-18页 |
2.2.3 突变株的回补构建及基因过表达构建 | 第18-19页 |
2.3 基本膜壁结构鉴定 | 第19-20页 |
2.3.1 鞭毛、菌毛基本结构存在性鉴定 | 第19页 |
2.3.2 克拉酸提取定量及光学显微镜染色鉴定 | 第19页 |
2.3.3 低磷酸下脂多糖分子结构提取及鉴定 | 第19-20页 |
2.3.4 低磷酸下内膜蛋白提取及鉴定 | 第20页 |
2.4 菌特性实验 | 第20-22页 |
2.4.1 C. sakazakii和E. coli在不同培养基中生长曲线测定 | 第20页 |
2.4.2 细菌运动性实验 | 第20页 |
2.4.3 细菌自凝集测定实验 | 第20-21页 |
2.4.4 细菌膜渗透性测定实验 | 第21页 |
2.4.5 细菌菌膜形成能力测定实验 | 第21页 |
2.4.6 细菌极度耐酸性测定实验 | 第21页 |
2.4.7 细菌粘附性实验 | 第21-22页 |
2.5 基因转录水平分析 | 第22-23页 |
2.5.1 相关基因的表达分析 | 第22页 |
2.5.2 全基因转录组学测定与分析 | 第22-23页 |
3 结果与讨论 | 第23-39页 |
3.1 C .sakazakii BAA-894 中与磷酸转运相关基因的鉴定 | 第23-25页 |
3.2 C .sakazakii BAA-894 中pstSCAB操纵子不影响细胞生长 | 第25-27页 |
3.3 C .sakazakii BAA-894 中pstSCAB操纵子会影响低磷酸下胞外多糖的形成 | 第27-28页 |
3.4 C .sakazakii BAA-894 中pstSCAB操纵子会影响鞭毛的形成 | 第28-30页 |
3.5 C .sakazakii BAA-894 中pstSCAB操纵子对脂多糖和内膜蛋白的影响 | 第30-31页 |
3.6 C .sakazakii BAA-894 中pstSCAB操纵子对膜渗透性、细胞自凝集、菌膜形成能力和粘附性的影响 | 第31-32页 |
3.7 C. sakazakii与E. coli双组份调控系统差异及原因探究 | 第32-34页 |
3.8 转录组学分析 | 第34-39页 |
主要结论与展望 | 第39-41页 |
主要结论 | 第39页 |
展望 | 第39-41页 |
致谢 | 第41-42页 |
参考文献 | 第42-47页 |
附录: 作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第47-48页 |
附表 1 GO功能分析所得差异表达基因的相关信息 | 第48-53页 |