| 中文摘要 | 第1-6页 |
| abstract | 第6-14页 |
| 第一章 绪论 | 第14-22页 |
| ·选题背景 | 第14页 |
| ·果胶质的研究现状 | 第14-15页 |
| ·果胶质的分布 | 第14页 |
| ·果胶质的分类 | 第14-15页 |
| ·果胶酶的研究现状 | 第15-16页 |
| ·果胶酶的分类 | 第15-16页 |
| ·微生物果胶酶工业化生产现状 | 第16页 |
| ·烟梗原料利用研究现状 | 第16-17页 |
| ·烟梗果胶质降解研究现状 | 第17-18页 |
| ·课题研究内容和意义 | 第18-20页 |
| ·课题的研究内容 | 第18-19页 |
| ·课题的研究意义 | 第19-20页 |
| ·工艺流程和技术路线 | 第20-22页 |
| 第二章 烟草果胶质降解菌的筛选、鉴定及形态观察 | 第22-38页 |
| ·材料与仪器设备 | 第22-23页 |
| ·实验材料 | 第22页 |
| ·实验试剂 | 第22-23页 |
| ·仪器与设备 | 第23页 |
| ·实验方法 | 第23-25页 |
| ·果胶酶生产菌的分离及菌落形态特征 | 第23页 |
| ·果胶酶总活力测定方法 | 第23-24页 |
| ·菌丝体培养与收集 | 第24页 |
| ·DNA的提取 | 第24页 |
| ·DNA质量检测 | 第24页 |
| ·PCR扩增 | 第24页 |
| ·PCR产物电泳检测 | 第24页 |
| ·ITS序列测定及系统发育分析 | 第24-25页 |
| ·最适培养时间的确定及形态学观察 | 第25页 |
| ·结果与讨论 | 第25-36页 |
| ·高产果胶酶的真菌筛选及形态观察 | 第25-26页 |
| ·18SrDNA的序列测定 | 第26-27页 |
| ·系统发育分析 | 第27-30页 |
| ·最适培养时间的确定及形态学观察 | 第30-32页 |
| ·形态学观察 | 第32-36页 |
| ·本章小结 | 第36-38页 |
| 第三章 优选菌株产胞外果胶酶的液体培养条件优化 | 第38-48页 |
| ·材料、试剂与仪器 | 第38-39页 |
| ·实验材料 | 第38页 |
| ·实验试剂 | 第38-39页 |
| ·仪器设备 | 第39页 |
| ·实验方法 | 第39-40页 |
| ·种子液制备 | 第39页 |
| ·摇瓶发酵培养、菌丝干重测定及粗酶提取 | 第39页 |
| ·酶活力测定方法 | 第39页 |
| ·单因素液体发酵条件的优化 | 第39-40页 |
| ·中心组合设计（Central Compostie Design） | 第40页 |
| ·正交试验设计 | 第40页 |
| ·结果与讨论 | 第40-47页 |
| ·半乳糖醛酸标准曲线 | 第40页 |
| ·黑曲霉液体发酵培养条件的优化 | 第40-44页 |
| ·验证试验 | 第44-45页 |
| ·微紫青霉液体发酵培养条件的优化 | 第45-47页 |
| ·本章小结 | 第47-48页 |
| 第四章 酶的纯化及酶特性研究 | 第48-58页 |
| ·材料与仪器设备 | 第48页 |
| ·实验材料 | 第48页 |
| ·实验试剂 | 第48页 |
| ·仪器设备 | 第48页 |
| ·实验方法 | 第48-49页 |
| ·纯化 | 第48-49页 |
| ·纯化物的鉴定 | 第49页 |
| ·粗酶液酶学特性研究 | 第49页 |
| ·米氏常数(Km)和最大反应速度(Vmax)的测定 | 第49页 |
| ·结果与讨论 | 第49-56页 |
| ·(NH_4)_2SO_4 分级沉淀预实验 | 第49-51页 |
| ·黑曲霉产果胶酶的纯化 | 第51页 |
| ·微紫青霉产果胶酶的纯化 | 第51-52页 |
| ·SDS-PAGE电泳结果 | 第52-53页 |
| ·黑曲霉产果胶酶酶学特性 | 第53-54页 |
| ·微紫青霉产果胶酶酶学特性 | 第54-55页 |
| ·果胶酶催化果胶底物水解反应的动力学参数 | 第55-56页 |
| ·本章小结 | 第56-58页 |
| 第五章 薄片生产线中果胶质生物降解条件优化 | 第58-76页 |
| ·材料与仪器设备 | 第58-59页 |
| ·试验材料 | 第58-59页 |
| ·实验试剂 | 第59页 |
| ·仪器设备 | 第59页 |
| ·实验方法 | 第59-61页 |
| ·单因素实验 | 第59页 |
| ·正交试验优化 | 第59-60页 |
| ·果胶质含量测定方法 | 第60页 |
| ·咔唑比色法标准曲线的绘制 | 第60页 |
| ·感官评价实验 | 第60-61页 |
| ·结果与讨论 | 第61-74页 |
| ·咔唑的标准曲线 | 第61页 |
| ·单因素实验 | 第61-66页 |
| ·正交试验优化 | 第66-74页 |
| ·感官评析实验结果 | 第74页 |
| ·本章小结 | 第74-76页 |
| 第六章 解纤梗果胶质降解理化性质研究 | 第76-90页 |
| ·材料与仪器设备 | 第76页 |
| ·试验材料 | 第76页 |
| ·实验试剂 | 第76页 |
| ·仪器设备 | 第76页 |
| ·实验方法 | 第76-78页 |
| ·热重分析 | 第76页 |
| ·热裂解产物的测定 | 第76-77页 |
| ·解纤梗中果胶酶解前后的红外光谱分析 | 第77页 |
| ·GC-MS测定单糖组分分析 | 第77页 |
| ·凝胶过滤法测定酶解前后果胶的相对分子量 | 第77-78页 |
| ·SEC-MALLS测定酶解前后果胶的绝对分子量 | 第78页 |
| ·结果与讨论 | 第78-87页 |
| ·热失重实验 | 第78-79页 |
| ·二级解纤纯梗酶解前后热裂解产物的测定 | 第79-82页 |
| ·红外光谱分析 | 第82-83页 |
| ·GC-MS分析 | 第83-85页 |
| ·酶解前后相对分子量测定 | 第85-86页 |
| ·酶解前后SEC-MALLS绝对分子量测定 | 第86-87页 |
| ·本章小结 | 第87-90页 |
| 第七章 基因工程菌构建及应用 | 第90-100页 |
| ·材料与仪器设备 | 第90页 |
| ·试验材料 | 第90页 |
| ·实验试剂 | 第90页 |
| ·仪器设备 | 第90页 |
| ·实验方法 | 第90-94页 |
| ·黑曲霉聚半乳糖醛酸酶总RNA的提取 | 第90-91页 |
| ·黑曲霉聚半乳糖醛酸酶表达载体的构建 | 第91-93页 |
| ·X33/PPICZαA-PG酶活力表达及生长曲线确定 | 第93页 |
| ·融合蛋白的纯化 | 第93-94页 |
| ·蛋白纯化后浓度测定 | 第94页 |
| ·在线应用研究 | 第94页 |
| ·结果与讨论 | 第94-99页 |
| ·黑曲霉聚半乳糖醛酸酶的表达载体构建 | 第94-96页 |
| ·阳性克隆菌X33/PPICZαA-PG酶活力表达及生长周期确定 | 第96页 |
| ·阳性克隆菌X33/PPICZαA-PG蛋白表达SDS-PAGE检测 | 第96-97页 |
| ·融合蛋白的纯化 | 第97-98页 |
| ·蛋白纯化后浓度测定 | 第98页 |
| ·在线应用 | 第98-99页 |
| ·本章小结 | 第99-100页 |
| 第八章 结论与展望 | 第100-104页 |
| ·结论 | 第100-103页 |
| ·烟草果胶质降解菌筛选与鉴定结果 | 第100页 |
| ·优选菌株液体培养优化结果 | 第100-101页 |
| ·果胶酶纯化、酶学性质研究结论 | 第101页 |
| ·果胶质微生物降解条件优化结果 | 第101-102页 |
| ·解纤梗果胶质降解后理化性质的变化结果 | 第102-103页 |
| ·构建重组菌株 | 第103页 |
| ·展望 | 第103-104页 |
| 致谢 | 第104-106页 |
| 参考文献 | 第106-116页 |
| 附录1 攻读硕士学位期间发表论文目录 | 第116-118页 |
| 附录2 黑曲霉SW06 基因序列及GenBank登录号 | 第118-120页 |
| 附录3 微紫青霉SW09 基因序列及GenBank登录号 | 第120-122页 |
| 附录4 黑曲霉SW09 PG酶基因序列及氨基酸序列 | 第122-124页 |
