| 摘要 | 第4-5页 |
| abstract | 第5页 |
| 前言 | 第9-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-22页 |
| 1.1 虾青素简介 | 第10-15页 |
| 1.1.1 虾青素的价值 | 第10-11页 |
| 1.1.2 虾青素的来源 | 第11-12页 |
| 1.1.3 虾青素天然的生物合成途径 | 第12-15页 |
| 1.2 合成生物学在虾青素生物合成中的应用 | 第15-19页 |
| 1.2.1 合成生物学的发展和应用 | 第15-16页 |
| 1.2.2 合成生物学常用的优化策略 | 第16-18页 |
| 1.2.3 合成生物学在虾青素合成中的研究 | 第18-19页 |
| 1.3 本文研究内容及意义 | 第19-22页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第22-42页 |
| 2.1 实验材料 | 第22-26页 |
| 2.1.1 实验菌株 | 第22页 |
| 2.1.2 实验菌株 | 第22页 |
| 2.1.3 实验仪器 | 第22-23页 |
| 2.1.4 实验试剂 | 第23-25页 |
| 2.1.5 培养基配制 | 第25-26页 |
| 2.2 基因元件的获得 | 第26-30页 |
| 2.2.1 内源基因元件的获得 | 第26-29页 |
| 2.2.2 异源表达模块的获得 | 第29-30页 |
| 2.3 基因操作方法 | 第30-35页 |
| 2.3.1 目的片段的PCR扩增和获得 | 第30-31页 |
| 2.3.2 DNA片段的回收 | 第31页 |
| 2.3.3 酶切反应与纯化 | 第31-33页 |
| 2.3.4 DNA片段的连接 | 第33页 |
| 2.3.5 模块克隆系统（Golden Gate） | 第33-34页 |
| 2.3.6 环式聚合酶延伸克隆（CPEC） | 第34-35页 |
| 2.4 大肠杆菌转化与筛选 | 第35-38页 |
| 2.4.1 大肠杆菌宿主转化 | 第35-36页 |
| 2.4.2 转化子的筛选验证 | 第36页 |
| 2.4.3 质粒提取 | 第36-37页 |
| 2.4.4 酶切验证 | 第37-38页 |
| 2.5 酿酒酵母转化与筛选 | 第38-40页 |
| 2.5.1 酿酒酵母转化 | 第38-39页 |
| 2.5.2 酿酒酵母菌落PCR验证 | 第39页 |
| 2.5.3 酿酒酵母基因组提取 | 第39-40页 |
| 2.6 发酵培养与产物提取 | 第40-42页 |
| 2.6.1 96孔细胞培养板发酵与分析 | 第40页 |
| 2.6.2 摇瓶发酵 | 第40页 |
| 2.6.3 产物提取 | 第40-41页 |
| 2.6.4 产物检测 | 第41-42页 |
| 第三章 虾青素前体菌株的构建与优化 | 第42-55页 |
| 3.1 引言 | 第42-43页 |
| 3.2 酿酒酵母功能模块的构建 | 第43-45页 |
| 3.3 δ位点整合β-胡萝卜素合成模块及筛选验证 | 第45-50页 |
| 3.3.1 δ 位点整合β-胡萝卜素合成模块 | 第45-46页 |
| 3.3.2 β-胡萝卜素合成菌株的筛选 | 第46-48页 |
| 3.3.3 β-胡萝卜素合成菌株的发酵 | 第48-50页 |
| 3.4 前体供应的调节 | 第50-55页 |
| 3.4.1 前体供应模块的转化和验证 | 第50-52页 |
| 3.4.2 整合前体供应模块的菌株发酵 | 第52-55页 |
| 第四章 合成虾青素酿酒酵母菌株的构建及优化 | 第55-71页 |
| 4.1 引言 | 第55-56页 |
| 4.2 羟化酶和酮化酶共表达模块的构建 | 第56-61页 |
| 4.2.1 大肠克隆载体羟化酶和酮化酶共表达模块的构建 | 第56-59页 |
| 4.2.2 酵母表达载体上羟化酶和酮化酶共表达模块的构建 | 第59-61页 |
| 4.3 合成虾青素菌株的筛选与发酵 | 第61-67页 |
| 4.3.1 合成虾青素酿酒酵母菌株的筛选 | 第63-64页 |
| 4.3.2 初筛方法可靠性的验证 | 第64-65页 |
| 4.3.3 合成虾青素酿酒酵母菌株的发酵 | 第65-67页 |
| 4.4 合成虾青素菌株表达强度的微调 | 第67-71页 |
| 4.4.1 羟化酶启动子强度的调节 | 第67-69页 |
| 4.4.2 羟化酶-酮化酶融合基因的表达 | 第69-71页 |
| 第五章 虾青素高产酵母菌株的发酵优化 | 第71-75页 |
| 5.1 引言 | 第71页 |
| 5.2 虾青素高产菌株不同初糖浓度发酵 | 第71-75页 |
| 第六章 结论与展望 | 第75-77页 |
| 6.1 结论 | 第75-76页 |
| 6.2 展望 | 第76-77页 |
| 参考文献 | 第77-85页 |
| 发表论文和参加科研情况说明 | 第85-86页 |
| 附录 | 第86-93页 |
| 致谢 | 第93-94页 |
