| 摘要 | 第1-10页 |
| Abstract | 第10-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-43页 |
| 一、细菌素(Bacteriocins) | 第13-19页 |
| 1.细菌素的分类 | 第14-15页 |
| 2.细菌素与抗生素的区别 | 第15-16页 |
| 3.羊毛硫细菌素(Lantibiotic) | 第16-18页 |
| 4.非羊毛硫细菌素 | 第18-19页 |
| 二、乳酸链球菌素(Nisin) | 第19-27页 |
| 1.乳酸链球菌素的发现和研究历史 | 第19-20页 |
| 2.乳酸链球菌素的结构和生物合成 | 第20-23页 |
| 3.乳酸链球菌素的抑菌谱 | 第23页 |
| 4.乳酸链球菌素的抑菌作用机制 | 第23-27页 |
| 三、细菌对乳酸链球菌素的耐药性研究进展 | 第27-36页 |
| 1.乳酸链球菌对Nisin的免疫 | 第27-29页 |
| 2.革兰氏阴性菌对Nisin的耐药性 | 第29-30页 |
| 3.革兰氏阳性菌对Nisin的耐药性 | 第30-36页 |
| 四、乳酸链球菌素的应用 | 第36-42页 |
| 1.乳酸链球菌素在食品工业中的应用 | 第37-39页 |
| 2.乳酸链球菌素在农业中的应用 | 第39-40页 |
| 3.乳酸链球菌素在医药行业的应用 | 第40-41页 |
| 4.乳酸链球菌素的应用局限性 | 第41-42页 |
| 五、本论文的研究背景和研究内容 | 第42-43页 |
| 第二章 乳酸链球菌素耐药菌株的筛选与鉴定 | 第43-59页 |
| ·材料与方法 | 第44-50页 |
| ·样品采集 | 第44页 |
| ·试剂与培养基 | 第44-45页 |
| ·革兰氏阳性菌株的分离、纯化 | 第45页 |
| ·Nisin耐药菌株的筛选 | 第45页 |
| ·最小抑菌浓度(MIC)的测定 | 第45页 |
| ·Nisin耐药菌株的基因组DNA的提取 | 第45-46页 |
| ·引物 | 第46页 |
| ·菌株的16S rDNA序列扩增 | 第46-47页 |
| ·PCR产物的纯化和回收 | 第47页 |
| ·克隆与筛选 | 第47-50页 |
| ·16S rDNA序列测定及分析 | 第50页 |
| ·Nisin耐药菌株的生理生化鉴定 | 第50页 |
| ·实验结果 | 第50-57页 |
| ·革兰氏阳性细菌的分离、纯化 | 第50页 |
| ·Nisin耐药细菌的筛选 | 第50-52页 |
| ·最小抑菌浓度(MIC)的测定 | 第52-53页 |
| ·耐药细菌的16sDNA序列扩增及阳性克隆的鉴定 | 第53-54页 |
| ·Nisin耐药菌株的16S rDNA序列分析 | 第54页 |
| ·Nisin耐药菌株的生理生化鉴定 | 第54-57页 |
| ·讨论 | 第57-59页 |
| ·实验室外高度耐Nisin细菌菌株的筛选和分析 | 第57页 |
| ·耐Nisin葡萄球菌的类群及分析 | 第57-59页 |
| 第三章 乳酸链球菌素耐药菌株的耐药机理研究 | 第59-69页 |
| ·材料与方法 | 第60-62页 |
| ·菌株和培养条件 | 第60页 |
| ·培养基 | 第60页 |
| ·耐Nisin菌株的耐药稳定性检测 | 第60-61页 |
| ·耐药菌株的质粒提取 | 第61页 |
| ·耐药菌株的基因组DNA提取 | 第61页 |
| ·Nisin免疫基因的PCR扩增 | 第61-62页 |
| ·Nisin失活物质(Nisin inactive substance)的检测 | 第62页 |
| ·实验结果 | 第62-66页 |
| ·耐药菌株的耐药稳定性 | 第62-63页 |
| ·耐药菌株的质粒提取 | 第63页 |
| ·Nisin免疫类似基因的PCR扩增 | 第63-65页 |
| ·Nisin失活物质检测 | 第65-66页 |
| ·讨论 | 第66-69页 |
| ·耐药性稳定性 | 第66-67页 |
| ·耐药性的分子机理分析 | 第67页 |
| ·Nisin失活物质的产生 | 第67-69页 |
| 第四章 Nisin耐药菌株产生的Nisin失活物质(Nisin inactive substance,NIS)的研究 | 第69-86页 |
| ·材料与方法 | 第70-74页 |
| ·菌株和培养条件 | 第70页 |
| ·Nisin失活物质(NIS)的活力测定方法 | 第70-71页 |
| ·S.epidermidis NIS 41生长曲线和NIS生成曲线的研究 | 第71页 |
| ·去菌液的硫酸铵沉淀 | 第71页 |
| ·NIS的稳定性分析 | 第71-72页 |
| ·有机溶剂对NIS的影响 | 第72页 |
| ·NIS粗提液的制备 | 第72页 |
| ·NIS粗提液对其他细菌素的作用 | 第72-73页 |
| ·蛋白电泳分析 | 第73页 |
| ·NIS粗提液的酸碱度检测 | 第73页 |
| ·显色反应 | 第73-74页 |
| ·NIS的分离与检测 | 第74页 |
| ·实验结果 | 第74-83页 |
| ·S.epidermidis NIS 41生长曲线和NIS生成曲线的研究 | 第74-75页 |
| ·耐药菌株去菌液的硫酸铵沉淀 | 第75页 |
| ·NIS稳定性分析 | 第75-77页 |
| ·有机溶剂对NIS活力的影响 | 第77页 |
| ·NIS粗提液的制备 | 第77-78页 |
| ·NIS粗提液对其他细菌素的作用 | 第78页 |
| ·蛋白电泳分析 | 第78-79页 |
| ·NIS粗提液的酸碱度检测 | 第79页 |
| ·显色反应 | 第79页 |
| ·NIS的分离与检测 | 第79-83页 |
| ·讨论 | 第83-86页 |
| ·关于S.epidermidis NIS 41产生的NIS的性质 | 第83-84页 |
| ·S.epidermidis NIS 41产生的NIS对Nisin及其它细菌素的作用 | 第84-85页 |
| ·挥发性NIS的分离和检测 | 第85-86页 |
| 第五章 Nisin Z的纯化及其对抑菌作用的影响 | 第86-96页 |
| ·材料与方法 | 第87-89页 |
| ·Nisin粗品 | 第87页 |
| ·指示菌和培养条件 | 第87页 |
| ·CM-32离子交换层析 | 第87-88页 |
| ·Nisin的透析脱盐浓缩 | 第88页 |
| ·Nisin的效价测定 | 第88页 |
| ·蛋白含量测定 | 第88页 |
| ·Tricine-SDS-PAGE | 第88-89页 |
| ·最小抑菌浓度(MIC)的测定 | 第89页 |
| ·NaCl对Nisin抑菌作用的影响 | 第89页 |
| ·实验结果 | 第89-94页 |
| ·CM-32离子交换层析 | 第89-90页 |
| ·Nisin的纯化效果 | 第90-91页 |
| ·Tricine-SDS-PAGE | 第91-92页 |
| ·纯化的Nisin对抑菌作用的影响 | 第92-93页 |
| ·NaCl对Nisin抑菌作用的影响 | 第93-94页 |
| ·讨论 | 第94-96页 |
| ·Nisin的纯化 | 第94-95页 |
| ·纯化作用对Nisin的抑菌影响 | 第95-96页 |
| 第六章 总结与展望 | 第96-98页 |
| ·总结 | 第96-97页 |
| ·展望 | 第97-98页 |
| 参考文献 | 第98-113页 |
| 附录1 | 第113-118页 |
| 附录2 读博期间发表的论文 | 第118-119页 |
| 致谢 | 第119页 |
