| 符号说明 | 第4-8页 |
| 摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-11页 |
| 1 前言 | 第12-24页 |
| 1.1 食源性致病菌与食品安全 | 第12-13页 |
| 1.2 食源性致病菌简介 | 第13-19页 |
| 1.2.1 沙门氏菌 | 第13-15页 |
| 1.2.1.1 沙门氏菌简介 | 第13-14页 |
| 1.2.1.2 沙门氏菌毒力因子简介 | 第14-15页 |
| 1.2.2 单增李斯特菌 | 第15-17页 |
| 1.2.2.1 单增李斯特菌简介 | 第15页 |
| 1.2.2.2 单增李斯特菌的主要毒力因子 | 第15-17页 |
| 1.2.3 大肠杆菌O157：H7 | 第17-19页 |
| 1.2.3.1 大肠杆菌O157：H7简介 | 第17-18页 |
| 1.2.3.2 大肠杆菌O157：H7毒力因子 | 第18-19页 |
| 1.3 致病微生物快速检测技术的研究现状 | 第19-23页 |
| 1.3.1 以免疫学为基础的检测方法 | 第19-21页 |
| 1.3.1.1 免疫磁性分离法 | 第19-20页 |
| 1.3.1.2 酶联免疫吸附(ELISA)法 | 第20页 |
| 1.3.1.3 免疫胶体金 | 第20-21页 |
| 1.3.2 分子生物学检测技术 | 第21-23页 |
| 1.3.2.1 基因芯片技术 | 第21页 |
| 1.3.2.2 聚合酶链式反应(PCR) | 第21-23页 |
| 1.3.2.2.1 荧光定量PCR | 第22页 |
| 1.3.2.2.2 多重PCR检测技术 | 第22-23页 |
| 1.4 本研究的目的及意义 | 第23-24页 |
| 2 材料和方法 | 第24-33页 |
| 2.1 试验材料 | 第24-26页 |
| 2.1.1 菌株 | 第24页 |
| 2.1.2 仪器与设备 | 第24-25页 |
| 2.1.3 主要培养基和试剂 | 第25-26页 |
| 2.2 试验方法 | 第26-33页 |
| 2.2.1 菌株培养 | 第26页 |
| 2.2.2 菌体DNA的提取 | 第26-28页 |
| 2.2.3 特异性基因的选择及多重PCR引物筛选 | 第28页 |
| 2.2.4 多重PCR体系优化 | 第28-29页 |
| 2.2.5 多重PCR反应产物检测 | 第29页 |
| 2.2.6 多重PCR特异性检测 | 第29-30页 |
| 2.2.7 多重PCR灵敏度检测 | 第30页 |
| 2.2.8 人工污染牛肉中三种致病菌DNA提取方法比较 | 第30-31页 |
| 2.2.9 不同增菌液对三种致病菌的增菌效果对比 | 第31-32页 |
| 2.2.10 人工污染牛肉的检出限 | 第32页 |
| 2.2.11 实际样品检测 | 第32-33页 |
| 3 结果与分析 | 第33-43页 |
| 3.1 多重PCR反应条件优化 | 第33-35页 |
| 3.2 多重PCR特异性评价 | 第35-36页 |
| 3.3 多重PCR检测菌体灵敏度 | 第36-39页 |
| 3.3.1 多重PCR检测单一致病菌的灵敏度 | 第36页 |
| 3.3.2 多重PCR同时检测三种致病菌的灵敏度 | 第36-39页 |
| 3.4 人工污染牛肉中三种致病菌DNA提取方法比较 | 第39页 |
| 3.5 对比不同增菌培养基的增菌效果 | 第39-40页 |
| 3.6 人工污染牛肉的检出限 | 第40-42页 |
| 3.6.1 多重PCR检测人工污染牛肉中单一致病菌 | 第41-42页 |
| 3.6.2 多重PCR同时检测人工污染牛肉中三种致病菌的检出限 | 第42页 |
| 3.6.3 多重PCR检测经富集培养的人工污染牛肉中三种致病菌的检出限 | 第42页 |
| 3.7 对实际样品的检测 | 第42-43页 |
| 4 讨论 | 第43-47页 |
| 4.1 靶基因的选择与多重PCR反应体系优化 | 第43-45页 |
| 4.2 多重PCR的抑制剂 | 第45页 |
| 4.3 增菌液的选择 | 第45-46页 |
| 4.4 与国标检测方法的比较 | 第46-47页 |
| 5 结论 | 第47-48页 |
| 6 创新点 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-57页 |
| 致谢 | 第57页 |
