| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 0 前言 | 第14-30页 |
| 0.1 卡拉胶简介 | 第14-16页 |
| 0.1.1 卡拉胶来源 | 第14页 |
| 0.1.2 卡拉胶结构分类 | 第14-16页 |
| 0.2 卡拉胶寡糖制备分析技术 | 第16-20页 |
| 0.2.1 卡拉胶寡糖制备 | 第16-17页 |
| 0.2.2 卡拉胶寡糖分离纯化 | 第17-19页 |
| 0.2.3 卡拉胶寡糖结构解析 | 第19-20页 |
| 0.3 卡拉胶寡糖生理活性 | 第20-23页 |
| 0.4 卡拉胶酶研究现状 | 第23-27页 |
| 0.4.1 卡拉胶酶简介 | 第23-24页 |
| 0.4.2 卡拉胶酶的分子生物学研究进展 | 第24页 |
| 0.4.3 酶的异源原核分泌表达 | 第24-27页 |
| 0.5 立题背景、意义及研究内容 | 第27-30页 |
| 0.5.1 立题背景、意义 | 第27-28页 |
| 0.5.2 本课题研究内容 | 第28-30页 |
| 1. Κ-卡拉胶酶基因克隆及序列解析 | 第30-43页 |
| 引言 | 第30页 |
| 1.1 实验材料 | 第30-31页 |
| 1.1.1 实验菌种与培养基 | 第30-31页 |
| 1.1.2 主要试剂 | 第31页 |
| 1.1.3 实验仪器 | 第31页 |
| 1.2 实验方法 | 第31-35页 |
| 1.2.1 ZM-2 基因组的提取[96,97] | 第31页 |
| 1.2.2 ZM-2 分子生物学鉴定 | 第31-32页 |
| 1.2.3 卡拉胶酶基因 cgkZ 的克隆 | 第32-33页 |
| 1.2.4 κ-卡拉胶酶基因序列解析 | 第33-35页 |
| 1.3 实验结果与讨论 | 第35-41页 |
| 1.3.1 κ-卡拉胶酶基因的获得 | 第35-36页 |
| 1.3.2 κ-卡拉胶酶基因序列解析 | 第36-41页 |
| 1.4 本章小结 | 第41-43页 |
| 2 卡拉胶酶基因的异源表达 | 第43-62页 |
| 引言 | 第43页 |
| 2.1 实验材料 | 第43-44页 |
| 2.1.1 实验菌种和培养基 | 第43页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第43-44页 |
| 2.1.3 实验仪器 | 第44页 |
| 2.2 实验方法 | 第44-49页 |
| 2.2.1 克隆载体 pUCm-cgkZ 及 pUCm-cgkZ 构建 | 第44-46页 |
| 2.2.2 表达载体 pProEX-HTa-cgkZ 及 pProEX-HTa-cgkZˉ构建 | 第46-49页 |
| 2.3 重组菌 BL21-HTa-cgkZ 胞外产酶条件优化 | 第49-52页 |
| 2.3.1 诱导条件优化 | 第49-50页 |
| 2.3.2 培养条件优化 | 第50-51页 |
| 2.3.3 其他条件优化 | 第51-52页 |
| 2.3.4 重组菌 BL21-HTa-cgkZ 生长产酶曲线 | 第52页 |
| 2.4 实验结果与讨论 | 第52-61页 |
| 2.4.1 表达载体 pProEX-HTa-cgkZ 及 pProEX-HTa-cgkZˉ构建 | 第52-56页 |
| 2.4.2 重组菌 BL21-HTa-cgkZ 产酶条件优化 | 第56-61页 |
| 2.5 本章小结 | 第61-62页 |
| 3 酶学性质及酶解产物解析 | 第62-76页 |
| 引言 | 第62页 |
| 3.1 实验材料 | 第62-64页 |
| 3.1.1 实验菌种 | 第62-63页 |
| 3.1.2 主要试剂 | 第63-64页 |
| 3.2 实验方法 | 第64-67页 |
| 3.2.1 重组酶 SDS-PAGE 分析 | 第64-65页 |
| 3.2.2 重组酶分子量确定 | 第65页 |
| 3.2.3 重组酶亲和纯化 | 第65-66页 |
| 3.2.4 重组κ-卡拉胶酶酶学性质研究 | 第66页 |
| 3.2.5 重组酶酶解产物分析 | 第66-67页 |
| 3.3 实验结果与讨论 | 第67-74页 |
| 3.3.1 重组κ-卡拉胶酶的鉴定与纯化 | 第67-69页 |
| 3.3.2 重组酶的基本酶学性质 | 第69-71页 |
| 3.3.3 κ-卡拉胶酶酶解产物解析 | 第71-74页 |
| 3.4 本章小结 | 第74-76页 |
| 4 酶法降解麒麟菜制备卡拉胶低聚糖 | 第76-85页 |
| 引言 | 第76页 |
| 4.1 实验材料 | 第76-77页 |
| 4.1.1 实验试剂 | 第76页 |
| 4.1.2 实验仪器 | 第76-77页 |
| 4.2 实验方法 | 第77-79页 |
| 4.2.1 实验流程 | 第77页 |
| 4.2.2 纤维素酶添加量、酶解时间的确定 | 第77-78页 |
| 4.2.3 卡拉胶酶添加量、酶解时间的确定 | 第78页 |
| 4.2.4 响应面法优化卡拉胶酶酶解条件 | 第78-79页 |
| 4.2.5 酶解麒麟菜产物分析 | 第79页 |
| 4.2.6 酶解耳突麒麟菜 GPC 结果 | 第79页 |
| 4.3 实验结果与讨论 | 第79-84页 |
| 4.3.1 纤维素酶添加量、降解时间确定 | 第79-80页 |
| 4.3.2 卡拉胶酶添加量的确定 | 第80-81页 |
| 4.3.3 响应面法优化耳突麒麟菜降解过程 | 第81-84页 |
| 4.4 本章小结 | 第84-85页 |
| 结语与展望 | 第85-87页 |
| 论文创新点 | 第87-88页 |
| 参考文献 | 第88-98页 |
| 致谢 | 第98-99页 |
| 个人简历 | 第99页 |
| 硕士期间的学术成果 | 第99-100页 |
