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以斑马鱼为模型筛选高黏附性乳酸菌及其免疫调节作用的研究

摘要第1-6页
ABSTRACT第6-12页
第1章 前言第12-30页
   ·乳酸菌免疫调节作用第12-25页
     ·乳酸菌的定义和分类第12-13页
     ·乳酸菌的黏附作用研究进展第13-17页
       ·乳酸菌黏附的生物学效应第13-15页
       ·乳酸菌黏附评价模型的发展第15-16页
       ·乳酸菌在鱼类肠道中的黏附第16-17页
     ·乳酸菌在调节肠道免疫中的作用第17-24页
       ·肠道黏膜免疫系统第17-20页
       ·乳酸菌对肠粘膜免疫的调节及保护作用第20-24页
     ·乳酸菌黏附和免疫调节作用之间的关系第24-25页
   ·以斑马鱼为模式动物的免疫学研究进展第25-28页
     ·斑马鱼的免疫系统第25-27页
       ·免疫器官第25-26页
       ·固有免疫系统第26页
       ·适应性免疫系统第26-27页
     ·斑马鱼免疫学研究方法第27-28页
       ·PCR技术第27页
       ·基因芯片筛选技术第27页
       ·诱导突变第27-28页
       ·荧光标记技术第28页
       ·流式细胞技术第28页
       ·显微观测技术第28页
   ·本研究的目的、内容和意义第28-30页
     ·研究的目的及意义第28-29页
     ·研究的技术路线第29-30页
第2章 不同乳酸菌菌株在斑马鱼肠道黏附强弱的比较研究第30-42页
   ·前言第30页
   ·实验材料与方法第30-35页
     ·实验菌株及实验动物第31页
     ·菌种培养基及常用溶液的配置第31-32页
     ·主要仪器设备第32页
     ·实验方法第32-35页
       ·饲料制备第32页
       ·菌种培养及实验分组设计第32-33页
       ·乳酸菌生物膜形成的检测第33-34页
       ·FITC荧光染色乳酸菌浸浴斑马鱼第34页
       ·平板培养法对肠道乳酸菌的定植分析第34-35页
       ·斑马鱼的肠道取样第35页
       ·数据处理第35页
   ·结果与分析第35-39页
     ·乳酸菌生物膜形成的检测第35-37页
     ·FITC染色的五种乳酸菌在斑马鱼肠道中的定植情况第37-39页
     ·平板培养法对肠道乳酸菌的定植分析第39页
   ·讨论第39-40页
   ·本章小结第40-42页
第3章 不同乳酸菌菌株对斑马鱼肠道黏膜屏障的保护作用比较研究第42-58页
   ·前言第42页
   ·实验材料与方法第42-48页
     ·实验菌株及实验动物第42-43页
     ·菌种培养基的配置及主要试剂第43页
     ·主要仪器设备第43-44页
     ·实验方法第44-48页
       ·饲料的制备第44页
       ·菌种培养第44页
       ·模型建立第44页
       ·取材及标本处理第44-45页
       ·HE染色观察斑马鱼肠道形态学的变化第45-46页
       ·PAS反应显示中性粘多糖第46-47页
       ·后肠中肥大细胞的数目第47页
       ·后肠中上皮内淋巴细胞(IELS)的百分比第47-48页
   ·结果与分析第48-54页
     ·斑马鱼后肠的形态学观察第48-50页
     ·PAS反应显示粘液细胞第50-51页
     ·后肠中肥大细胞的形态学观察和数目第51-52页
     ·肠上皮内淋巴细胞的观察和计数第52-54页
   ·讨论第54-56页
   ·本章小结第56-58页
第4章 体内外模型评价不同乳酸菌对斑马鱼细胞因子和肠道免疫的调控第58-72页
   ·前言第58页
   ·实验材料与方法第58-63页
     ·实验菌株、实验动物及细胞系第58-59页
     ·菌种培养基的配置及主要试剂第59页
     ·主要仪器设备第59-60页
     ·实验方法第60-63页
       ·饲料的制备第60页
       ·菌种培养及实验分组设计第60页
       ·斑马鱼的肠道取样第60页
       ·乳酸菌对斑马鱼肠道细胞因子基因表达量的影响第60-62页
       ·乳酸菌对斑马鱼免疫力的影响第62页
       ·攻毒后肠道中细胞因子的表达第62页
       ·细胞培养第62-63页
       ·荧光定量PCR检测斑马鱼ZF-4细胞系中表达的细胞因子第63页
       ·A.hydrophila NJ-1诱导不同处理组细胞的细胞凋亡实验分析第63页
   ·结果与分析第63-69页
     ·乳酸菌与斑马鱼体内的实验分析第64-68页
       ·肠道组织中三种细胞因子表达量的变化第64-66页
       ·乳酸菌对斑马鱼抗病性的影响第66页
       ·攻毒后斑马鱼肠道细胞因子表达量的变化第66-68页
     ·乳酸菌对ZF-4细胞互做实验第68-69页
       ·荧光定量PCR检测ZF-4细胞中表达的细胞因子第68-69页
       ·乳酸菌与细胞互作细胞凋亡实验第69页
   ·讨论第69-71页
   ·本章小结第71-72页
第5章 总结论、创新点及研究展望第72-74页
   ·总结论第72-73页
   ·创新点第73页
   ·研究展望第73-74页
参考文献第74-84页
附录 硕士期间完成的论文第84-86页
致谢第86-88页

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