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耐酸调控双组分系统调节基因的初步筛选

摘要第4-5页
Abstract第5页
第1章 绪论第8-19页
    1.1 立题背景第8页
    1.2 乳酸菌耐酸机制的研究进展第8-11页
        1.2.1 乳酸菌的耐酸机制概况第8-10页
        1.2.2 德氏乳杆菌保加利亚亚种的耐酸机制研究第10-11页
    1.3 实时荧光定量 PCR 技术概述第11-13页
        1.3.1 历史和原理第11页
        1.3.2 实时荧光定量 PCR 的原理第11-13页
    1.4 实时荧光定量 PCR 的优缺点第13-14页
        1.4.1 优点第13-14页
        1.4.2 不足第14页
    1.5 实时荧光定量 PCR 的应用第14-15页
        1.5.1 定量分析和快速检测第14页
        1.5.2 基因分型第14-15页
        1.5.3 对基因表达差异量的分析第15页
    1.6 实时荧光定量在食品研究中的应用第15-17页
        1.6.1 食品安全与快速检测检测第15-16页
        1.6.2 实时荧光定量 PCR 在乳酸菌相关研究中的应用第16-17页
    1.7 小结与展望第17页
    1.8 本课题主要研究内容第17-19页
第2章 实验材料与方法第19-44页
    2.1 实验材料与仪器第19-31页
        2.1.1 实验所用菌株第19页
        2.1.2 酶及试剂盒第19页
        2.1.3 引物第19-29页
        2.1.4 试剂第29页
        2.1.5 常用试剂的配制第29-30页
        2.1.6 主要实验器材设备第30-31页
    2.2 实验方法第31-43页
        2.2.1 乳酸菌的活化与培养第31-32页
        2.2.2 RNA 提取第32-33页
        2.2.3 RNA 质量检测第33页
        2.2.4 RNA 反转录为 cDNA 及第二链合成第33-34页
        2.2.5 RT-qPCR第34-35页
        2.2.6 cDNA-AFLP第35-40页
        2.2.7 银染第40-41页
        2.2.8 差异片段的筛选、切割和回收第41页
        2.2.9 差异片段的二次扩增第41-42页
        2.2.10 数据计算分析第42-43页
    2.3 本章小结第43-44页
第3章 实验结果第44-63页
    3.1 RNA 提取第44-46页
        3.1.1 RNA OD 值测定第44页
        3.1.2 RNA 琼脂糖凝胶电泳第44-46页
    3.2 RNA 反转录 CDNA第46页
    3.3 德氏乳杆菌保加利亚亚种突变体 CH3-H 和 CH3-R 基因差异表达分析第46-59页
        3.3.1 实验结果第46-56页
        3.3.2 结果分析第56-59页
    3.4 CDNA-AFLP第59-62页
        3.4.1 预扩增与选择性扩增第59-61页
        3.4.2 cDNA-AFLP 电泳第61-62页
        3.4.3 结果分析第62页
    3.5 本章小结第62-63页
结论第63-65页
参考文献第65-70页
缩略词对照表第70-71页
攻读硕士学位期间发表的论文第71-73页
致谢第73页

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