| 致谢 | 第7-8页 |
| 摘要 | 第8-9页 |
| abstract | 第9-10页 |
| 第一章 绪论 | 第17-26页 |
| 1.1 黄酒概述 | 第17页 |
| 1.1.1 黄酒营养价值及发展现状 | 第17页 |
| 1.1.2 黄酒面临的食品安全问题 | 第17页 |
| 1.2 氨基甲酸乙酯概述 | 第17-21页 |
| 1.2.1 氨基甲酸乙酯的性质与致癌性 | 第17-18页 |
| 1.2.2 发酵酒和食品中的EC问题 | 第18-19页 |
| 1.2.3 饮料酒精中EC的形成途径 | 第19-21页 |
| 1.3 酸性脲酶概述 | 第21-24页 |
| 1.3.1 国内外研究进展 | 第22-24页 |
| 1.4 研究目的及内容 | 第24-26页 |
| 1.4.1 关键技术问题 | 第24页 |
| 1.4.2 研究目的 | 第24页 |
| 1.4.3 立题意义 | 第24页 |
| 1.4.4 研究内容 | 第24-26页 |
| 第二章 高产酸性脲酶菌株的筛选 | 第26-36页 |
| 2.1 材料与仪器 | 第26-27页 |
| 2.1.1 样品来源 | 第26页 |
| 2.1.2 培养基配制(g/100mL) | 第26-27页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第27页 |
| 2.1.4 实验仪器与设备 | 第27页 |
| 2.2 实验内容及方法 | 第27-30页 |
| 2.2.1 脲酶活力测定 | 第27-29页 |
| 2.2.2 产酶菌株的筛选 | 第29页 |
| 2.2.3 粗酶液的提取 | 第29-30页 |
| 2.2.4 菌株的形态特征观察及生理生化鉴定 | 第30页 |
| 2.2.5 菌株的基因测序及分子生物学鉴定 | 第30页 |
| 2.3 结果与分析 | 第30-35页 |
| 2.3.1 菌株筛选结果 | 第30-31页 |
| 2.3.2 菌株HFUTY-08的鉴定结果 | 第31-35页 |
| 2.4 小结 | 第35-36页 |
| 第三章 菌株发酵产酶条件及提酶条件的优化 | 第36-49页 |
| 3.1 材料与仪器 | 第36-37页 |
| 3.1.1 实验材料 | 第36页 |
| 3.1.2 主要试剂 | 第36-37页 |
| 3.1.3 实验仪器与设备 | 第37页 |
| 3.2 实验内容及方法 | 第37-39页 |
| 3.2.1 菌株发酵培养条件的优化 | 第37-39页 |
| 3.2.2 酶的提取条件优化 | 第39页 |
| 3.3 结果与分析 | 第39-48页 |
| 3.3.1 菌株生长曲线测定 | 第39-40页 |
| 3.3.2 碳源对产酶能力的影响 | 第40-41页 |
| 3.3.3 氮源对产酶能力的影响 | 第41-42页 |
| 3.3.4 起始pH对产酶能力的影响 | 第42-43页 |
| 3.3.5 接种量对产酶能力的影响 | 第43-44页 |
| 3.3.6 培养温度对产酶能力的影响 | 第44页 |
| 3.3.7 摇床转速对产酶能力的影响 | 第44-45页 |
| 3.3.8 正交试验 | 第45-47页 |
| 3.3.9 超声功率对提酶能力的影响 | 第47页 |
| 3.3.10 超声时间对提酶能力的影响 | 第47-48页 |
| 3.4 小结 | 第48-49页 |
| 第四章 酸性脲酶的分离纯化及酶学性质的研究 | 第49-65页 |
| 4.1 材料与仪器 | 第49-51页 |
| 4.1.1 实验材料 | 第49页 |
| 4.1.2 主要试剂 | 第49-50页 |
| 4.1.3 实验仪器与设备 | 第50-51页 |
| 4.2 实验内容及方法 | 第51-55页 |
| 4.2.1 酶液中蛋白质含量的测定 | 第51页 |
| 4.2.2 黄酒中尿素去除率的测定 | 第51-52页 |
| 4.2.3 酶的分离纯化 | 第52-54页 |
| 4.2.4 酸性脲酶的酶学性质研究 | 第54-55页 |
| 4.2.5 酶在黄酒中的应用效果初探 | 第55页 |
| 4.3 结果与分析 | 第55-64页 |
| 4.3.1 乙醇分级沉淀 | 第55页 |
| 4.3.2 DEAE-52阴离子交换层析 | 第55-56页 |
| 4.3.3 SuperdexG-200凝胶过滤层析 | 第56-57页 |
| 4.3.4 酸性脲酶纯化结果及SDS-PAGE电泳鉴定 | 第57-58页 |
| 4.3.5 全酶分子量的测定 | 第58-59页 |
| 4.3.6 酶的反应动力学常数测定 | 第59页 |
| 4.3.7 酶的最适温度 | 第59-60页 |
| 4.3.8 酶的最适pH | 第60页 |
| 4.3.9 酶的温度稳定性 | 第60-61页 |
| 4.3.10 酶的pH稳定性 | 第61页 |
| 4.3.11 酶的乙醇耐受性 | 第61-62页 |
| 4.3.12 酶的贮藏稳定性 | 第62页 |
| 4.3.13 酶在黄酒中对尿素的去除率 | 第62-63页 |
| 4.3.14 应用酶前后对黄酒中EC含量的影响 | 第63-64页 |
| 4.4 小结 | 第64-65页 |
| 第五章 结论及展望 | 第65-67页 |
| 5.1 主要结论 | 第65-66页 |
| 5.2 展望 | 第66-67页 |
| 参考文献 | 第67-74页 |
| 攻读硕士学位期间的学术活动及成果情况 | 第74-75页 |