紫外诱变及电融合法构建赤藓糖醇高产菌株的研究
| 中文摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 第一章 前言 | 第11-13页 |
| ·赤藓糖醇生产方法 | 第11页 |
| ·生物抽提法 | 第11页 |
| ·化学合成法 | 第11页 |
| ·微生物发酵法 | 第11页 |
| ·赤藓糖醇生产菌研究进展 | 第11-12页 |
| ·本研究的意义 | 第12-13页 |
| 第二章 材料和方法 | 第13-20页 |
| ·实验材料 | 第13-15页 |
| ·菌株 | 第13页 |
| ·试剂 | 第13页 |
| ·标准品 | 第13-14页 |
| ·培养基 | 第14页 |
| ·仪器设备 | 第14-15页 |
| ·实验方法 | 第15-20页 |
| ·从样本中分离高渗透性酵母菌 | 第15页 |
| ·培养方法 | 第15页 |
| ·发酵方法 | 第15页 |
| ·菌种初筛 | 第15-16页 |
| ·菌种复筛 | 第16页 |
| ·紫外诱变处理 | 第16页 |
| ·原生质体电融合 | 第16-18页 |
| ·菌体前处理 | 第16-17页 |
| ·生长曲线的测定 | 第17页 |
| ·菌体前培养 | 第17页 |
| ·总菌数的测定 | 第17页 |
| ·原生质体制备 | 第17页 |
| ·原生质体形成率和再生率的测定 | 第17-18页 |
| ·电场诱导原生质体融合 | 第18页 |
| ·融合子检出 | 第18页 |
| ·检测分析 | 第18-20页 |
| ·残余葡萄糖含量测定 | 第18-19页 |
| ·赤藓糖醇定性 | 第19页 |
| ·赤藓糖醇定量 | 第19-20页 |
| 第三章 结果与分析 | 第20-44页 |
| ·耐高渗酵母产赤藓糖醇菌株 | 第20-21页 |
| ·发酵液中赤藓糖醇分析方法的确定 | 第21-25页 |
| ·点样量确定 | 第21页 |
| ·展开方法的确定 | 第21-22页 |
| ·展开剂选择 | 第22页 |
| ·混合样品的分离 | 第22-23页 |
| ·赤藓糖醇标准板的制备 | 第23页 |
| ·赤藓糖醇含量测定 | 第23-24页 |
| ·残余葡萄糖含量的测定 | 第24-25页 |
| ·紫外诱变条件试验 | 第25-27页 |
| ·诱变出发菌株的确定 | 第25-26页 |
| ·紫外诱变条件的确定 | 第26页 |
| ·诱变高产菌株的筛选 | 第26-27页 |
| ·融合条件的确定 | 第27-39页 |
| ·对数生长期的确定 | 第27页 |
| ·原生质体制备的研究 | 第27-35页 |
| ·酶的作用浓度 | 第28-29页 |
| ·酶的作用时间 | 第29-31页 |
| ·酶的作用温度 | 第31页 |
| ·酶的作用pH值 | 第31-32页 |
| ·0.1％β巯基乙醇对酶解的影响 | 第32-33页 |
| ·同步处理对原生质体形成率的影响 | 第33-34页 |
| ·渗透压稳定剂对原生质体形成率及再生率的影响 | 第34-35页 |
| ·电融合参数的确定 | 第35-39页 |
| ·参数的初步选定 | 第36页 |
| ·交变电场强度的确定 | 第36-37页 |
| ·脉冲场强的确定 | 第37-38页 |
| ·脉冲时间常数的确定 | 第38页 |
| ·脉冲个数的确定 | 第38-39页 |
| ·高产赤藓糖醇融合菌株的确定 | 第39页 |
| ·RH-UV-L4-F9菌株初步发酵条件试验 | 第39-42页 |
| ·培养基初始PH值对产赤藓糖醇的影响 | 第39-40页 |
| ·培养温度对赤藓糖醇产量的影响 | 第40页 |
| ·发酵时间对赤藓糖醇产量的影响 | 第40-41页 |
| ·不同氮源对发酵赤藓糖醇产量的影响 | 第41页 |
| ·酵母膏、脲的浓度对发酵产赤藓糖醇的影响 | 第41-42页 |
| ·碳源葡萄糖浓度对发酵产赤藓糖醇的影响 | 第42页 |
| ·讨论 | 第42-44页 |
| 第四章 结论 | 第44-45页 |
| 参考文献 | 第45-48页 |
| 附录 | 第48-49页 |
| 致谢 | 第49页 |
