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黄鲫(Setipinna taty)蛋白抗菌肽的制备及抗菌作用等生物活性研究

摘要第1-7页
Abstract第7-16页
0 前言第16-31页
第一章 黄鲫蛋白抗菌肽的制备第31-53页
 第一节 黄鲫蛋白抗菌肽用酶选择第31-39页
  引言第31页
  1 材料与仪器第31-32页
   ·实验材料第31页
   ·主要试剂第31-32页
   ·主要仪器设备第32页
  2 实验方法第32-34页
   ·黄鲫常规营养成分测定第32页
   ·黄鲫氨基酸组成分析第32页
   ·黄鲫蛋白酶解液的制备第32-33页
   ·黄鲫各蛋白酶解液的抑菌作用比较第33页
   ·具有抑菌作用的黄鲫蛋白酶解液相对分子质量分布第33-34页
  3 结果与分析第34-37页
   ·黄鲫营养成分分析第34页
   ·黄鲫氨基酸组成分析第34-35页
   ·黄鲫各蛋白酶解液的抑菌作用比较第35-36页
   ·具有抑菌作用的黄鲫蛋白酶解液相对分子质量分布第36-37页
  4 讨论第37-38页
  5 小结第38-39页
 第二节 黄鲫蛋白抗菌肽制备工艺优化第39-53页
  引言第39页
  1 材料与仪器第39-40页
   ·实验材料第39页
   ·主要试剂第39-40页
   ·主要仪器设备第40页
  2 实验方法第40-42页
   ·抑菌活性测定:抑菌圈法第40页
   ·酶解液蛋白浓度快速测定第40-41页
   ·响应面分析实验第41页
   ·黄鲫蛋白抗菌肽的蛋白提取率、可溶性肽含量及水解度第41-42页
   ·黄鲫蛋白抗菌肽的分子量分布第42页
   ·氨基酸组成分析第42页
   ·黄鲫蛋白抗菌肽的抗菌谱和抗菌效力第42页
  3 结果与讨论第42-52页
   ·响应面分析第42-48页
   ·验证性实验第48-49页
   ·黄鲫蛋白抗菌肽的蛋白提取率、可溶性肽含量及水解度第49页
   ·黄鲫蛋白抗菌肽的分子量分布第49-50页
   ·氨基酸组成分析第50-51页
   ·黄鲫蛋白抗菌肽的抗菌谱和抗菌效力第51-52页
  4 小结第52-53页
第二章 黄鲫蛋白抗菌肽的理化性质第53-66页
 第一节 黄鲫蛋白抗菌肽的食品功能性第53-58页
  引言第53页
  1 材料与仪器第53页
   ·实验材料第53页
   ·主要试剂第53页
   ·主要仪器设备第53页
  2 实验方法第53-54页
   ·溶解性第53-54页
   ·乳化性和乳化稳定性第54页
   ·发泡性和泡沫稳定性第54页
   ·数据统计分析第54页
  3 结果与讨论第54-57页
   ·溶解性第55页
   ·乳化性和乳化稳定性第55-56页
   ·发泡性和泡持性第56-57页
  4 小结第57-58页
 第二节 黄鲫蛋白抗菌肽的抑菌影响因素第58-66页
  引言第58页
  1 材料与仪器第58-59页
   ·实验材料第58页
   ·主要试剂第58页
   ·主要仪器设备第58-59页
  2 实验方法第59-60页
   ·抑菌性测定第59页
   ·黄鲫蛋白抗菌肽的热稳定性第59页
   ·黄鲫蛋白抗菌肽对酸碱稳定性第59页
   ·黄鲫蛋白抗菌肽对胰蛋白酶稳定性第59页
   ·黄鲫蛋白抗菌肽对β-内酰胺酶稳定性第59页
   ·冻融次数对黄鲫蛋白抗菌肽抑菌作用的影响第59页
   ·金属离子对黄鲫蛋白抗菌肽抑菌作用的影响第59-60页
   ·数据统计分析第60页
  3 结果与讨论第60-65页
   ·黄鲫蛋白抗菌肽的热稳定性第60页
   ·黄鲫蛋白抗菌肽对酸碱稳定性第60-61页
   ·黄鲫蛋白抗菌肽对胰蛋白酶稳定性第61-62页
   ·黄鲫蛋白抗菌肽对β——内酰胺酶稳定性第62-63页
   ·冻融次数对黄鲫蛋白抗菌肽抑菌作用的影响第63页
   ·金属离子对黄鲫蛋白抗菌肽抑菌作用的影响第63-65页
  4 小结第65-66页
第三章 黄鲫蛋白抗菌肽的分离纯化第66-85页
 引言第66-67页
 1 材料与仪器第67页
   ·实验材料第67页
   ·主要试剂第67页
   ·主要仪器设备第67页
 2 实验方法第67-69页
   ·凝胶过滤分离第67-68页
   ·凝胶过滤脱盐第68页
   ·反相高效液相(RP-HPLC)分离纯化第68页
   ·Source 5RPC ST 4.6/150 分析柱分离第68页
   ·黄鲫蛋白抗菌肽的肽谱分析第68-69页
     ·超高效液相色谱(UPLC)分离第68-69页
     ·LTQ-Orbitrap 质谱鉴定肽序列第69页
   ·黄鲫蛋白抗菌肽的化学合成第69页
 3 结果与分析第69-83页
   ·黄鲫蛋白抗菌肽的Sephadex G 25 凝胶分离第69-71页
   ·二次Sephadex G 25 凝胶分离(凝胶过滤脱盐)第71-72页
   ·反相高效液相(RP-HPLC)分离纯化第72-73页
   ·Source 5RPC ST 4.6/150 分析柱分离第73-74页
   ·黄鲫蛋白抗菌肽的肽谱分析第74-82页
     ·超高效液相色谱(UPLC)分离第74-75页
     ·抗菌肽HAHp2-3-I 的肽谱解析第75-82页
   ·化学合成肽的抑菌结果第82-83页
 4 讨论第83-84页
 5 小结第84-85页
第四章 黄鲫蛋白抗菌肽的抑菌模式第85-96页
 引言第85页
 1 材料与仪器第85-86页
   ·实验材料第85页
   ·主要试剂第85-86页
   ·主要仪器设备第86页
 2 实验方法第86-88页
   ·黄鲫蛋白抗菌肽的抑菌模式第86-87页
     ·黄鲫蛋白抗菌肽的抑菌曲线第86页
     ·黄鲫蛋白抗菌肽对细胞膜完整性影响第86-87页
     ·扫描电镜分析第87页
   ·黄鲫蛋白抗菌肽同源性及二级结构分析第87-88页
     ·同源性分析第87页
     ·二级结构分析第87-88页
 3 结果与分析第88-94页
   ·黄鲫蛋白抗菌肽的抑菌模式第88-91页
     ·黄鲫蛋白抗菌肽的抑菌曲线第88页
     ·对细胞膜完整性影响第88-90页
     ·扫描电镜结果分析第90-91页
   ·黄鲫蛋白抗菌肽同源性及二级结构分析第91-94页
     ·序列相似性分析第91-93页
     ·黄鲫蛋白抗菌肽二级结构分析第93-94页
 4 讨论第94-95页
 5 小结第95-96页
第五章 黄鲫蛋白抗菌肽及热处理产物抗氧化作用第96-110页
 引言第96页
 1 材料与仪器第96-97页
   ·实验材料第96页
   ·主要试剂第96-97页
   ·主要仪器设备第97页
 2 实验方法第97-100页
   ·加热温度和时间对黄鲫蛋白抗菌肽自由基清除能力影响第97-98页
   ·褐变指数第98页
   ·游离氨基酸测定第98页
   ·氨基酸组成分析第98页
   ·黄鲫蛋白抗菌肽及其热处理产物的分子量分布第98-99页
   ·体外抗氧化能力第99页
     ·DPPH 自由基清除能力第99页
     ·羟自由基清除能力第99页
     ·金属螯合能力第99页
     ·还原力第99页
   ·数据统计分析第99-100页
 3 结果与分析第100-108页
   ·加热温度和时间对黄鲫蛋白抗菌肽自由基清除率影响第100-101页
   ·黄鲫蛋白抗菌肽加热产物的褐变指数与DPPH 自由基清除能力关系第101页
   ·氨基酸分析第101-104页
   ·黄鲫蛋白抗菌肽热处理产物的分子量分布第104-105页
   ·热处理产物体外抗氧化作用第105-108页
     ·体外清除DPPH 自由基能力第105-106页
     ·体外清除羟自由基能力第106页
     ·体外还原能力第106-107页
     ·金属螯合能力第107-108页
 4 讨论第108-109页
 5 小结第109-110页
第六章 黄鲫蛋白抗菌肽及热处理产物的抗肿瘤作用第110-119页
 引言第110页
 1 材料第110-111页
   ·实验材料第110页
   ·主要试剂第110-111页
   ·主要仪器设备第111页
 2 实验方法第111-113页
   ·细胞培养第111页
   ·抗肿瘤细胞活性(MTT 法)第111-112页
   ·形态学观察和HE 染色第112-113页
   ·数据统计分析第113页
 3 结果与分析第113-117页
   ·黄鲫蛋白抗菌肽及热处理产物对肿瘤细胞株的抑制指数第113-114页
   ·黄鲫蛋白抗菌肽及热处理产物对前列腺癌DU-145 细胞形态影响第114-116页
   ·HE 染色第116-117页
 4 讨论第117-118页
 5 小结第118-119页
全文总结第119-120页
参考文献第120-138页
致谢第138-139页
发表的学术论文第139页

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