| 致谢 | 第4-7页 |
| 摘要 | 第7-8页 |
| 1 文献综述 | 第8-16页 |
| 1.1 淀粉简介 | 第8页 |
| 1.2 淀粉酶简介 | 第8-10页 |
| 1.2.1 α-淀粉酶 | 第9页 |
| 1.2.2 β-淀粉酶 | 第9页 |
| 1.2.3 葡萄糖淀粉酶 | 第9页 |
| 1.2.4 淀粉脱支酶 | 第9-10页 |
| 1.3 淀粉脱支酶的研究进展 | 第10-14页 |
| 1.3.1 普鲁兰酶 | 第10-12页 |
| 1.3.2 异淀粉酶 | 第12-14页 |
| 1.4 数据库在新酶发现方面的应用前景 | 第14-16页 |
| 2 引言 | 第16-17页 |
| 3 材料与方法 | 第17-28页 |
| 3.1 菌株和质粒 | 第17页 |
| 3.2 药品 | 第17页 |
| 3.3 培养基 | 第17-18页 |
| 3.3.2 LB平板 | 第17页 |
| 3.3.3 SOB培养基 | 第17页 |
| 3.3.4 自诱导培养基配方 | 第17-18页 |
| 3.4 试剂的配制 | 第18-19页 |
| 3.5 主要仪器 | 第19页 |
| 3.6 方法 | 第19-28页 |
| 3.6.1 Thermosiph africanus普鲁兰酶基因的克隆 | 第19-20页 |
| 3.6.2 Sulfolobus tokodaii来源的异淀粉酶的克隆 | 第20-21页 |
| 3.6.3 制备感受态细胞 | 第21-22页 |
| 3.6.4 普鲁兰酶和异淀粉酶外源基因的转化 | 第22页 |
| 3.6.5 普鲁兰酶和异淀粉酶在大肠杆菌中的诱导表达 | 第22-23页 |
| 3.6.6 重组酶粗酶液制备 | 第23页 |
| 3.6.7 普鲁兰酶蛋白的纯化 | 第23页 |
| 3.6.8 异淀粉酶蛋白纯化 | 第23页 |
| 3.6.9 SDS-PAGE检测 | 第23-24页 |
| 3.6.10 普鲁兰酶酶活测定 | 第24-25页 |
| 3.6.11 普鲁兰酶学性质研究 | 第25-26页 |
| 3.6.12 异淀粉酶活力测定 | 第26-27页 |
| 3.6.13 异淀粉酶学性质研究 | 第27页 |
| 3.6.14 异淀粉酶的应用生淀粉的水解实验 | 第27-28页 |
| 4 结果与分析 | 第28-44页 |
| 4.1 普鲁兰酶基因的克隆、表达及性质研究 | 第28-38页 |
| 4.1.1 Thermosipho africanus THA_835的PCR扩增 | 第28-30页 |
| 4.1.2 普鲁兰酶基因序列分析 | 第30-33页 |
| 4.1.3 Thermosipho africanus来源普鲁兰酶的表达 | 第33-34页 |
| 4.1.4 Thermosipho africanus普鲁兰酶的酶学性质 | 第34-38页 |
| 4.2 耐热异淀粉酶的表达,性质研究及应用 | 第38-44页 |
| 4.2.1 异淀粉酶表达及纯化结果 | 第38页 |
| 4.2.2 异淀粉酶IA性质的测定 | 第38-44页 |
| 5 结论与讨论 | 第44-46页 |
| 5.1 结论 | 第44页 |
| 5.2 讨论 | 第44-46页 |
| 参考文献 | 第46-52页 |
| 英文摘要 | 第52页 |
