摘要 | 第5-6页 |
ABSTRACT | 第6页 |
第一章 文献综述 | 第9-20页 |
1.1 酒香酵母属的分类 | 第9页 |
1.2 布鲁塞尔酒香酵母相关特性 | 第9-11页 |
1.3 布鲁塞尔酒香酵母的鉴定和检测 | 第11-16页 |
1.3.1 选择性培养基鉴定检测方法的发展 | 第12-13页 |
1.3.2 基于分子生物学技术建立的鉴定检测方法 | 第13-16页 |
1.3.2.1 PCR-RFLP | 第13页 |
1.3.2.2 26S rRNA基因D1-D2区测序 | 第13-14页 |
1.3.2.3 基于特异性引物PCR扩增 | 第14页 |
1.3.2.4 DNA探针以及斑点杂交等技术 | 第14-15页 |
1.3.2.5 实时定量PCR | 第15-16页 |
1.3.2.6 其它鉴定检测技术 | 第16页 |
1.4 布鲁塞尔酒香酵母基因多样性研究 | 第16-17页 |
1.5 布鲁塞尔酒香酵母的防治 | 第17-19页 |
1.6 本研究的内容和意义 | 第19-20页 |
第二章 材料和方法 | 第20-28页 |
2.1 材料和仪器 | 第20-22页 |
2.1.1 试验酒样 | 第20页 |
2.1.2 对照菌株 | 第20-21页 |
2.1.3 试剂 | 第21页 |
2.1.4 主要仪器及设备 | 第21-22页 |
2.2 试验方法 | 第22-28页 |
2.2.1 布鲁塞尔酒香酵母分离鉴定方法的建立 | 第22-23页 |
2.2.1.1 酒样预处理 | 第22页 |
2.2.1.2 两种鉴别培养基比较 | 第22页 |
2.2.1.3 提取基因组DNA | 第22页 |
2.2.1.4 特异引物PCR扩增鉴定 | 第22-23页 |
2.2.1.5 26S rRNA基因D1-D2区测序验证 | 第23页 |
2.2.2 环介导等温扩增快速检测布鲁塞尔酒香酵母方法的建立 | 第23-26页 |
2.2.2.1 LAMP引物设计 | 第24页 |
2.2.2.2 LAMP反应体系的建立和优化 | 第24-25页 |
2.2.2.3 LAMP扩增产物的分析 | 第25-26页 |
2.2.2.4 LAMP引物特异性检测 | 第26页 |
2.2.2.5 LAMP敏感性试验 | 第26页 |
2.2.3 我国不同产区葡萄酒中布鲁塞尔酒香酵母的检测鉴定 | 第26页 |
2.2.4 不同产区布鲁塞尔酒香酵母菌株基因多样性分析 | 第26-28页 |
2.2.4.1 三种基因图谱方法的比较 | 第26-27页 |
2.2.4.2 布鲁塞尔酒香酵母基因多样性分析 | 第27-28页 |
第三章 结果与分析 | 第28-41页 |
3.1 布鲁塞尔酒香酵母分离鉴定方法的建立 | 第28-31页 |
3.1.1 两种鉴别培养基的比较 | 第28-29页 |
3.1.2 PCR特异性扩增和 26S rRNA基因D1-D2区测序鉴定 | 第29-31页 |
3.1.2.1 PCR特异性扩增鉴定 | 第29-30页 |
3.1.2.2 26S rRNA基因D1-D2区测序 | 第30-31页 |
3.2 环介导等温扩增快速检测布鲁塞尔酒香酵母方法的建立 | 第31-35页 |
3.2.1 LAMP反应体系的建立和优化 | 第31-33页 |
3.2.2 LAMP扩增产物的分析 | 第33-34页 |
3.2.3 LAMP引物特异性检测 | 第34页 |
3.2.4 LAMP敏感性试验 | 第34-35页 |
3.3 我国不同产区葡萄酒中布鲁塞尔酒香酵母的检测及分离鉴定 | 第35-37页 |
3.4 我国不同产区布鲁塞尔酒香酵母菌株基因多样性分析 | 第37-41页 |
3.4.1 三种基因图谱方法的比较 | 第37-38页 |
3.3.1.1 AP-PCR方法建立 | 第37-38页 |
3.4.1.2 三种指纹图谱方法比较 | 第38页 |
3.4.2 布鲁塞尔酒香酵母基因多样性分析 | 第38-41页 |
第四章 讨论 | 第41-45页 |
4.1 葡萄酒中布鲁塞尔酒香酵母的分离鉴定 | 第41-42页 |
4.2 LAMP法快速检测布鲁塞尔酒香酵母 | 第42-43页 |
4.3 我国葡萄酒中布鲁塞尔酒香酵母的分布 | 第43-45页 |
第五章 结论 | 第45-46页 |
参考文献 | 第46-52页 |
致谢 | 第52-53页 |
作者简介 | 第53页 |