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梨酒酵母工程菌的构建及SO2天然替代物的研究

摘要第1-8页
ABSTRACT第8-17页
1 绪论第17-37页
   ·课题的研究目的和意义第17-22页
     ·果酒的起源及发展第17-18页
     ·果酒的营养及保健第18页
     ·发展果酒的意义第18-19页
     ·果酒行业的发展现状及前景第19-20页
     ·梨生产和加工的状况第20-21页
     ·研发梨酒的必要性及梨酒生产的概括第21-22页
   ·SO_2在果酒中的作用及替代的必要性第22-23页
     ·SO_2在果酒中的作用第22-23页
     ·替代 SO_2的必要性第23页
   ·替代 SO_2方法的研究进展第23-30页
     ·替代 SO_2的化学方法第23-29页
     ·替代 SO_2的发酵方法第29-30页
     ·替代 SO_2的物理方法第30页
   ·原生质体融合技术的简介第30-34页
     ·原生质体融合技术的定义第30页
     ·原生质体融合技术的起源与发展第30-31页
     ·原生质体融合技术的步骤及操作要点第31-33页
     ·原生质体融合技术在酵母工程菌构建中的应用第33-34页
   ·果酒香气成分的研究概括第34-35页
   ·酿酒酵母与其他菌种混合发酵在果酒酿造过程中的应用第35-37页
     ·酵母对乳酸菌的抑制和促进作用第35-36页
     ·酿造工艺对乳酸菌的影响第36页
     ·乳酸菌对酵母的抑制作用第36-37页
2 梨酒酵母的筛选及鉴定第37-49页
   ·引言第37页
   ·实验部分第37-39页
     ·样品采集第37页
     ·梨汁制备第37页
     ·菌株及培养基第37-38页
     ·主要仪器设备第38页
     ·酵母的分离第38页
     ·酵母的筛选第38-39页
     ·入选菌株的生长及生物学特性第39页
     ·酵母 YDJ05 和 YS03 的 26S rDNA D1/D2 区序列分析第39页
   ·结果与分析第39-48页
     ·梨酒酵母的分离结果第39-40页
     ·梨酒酵母的一级筛选第40页
     ·杜氏发酵管二级筛选第40-42页
     ·三角瓶发酵三级筛选第42-44页
     ·入选菌株的生长和生物学特性第44-47页
     ·YDJ05 和 YS03 的 26S rDNA D1/D2 区序列的鉴定结果第47-48页
   ·本章小节第48-49页
3 利用原生质体融合技术构建梨酒酵母工程菌第49-59页
   ·引言第49页
   ·实验部分第49-53页
     ·实验材料第49页
     ·培养基第49-50页
     ·主要试剂及溶液配制第50页
     ·主要仪器第50-51页
     ·原生质体融合技术路线第51页
     ·亲本菌株 Y 营养缺陷型遗传标记的确定第51-52页
     ·菌株 X 和 Y 原生质体制备与再生第52-53页
     ·亲本菌株 X 原生质体灭活时间的确定第53页
     ·原生质体融合第53页
     ·融合子的优选第53页
   ·结果与分析第53-58页
     ·亲本菌株 Y 营养缺陷型的筛选结果第53-55页
     ·原生质体的制备与酶处理时间的确定第55-56页
     ·亲本菌株 X 原生质体灭活时间确定第56页
     ·亲本菌株 X 和 Y 的原生质体融合第56页
     ·亲本菌株 X 和 Y 融合子的筛选第56-58页
   ·本章小节第58-59页
4 应用响应面法对梨酒发酵工艺条件的优化第59-74页
   ·引言第59页
   ·实验部分第59-60页
     ·实验材料第59页
     ·主要仪器第59页
     ·培养及分析方法第59页
     ·单因素试验第59-60页
     ·刺激因子优化实验第60页
     ·用 Plackett-Burman 实验筛选影响显著的培养条件第60页
     ·响应面分析法(RSA)优化培养条件第60页
   ·结果与分析第60-73页
     ·单因素实验结果第60-62页
     ·刺激因子的优化结果第62-63页
     ·用 Plackett-Burman 实验筛选显著因素的结果第63-65页
     ·响应面分析法( RSA)优化培养条件的结果第65-73页
   ·本章小节第73-74页
5 梨酒中 SO_2天然替代物的筛选及抗氧化机理的研究第74-95页
   ·引言第74页
   ·实验部分第74-79页
     ·实验材料第74页
     ·主要试剂第74页
     ·主要仪器设备第74页
     ·SO_2抗菌替代物筛选的方法第74-76页
     ·SO_2抗氧化替代物筛选的方法第76-77页
     ·SO_2抗菌与抗氧化替代物综合筛选第77-78页
     ·酿造菌株对 SO_2替代物的适应性第78页
     ·SO_2替代物替代 SO_2程度的定量分析第78页
     ·SO_2替代物抗氧化机理的探讨第78-79页
   ·结果与分析第79-94页
     ·SO_2抗菌替代物的筛选结果第79-84页
     ·SO_2抗氧化替代物的筛选结果第84-87页
     ·SO_2抗菌与抗氧化共同替代物筛选的结果第87-90页
     ·酿造用菌种 Saccharomyces cerevisiae DJ02 对三种中草药组合的适应性结果第90-91页
     ·SO_2替代物替代 SO_2程度的定量分析结果第91-92页
     ·SO_2替代物抗氧化机理的分析第92-94页
   ·本章小节第94-95页
6 梨酒香气成分的分析第95-107页
   ·引言第95页
   ·实验部分第95-96页
     ·实验材料第95页
     ·主要仪器第95页
     ·样品制备第95页
     ·色谱条件第95页
     ·质谱条件第95-96页
   ·结果与分析第96-106页
   ·本章小节第106-107页
7 结论第107-110页
   ·主要工作第107-108页
     ·梨酒酵母的筛选及鉴定第107页
     ·利用原生质体融合技术构建梨酒酵母工程菌第107页
     ·应用响应面法对梨酒发酵工艺条件的优化第107页
     ·梨酒中 SO_2天然替代物的筛选及抗氧化机理的研究第107-108页
     ·梨酒香气成分的分析第108页
   ·创新点第108-109页
   ·进一步工作第109-110页
致谢第110-111页
参考文献第111-124页
攻读学位期间发表的学术论文目录第124-125页

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