摘要 | 第4-5页 |
Abstract | 第5页 |
第1章 绪论 | 第8-19页 |
1.1 立题背景 | 第8页 |
1.2 乳酸菌耐酸机制的研究进展 | 第8-11页 |
1.2.1 乳酸菌的耐酸机制概况 | 第8-10页 |
1.2.2 德氏乳杆菌保加利亚亚种的耐酸机制研究 | 第10-11页 |
1.3 实时荧光定量 PCR 技术概述 | 第11-13页 |
1.3.1 历史和原理 | 第11页 |
1.3.2 实时荧光定量 PCR 的原理 | 第11-13页 |
1.4 实时荧光定量 PCR 的优缺点 | 第13-14页 |
1.4.1 优点 | 第13-14页 |
1.4.2 不足 | 第14页 |
1.5 实时荧光定量 PCR 的应用 | 第14-15页 |
1.5.1 定量分析和快速检测 | 第14页 |
1.5.2 基因分型 | 第14-15页 |
1.5.3 对基因表达差异量的分析 | 第15页 |
1.6 实时荧光定量在食品研究中的应用 | 第15-17页 |
1.6.1 食品安全与快速检测检测 | 第15-16页 |
1.6.2 实时荧光定量 PCR 在乳酸菌相关研究中的应用 | 第16-17页 |
1.7 小结与展望 | 第17页 |
1.8 本课题主要研究内容 | 第17-19页 |
第2章 实验材料与方法 | 第19-44页 |
2.1 实验材料与仪器 | 第19-31页 |
2.1.1 实验所用菌株 | 第19页 |
2.1.2 酶及试剂盒 | 第19页 |
2.1.3 引物 | 第19-29页 |
2.1.4 试剂 | 第29页 |
2.1.5 常用试剂的配制 | 第29-30页 |
2.1.6 主要实验器材设备 | 第30-31页 |
2.2 实验方法 | 第31-43页 |
2.2.1 乳酸菌的活化与培养 | 第31-32页 |
2.2.2 RNA 提取 | 第32-33页 |
2.2.3 RNA 质量检测 | 第33页 |
2.2.4 RNA 反转录为 cDNA 及第二链合成 | 第33-34页 |
2.2.5 RT-qPCR | 第34-35页 |
2.2.6 cDNA-AFLP | 第35-40页 |
2.2.7 银染 | 第40-41页 |
2.2.8 差异片段的筛选、切割和回收 | 第41页 |
2.2.9 差异片段的二次扩增 | 第41-42页 |
2.2.10 数据计算分析 | 第42-43页 |
2.3 本章小结 | 第43-44页 |
第3章 实验结果 | 第44-63页 |
3.1 RNA 提取 | 第44-46页 |
3.1.1 RNA OD 值测定 | 第44页 |
3.1.2 RNA 琼脂糖凝胶电泳 | 第44-46页 |
3.2 RNA 反转录 CDNA | 第46页 |
3.3 德氏乳杆菌保加利亚亚种突变体 CH3-H 和 CH3-R 基因差异表达分析 | 第46-59页 |
3.3.1 实验结果 | 第46-56页 |
3.3.2 结果分析 | 第56-59页 |
3.4 CDNA-AFLP | 第59-62页 |
3.4.1 预扩增与选择性扩增 | 第59-61页 |
3.4.2 cDNA-AFLP 电泳 | 第61-62页 |
3.4.3 结果分析 | 第62页 |
3.5 本章小结 | 第62-63页 |
结论 | 第63-65页 |
参考文献 | 第65-70页 |
缩略词对照表 | 第70-71页 |
攻读硕士学位期间发表的论文 | 第71-73页 |
致谢 | 第73页 |