| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 1 引言 | 第9-23页 |
| 1.1 立题意义与背景 | 第9-10页 |
| 1.2 本研究中的食源性致病菌简介 | 第10-14页 |
| 1.2.1 沙门氏菌 | 第10-12页 |
| 1.2.2 大肠杆菌 O157:H7 | 第12-13页 |
| 1.2.3 小肠结肠炎耶尔森氏菌 | 第13-14页 |
| 1.3 食源性致病菌的检测方法 | 第14-22页 |
| 1.3.1 传统检测方法 | 第14-15页 |
| 1.3.2 免疫学检测方法 | 第15-17页 |
| 1.3.3 分子生物学方法 | 第17-22页 |
| 1.4 研究目的及内容 | 第22-23页 |
| 2 材料与方法 | 第23-33页 |
| 2.1 试验材料 | 第23-25页 |
| 2.1.1 试验菌株 | 第23页 |
| 2.1.2 主要仪器与设备 | 第23页 |
| 2.1.3 主要培养基 | 第23-24页 |
| 2.1.4 样品与生化试剂 | 第24-25页 |
| 2.2 试验方法 | 第25-33页 |
| 2.2.1 食源性致病菌的同时快速增殖 | 第25页 |
| 2.2.2 食源性致病菌基因组 DNA 的提取 | 第25-26页 |
| 2.2.3 多重 PCR 靶基因确定及其引物设计 | 第26页 |
| 2.2.4 正交反应体系初步确定多重PCR的反应体系 | 第26-27页 |
| 2.2.5 多重 PCR 退火温度的优化 | 第27页 |
| 2.2.6 多重 PCR 引物添加量的优化 | 第27页 |
| 2.2.7 多重 PCR Mg~(2+)添加量的优化 | 第27页 |
| 2.2.8 多重 PCR dNTPs 添加量的优化 | 第27-28页 |
| 2.2.9 多重 PCR Taq 酶添加量的优化 | 第28页 |
| 2.2.10 多重 PCR 反应特异性试验 | 第28页 |
| 2.2.11 单重 PCR 产物克隆测序检测 | 第28-29页 |
| 2.2.12 灵敏度的检测 | 第29-30页 |
| 2.2.13 人工污染灭菌鸡肉六种病原菌的目的基因提取方法比较 | 第30-32页 |
| 2.2.14 人工污染鸡肉的检出限 | 第32-33页 |
| 3 结果与分析 | 第33-45页 |
| 3.1 L16（44）正交初步确定反应体系结果 | 第33页 |
| 3.2 多重 PCR 反应体系的优化结果 | 第33-36页 |
| 3.2.1 退火温度的优化结果 | 第33-34页 |
| 3.2.2 引物添加量的优化结果 | 第34-35页 |
| 3.2.3 Mg~(2+)（25mmol/L）添加量的优化结果 | 第35页 |
| 3.2.4 dNTPs（2.5 mmol/L）添加量的优化结果 | 第35-36页 |
| 3.2.5 Taq 酶添加量的优化结果 | 第36页 |
| 3.3 特异性试验结果 | 第36-40页 |
| 3.3.1 多重 PCR 引物特异性 | 第36-39页 |
| 3.3.2 多重 PCR 反应特异性 | 第39-40页 |
| 3.4 多重 PCR 的灵敏度 | 第40-42页 |
| 3.4.1 多重 PCR 的单重灵敏度 | 第40-42页 |
| 3.4.2 多重 PCR 同时检测三种病原菌的灵敏度 | 第42页 |
| 3.5 人工污染样品中模板 DNA 提取的方法比较 | 第42-43页 |
| 3.6 人工污染鸡肉的检出限 | 第43-45页 |
| 4 讨论 | 第45-49页 |
| 4.1 靶基因的选择与引物设计 | 第45-46页 |
| 4.2 正交试验优化多重 PCR | 第46页 |
| 4.3 多重 PCR 的影响因素 | 第46-47页 |
| 4.4 多重 PCR 污染防控措施 | 第47-48页 |
| 4.5 展望 | 第48-49页 |
| 5 结论 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-55页 |
| 硕士期间发表学术论文 | 第55-56页 |
| 作者简介 | 第56-57页 |
| 致谢 | 第57-58页 |
