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采用基因敲除手段降低啤酒酵母蛋白酶A表达的研究

独创性声明第1页
关于学位论文使用授权的说明第2-3页
中文摘要第3-4页
英文摘要第4-7页
第一章 绪论第7-15页
   ·我国啤酒工业的发展概况第7-8页
   ·啤酒泡沫蛋白质的研究第8-9页
   ·蛋白酶 A 的研究第9-13页
     ·蛋白酶A 对啤酒泡沫的影响第9页
     ·啤酒中蛋白酶的来源第9页
     ·酿酒酵母蛋白酶A 的生理生化特点第9-11页
     ·啤酒中蛋白酶A 的测定方法第11-12页
     ·蛋白酶A 的遗传学分析第12-13页
     ·目前关于抑制蛋白酶活性的研究第13页
   ·立体背景第13-14页
   ·课题的研究任务和目标第14-15页
第二章 材料、方法及实验方案第15-33页
   ·仪器、试剂及培养基第15-18页
     ·主要仪器第15-16页
     ·主要试剂第16-17页
     ·培养基第17-18页
   ·菌种及质粒第18页
   ·引物第18-19页
   ·方法第19-32页
     ·玻珠破壁法提酵母菌染色体 DNA第19-20页
     ·大肠杆菌感受态细胞的制备第20-21页
     ·酵母感受态细胞的制备第21页
     ·SDS碱裂解法中量制备质粒 DNA第21-22页
     ·聚乙二醇沉淀法纯化质粒 DNA第22-23页
     ·琼脂糖凝胶电泳第23-24页
     ·质粒(pFA6a‐kanMX)转入大肠杆菌(TOP10)第24页
     ·酵母的高效转化第24-25页
     ·聚合酶链式反应(PCR)第25-26页
     ·新质粒的构建第26-27页
     ·质粒的单酶切第27-28页
     ·羧肽酶 Y 的平板鉴定第28页
     ·啤酒酒精度的测定方法第28-29页
     ·原麦汁浓度的测定第29页
     ·双乙酰的测定第29-30页
     ·真正(实际)发酵度的测定第30页
     ·发酵液中蛋白酶 A 含量的测定第30-31页
     ·气相色谱法测定发酵液风味指标第31-32页
   ·实验方案第32-33页
第三章 结果与讨论第33-48页
   ·突变菌株的验证第33-36页
     ·抗性验证第33页
     ·PCR 产物验证第33-34页
     ·PCR 产物单酶切结果第34-36页
     ·羧肽酶Y的平板鉴定结果第36页
   ·酵母菌种的保藏第36页
   ·酵母新品种的驯化第36-37页
   ·发酵液中蛋白酶A的检测第37-38页
     ·荧光底物法标准曲线第37页
     ·荧光底物法测定结果第37-38页
   ·啤酒泡沫综合指标的测定第38-39页
     ·啤酒的起泡性第38页
     ·啤酒泡沫的持久性第38页
     ·啤酒泡沫附着力第38-39页
   ·酵母突变株抗性遗传稳定性实验第39-40页
   ·发酵过程分析第40-48页
     ·突变株连续发酵对比结果第40-46页
     ·发酵液风味物质的测定第46-48页
第四章 结论与展望第48-50页
参考文献第50-53页
附录第53-56页
作者简历第56-57页
致 谢第57页

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