中文摘要 | 第1-6页 |
abstract | 第6-10页 |
第一章 绪论 | 第10-20页 |
·肺癌与吸烟的关系 | 第10页 |
·烟草制品中致癌物 | 第10-11页 |
·烟草特有亚硝胺(TSNAs)简介 | 第11-13页 |
·TSNAs的形成 | 第11-12页 |
·TSNAs的危害 | 第12页 |
·TSNAs的检测方法 | 第12-13页 |
·NNK的致癌机制 | 第13-18页 |
·NNK的代谢 | 第13-16页 |
·NNK在体内的加合物 | 第16-17页 |
·NNK诱导的肺癌基因突变 | 第17-18页 |
·课题研究的内容和意义 | 第18-20页 |
·课题的研究内容 | 第18页 |
·课题的研究意义 | 第18-20页 |
第二章 NNK对细胞的增殖抑制作用研究 | 第20-33页 |
·材料 | 第20-22页 |
·细胞株 | 第20-21页 |
·主要仪器 | 第21页 |
·主要试剂 | 第21-22页 |
·常用试剂的配制 | 第22页 |
·方法 | 第22-24页 |
·细胞培养 | 第22-23页 |
·细胞接种浓度的确定 | 第23页 |
·NNK处理细胞 | 第23页 |
·形态学观察 | 第23页 |
·MTT法检测NNK对V79 和NCTC 1469细胞的增殖抑制作用 | 第23-24页 |
·半数抑制浓度 IC_50的确定 | 第24页 |
·统计学方法 | 第24页 |
·结果与讨论 | 第24-32页 |
·细胞接种浓度的确定 | 第24-26页 |
·NNK对V79 和NCTC 1469 细胞形态的影响 | 第26页 |
·NNK对V79 和NCTC 1469 细胞的增殖抑制作用 | 第26-31页 |
·培养 24h NNK对V79 和NCTC 1469 细胞增殖抑制回归方程式 22 | 第31-32页 |
·本章小结 | 第32-33页 |
第三章 NNK对细胞凋亡和周期的影响 | 第33-45页 |
·材料 | 第33页 |
·细胞株 | 第33页 |
·主要仪器 | 第33页 |
·主要试剂 | 第33页 |
·常用试剂的配置 | 第33-34页 |
·方法 | 第34-36页 |
·细胞培养 | 第34页 |
·细胞核形态学观察 | 第34页 |
·Annexin V-FITC/PI法检测NNK对V79 和NCTC 1469 细胞凋亡的影响 | 第34-35页 |
·PI单染法检测NNK对V79 和NCTC 1469 细胞周期的影响 | 第35-36页 |
·结果与讨论 | 第36-44页 |
·细胞核形态学变化 | 第36-37页 |
·流式细胞仪检测细胞凋亡变化 | 第37-39页 |
·流式细胞仪检测细胞周期变化 | 第39-44页 |
·本章小结 | 第44-45页 |
第四章 NNK对细胞抗氧化基因和凋亡基因表达的影响 | 第45-57页 |
·材料 | 第45-46页 |
·细胞株 | 第45页 |
·主要仪器 | 第45页 |
·主要试剂 | 第45-46页 |
·常用试剂的配置 | 第46页 |
·方法 | 第46-50页 |
·细胞培养 | 第46页 |
·总RNA提取 | 第46-47页 |
·产物检测 | 第47-48页 |
·逆转录反应 | 第48页 |
·Real-Time PCR | 第48-49页 |
·统计学方法 | 第49-50页 |
·结果与讨论 | 第50-56页 |
·V79 和NCTC 1469 细胞总RNA的质量检测 | 第50页 |
·荧光定量PCR方法的特异性试验结果 | 第50-53页 |
·GCLC、Nrf2 和Bax、Bcl-2 基因的相对表达量 | 第53-56页 |
·本章小结 | 第56-57页 |
第五章 结论与展望 | 第57-60页 |
·结论 | 第57-58页 |
·展望 | 第58-60页 |
致谢 | 第60-61页 |
参考文献 | 第61-73页 |
附录 | 第73页 |