| 中文摘要 | 第1-4页 |
| ABSTRACT | 第4-6页 |
| 目录 | 第6-9页 |
| 前言 | 第9-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-34页 |
| ·细胞信号转导概述 | 第11-12页 |
| ·细胞信号转导的发展及基本内容 | 第11页 |
| ·细胞的跨膜信号转导 | 第11-12页 |
| ·cAMP 信号通路的组成及作用 | 第12页 |
| ·酿酒酵母的cAMP 信号通路 | 第12-14页 |
| ·Ras-cAMP 途径的主要元件 | 第14-21页 |
| ·Ras—cAMP 途径的必要元件 | 第14-15页 |
| ·Cdc25 和Sdc25—Ras 蛋白的鸟嘌呤核苷酸交换因子 | 第15-16页 |
| ·Ira1 和Ira2—Ras 蛋白的GTP 酶激活蛋白 | 第16-17页 |
| ·Cdc35/Cyr1-腺苷酸环化酶和Cap/Srv-腺苷酸环化酶相关蛋白 | 第17-18页 |
| ·Pde1 和Pde2—低亲和力和高亲和力的cAMP 磷酸二酯酶 | 第18-19页 |
| ·G 蛋白偶联的受体体系（Gpr1-Gpa2） | 第19-21页 |
| ·cAMP 依赖的蛋白激酶（PKA）—Ras-cAMP 途径的主要靶标 | 第21-22页 |
| ·Ras-cAMP 途经的反馈调控 | 第22-23页 |
| ·葡萄糖诱导的Ras-cAMP 途经的激活 | 第23-25页 |
| ·葡萄糖诱导的cAMP 信号途径的激活 | 第23页 |
| ·葡萄糖诱导的cAMP 信号途经的激活对碳代谢的影响 | 第23-25页 |
| ·葡萄糖激活cAMP 信号通路的生理作用 | 第25页 |
| ·Ras-cAMP 途径和发酵生长培养基诱导的途径（FGM 途径） | 第25-28页 |
| ·在葡萄糖上和非发酵碳源上生长的细胞显示出相反的表型 | 第25-26页 |
| ·FGM 途径与Ras-cAMP 途径的重叠靶标特异性 | 第26-28页 |
| ·Ras-cAMP 途径/PKA 活性和酵母细胞周期的调控 | 第28-29页 |
| ·Ras-cAMP 途径/PKA 活性与压力抗性 | 第29-32页 |
| ·酿酒酵母的通用压力响应 | 第29-30页 |
| ·压力抗性的获得与Ras-cAMP 途径的作用 | 第30-31页 |
| ·酵母细胞的抗性与细胞寿命 | 第31-32页 |
| ·本文的主要研究内容 | 第32-34页 |
| 第二章 酿酒酵母中葡萄糖诱导的Ras-cAMP 途径激活特性的研究 | 第34-72页 |
| ·实验材料 | 第34-39页 |
| ·质粒与菌种 | 第34-35页 |
| ·主要仪器 | 第35-36页 |
| ·主要试剂 | 第36-37页 |
| ·酶制剂 | 第37页 |
| ·培养基 | 第37-38页 |
| ·主要溶液 | 第38-39页 |
| ·实验方法 | 第39-48页 |
| ·大肠杆菌转化 | 第39-40页 |
| ·质粒的提取 | 第40页 |
| ·DNA 片段的回收纯化 | 第40页 |
| ·PCR 反应体系 | 第40-41页 |
| ·酶切体系 | 第41-42页 |
| ·连接体系 | 第42页 |
| ·酵母染色体的快速分离 | 第42页 |
| ·酵母细胞的转化 | 第42-43页 |
| ·酵母等位基因的分离及遗传分析 | 第43-44页 |
| ·不同交配型酵母细胞之间的杂交 | 第44页 |
| ·产孢及四分体孢子拆分 | 第44页 |
| ·酵母交配型的验证 | 第44-45页 |
| ·cAMP 定量测量原理 | 第45页 |
| ·样品采集 | 第45-46页 |
| ·待测cAMP 样品制备 | 第46页 |
| ·试剂制备（Cyclic AMP[3H]分析系统试剂盒） | 第46页 |
| ·cAMP 系列浓度标准溶液制备 | 第46-47页 |
| ·测定方案 | 第47页 |
| ·数据处理 | 第47-48页 |
| ·实验结果与讨论 | 第48-71页 |
| ·pUC18-PDE2 和ppde2::URA3 的构建 | 第48-52页 |
| ·pde2△、pde1△和pde1△pde2△菌株的构建 | 第52-56页 |
| ·cAMP 磷酸二酯酶在PKA 弱化菌株中的作用 | 第56-66页 |
| ·Pde1 调控胞内基础cAMP 水平的作用 | 第66-68页 |
| ·Ras1，Ras2 在葡萄糖激活Ras-cAMP 信号途径中的作用 | 第68-71页 |
| ·小结 | 第71-72页 |
| 第三章 氮源及Sch9 激酶与Ras-cAMP 途径的关系 | 第72-82页 |
| ·实验材料 | 第73页 |
| ·菌种 | 第73页 |
| ·主要试剂 | 第73页 |
| ·实验方法 | 第73页 |
| ·实验结果与讨论 | 第73-80页 |
| ·sch9△菌株的构建 | 第73-74页 |
| ·野生菌株氮源缺乏条件下葡萄糖诱导Ras-cAMP 途径的激活 | 第74-77页 |
| ·Sch9 在葡萄糖激活Ras-cAMP 信号通路中的作用 | 第77-80页 |
| ·小结 | 第80-82页 |
| 第四章 酿酒酵母细胞衰老与热激抗性关系的研究 | 第82-93页 |
| ·实验材料 | 第82-83页 |
| ·菌种 | 第82-83页 |
| ·培养基 | 第83页 |
| ·实验方法 | 第83-84页 |
| ·实验结果与讨论 | 第84-91页 |
| ·葡萄糖培养基上酵母细胞时序寿命与 Ras/cAMP/PKA 信号通路 的活性及热激抗性的关系 | 第84-87页 |
| ·非发酵型碳源培养基上酵母细胞时序寿命与 Ras/cAMP/PKA 信 号通路的活性及热激抗性的关系 | 第87-91页 |
| ·小结 | 第91-93页 |
| 第五章 总结与展望 | 第93-95页 |
| ·主要创造性工作总结 | 第93-94页 |
| ·相关工作的前景展望 | 第94-95页 |
| 参考文献 | 第95-108页 |
| 攻读博士学位期间发表的论文和参加科研情况 | 第108-109页 |
| 附录1 生化名词缩写 | 第109-110页 |
| 附录2 基因及其相应编码产物 | 第110-111页 |
| 致谢 | 第111页 |
