摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
主要缩略词汇表 | 第11-12页 |
第1章 文献综述 | 第12-18页 |
1.1 猕猴桃果实后熟生理研究概述 | 第12页 |
1.2 内源激素调控猕猴桃果实后熟过程的研究进展 | 第12-14页 |
1.2.1 猕猴桃果实后熟过程乙烯调控研究进展 | 第12-13页 |
1.2.2 猕猴桃果实后熟过程ABA调控研究进展 | 第13-14页 |
1.2.3 猕猴桃果实后熟过程IAA调控研究进展 | 第14页 |
1.3 称猴桃果后熟过程转录因子调控研究进展 | 第14-15页 |
1.4 miRNA对果树后熟调控研究进展 | 第15-18页 |
1.4.1 miRNA的调控方式 | 第15页 |
1.4.2 与激素传导相关的miRNA的研究进展 | 第15-18页 |
第2章 室温下'海沃德'称猴桃后熟过程中乙烯、ACO、ACS变化规律研究 | 第18-26页 |
2.1 材料与设备 | 第18-19页 |
2.1.1 供试材料与试剂 | 第18页 |
2.1.2 试验仪器与设备 | 第18-19页 |
2.1.3 试剂制备 | 第19页 |
2.2 测定方法 | 第19-22页 |
2.2.1 硬度测定 | 第20页 |
2.2.2 可溶性固形物含量测定 | 第20页 |
2.2.3 乙烯含量测定 | 第20页 |
2.2.4 ACO酶活性测定 | 第20-21页 |
2.2.5 ACS酶活性测定 | 第21-22页 |
2.3 结果与分析 | 第22-25页 |
2.3.1 室温下'海沃德'猕猴桃果实硬度的变化 | 第22页 |
2.3.2 室温下'海沃德'猕猴桃可溶性固形物的变化 | 第22-23页 |
2.3.3 室温下'海沃德'猕猴桃果实乙烯释放变化 | 第23页 |
2.3.4 室温下'海沃德'称猴桃果实ACO酶活性变化 | 第23-24页 |
2.3.5 室温下'海沃德'猕猴桃果实ACS酶活性变化 | 第24-25页 |
2.4 结论与讨论 | 第25-26页 |
第3章 室温下'海沃德'猕猴桃后熟相关的miRNA的鉴定 | 第26-44页 |
3.1 材料与方法 | 第26-29页 |
3.1.1 猕猴桃果实材料选取 | 第26页 |
3.1.2 试验仪器、试剂及分析软件 | 第26-27页 |
3.1.3 试验方法 | 第27-29页 |
3.1.3.1 猕猴桃果实miRNA的提取方法 | 第27页 |
3.1.3.2 Small RNA文库的构建 | 第27-28页 |
3.1.3.3 信息分析流程 | 第28-29页 |
3.2 结果与分析 | 第29-43页 |
3.2.1 测序质量 | 第29-30页 |
3.2.2 长度分布 | 第30-32页 |
3.2.3 公共及特有序列 | 第32-33页 |
3.2.4 sRNA的分类注释结果 | 第33-34页 |
3.2.5 已知miRNA和新miRNA的鉴定 | 第34页 |
3.2.6 '海沃德'猕猴桃中miRNA聚类表达模式图 | 第34-36页 |
3.2.7 已知miRNA的靶基因预测 | 第36页 |
3.2.8 已知miRNA的GO功能分析 | 第36-40页 |
3.2.9 '海沃德'猕猴桃果实后熟期表达量较高的miRNA | 第40-41页 |
3.2.10 与内源激素相关的已知miRNA及其靶基因的预测 | 第41-43页 |
3.3 结论与讨论 | 第43-44页 |
第4章 '海沃德'猕猴桃果实后熟相关miRNA表达差异的验证 | 第44-50页 |
4.1 材料与方法 | 第44-47页 |
4.1.1 试验材料 | 第44页 |
4.1.2 试验仪器、试剂 | 第44页 |
4.1.3 试验方法 | 第44-47页 |
4.1.3.1 miRNA反转录 | 第45页 |
4.1.3.2 qRT-PCR | 第45-47页 |
4.2 结果与分析 | 第47-48页 |
4.3 结论与讨论 | 第48-50页 |
第5章 乙烯利、ABA、1-MCP处理对'海沃德'猕猴桃后熟相关的6个miRNA表达差异的影响 | 第50-62页 |
5.1 材料与设备 | 第50-51页 |
5.1.1 材料与试剂 | 第50-51页 |
5.1.2 仪器与设备 | 第51页 |
5.2 试验方法 | 第51-53页 |
5.2.1 猕猴桃的处理 | 第51-52页 |
5.2.1.1 乙烯利和ABA处理 | 第51页 |
5.2.1.2 1-MCP处理 | 第51页 |
5.2.1.3 提取RNA果实的制备 | 第51-52页 |
5.2.2 硬度、可溶性固形物、乙烯测定方法 | 第52页 |
5.2.3 猕猴桃果实总RNA的提取 | 第52-53页 |
5.2.3.1 CTAB缓冲溶液的配置 | 第52页 |
5.2.3.2 操作步骤 | 第52-53页 |
5.2.3.3 CTAB法提取总RNA的质量检测 | 第53页 |
5.2.4 RNA反转录及荧光定量方法 | 第53页 |
5.2.5 试验数据分析 | 第53页 |
5.3 结果与分析 | 第53-58页 |
5.3.1 硬度变化结果 | 第53-54页 |
5.3.2 三种处理对可溶性固形物的影响 | 第54页 |
5.3.3 三种处理下'海沃德'猕猴桃乙烯释规律 | 第54-55页 |
5.3.4 三种处理下与内源激素相关的miRNA表达变化 | 第55-58页 |
5.3.4.1 不同处理下miR162a-3p和mi172c-3p的表达变化 | 第55-56页 |
5.3.4.2 不同处理下miR7545和miR9484的表达变化 | 第56-57页 |
5.3.4.3 不同处理下miR8129和mi5158的表达变化 | 第57-58页 |
5.4 结论与讨论 | 第58-62页 |
5.4.1 miR162a-3p和mi172c-3p表达变化与'海沃德'猕猴桃果实后熟 | 第59页 |
5.4.2 miR7545和miR9484表达变化与'海沃德'猕猴桃果实后熟 | 第59-60页 |
5.4.3 miR8129和mi5158的表达变化与'海沃德'猕猴桃果实后熟 | 第60-62页 |
第6章 miR9484和miR7545的靶基因PYR/PYL、PP2C、ABF在乙烯利、ABA、1-MCP处理下的表达变化 | 第62-70页 |
6.1 材料与设备 | 第62-63页 |
6.1.1 试验材料与试剂 | 第62页 |
6.1.2 仪器与设备 | 第62-63页 |
6.2 试验方法 | 第63-65页 |
6.2.1 称猴桃的处理 | 第63页 |
6.2.2 猕猴桃果实总RNA的提取 | 第63-64页 |
6.2.3 反转录与荧光定量 | 第64-65页 |
6.3 结果与分析 | 第65-67页 |
6.3.1 乙烯利、1-MCP和ABA处理对miR9484的靶基因PP2C及ABF表达的影响 | 第65页 |
6.3.2 乙烯利、1-MCP和ABA处理对miR7545的靶基因PYR/PYL表达的影响 | 第65-67页 |
6.4 结论与讨论 | 第67-70页 |
6.4.1 '海沃德'猕猴桃果实PP2C、ABF及PYR/PYL表达变化与后熟进程 | 第67-68页 |
6.4.2 miR948与miR7545的表达变化靶基因PYR/PYL、PP2C、ABF的表达变化 | 第68-70页 |
第7章 结论、创新点与展望 | 第70-72页 |
7.1 结论 | 第70-71页 |
7.2 创新点 | 第71页 |
7.3 展望 | 第71-72页 |
参考文献 | 第72-80页 |
致谢 | 第80-82页 |
攻读硕士学位期间科研成果 | 第82页 |