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‘海沃德猕猴桃果实后熟相关的miRNA的筛选及表达差异研究

摘要第3-5页
Abstract第5-6页
主要缩略词汇表第11-12页
第1章 文献综述第12-18页
    1.1 猕猴桃果实后熟生理研究概述第12页
    1.2 内源激素调控猕猴桃果实后熟过程的研究进展第12-14页
        1.2.1 猕猴桃果实后熟过程乙烯调控研究进展第12-13页
        1.2.2 猕猴桃果实后熟过程ABA调控研究进展第13-14页
        1.2.3 猕猴桃果实后熟过程IAA调控研究进展第14页
    1.3 称猴桃果后熟过程转录因子调控研究进展第14-15页
    1.4 miRNA对果树后熟调控研究进展第15-18页
        1.4.1 miRNA的调控方式第15页
        1.4.2 与激素传导相关的miRNA的研究进展第15-18页
第2章 室温下'海沃德'称猴桃后熟过程中乙烯、ACO、ACS变化规律研究第18-26页
    2.1 材料与设备第18-19页
        2.1.1 供试材料与试剂第18页
        2.1.2 试验仪器与设备第18-19页
        2.1.3 试剂制备第19页
    2.2 测定方法第19-22页
        2.2.1 硬度测定第20页
        2.2.2 可溶性固形物含量测定第20页
        2.2.3 乙烯含量测定第20页
        2.2.4 ACO酶活性测定第20-21页
        2.2.5 ACS酶活性测定第21-22页
    2.3 结果与分析第22-25页
        2.3.1 室温下'海沃德'猕猴桃果实硬度的变化第22页
        2.3.2 室温下'海沃德'猕猴桃可溶性固形物的变化第22-23页
        2.3.3 室温下'海沃德'猕猴桃果实乙烯释放变化第23页
        2.3.4 室温下'海沃德'称猴桃果实ACO酶活性变化第23-24页
        2.3.5 室温下'海沃德'猕猴桃果实ACS酶活性变化第24-25页
    2.4 结论与讨论第25-26页
第3章 室温下'海沃德'猕猴桃后熟相关的miRNA的鉴定第26-44页
    3.1 材料与方法第26-29页
        3.1.1 猕猴桃果实材料选取第26页
        3.1.2 试验仪器、试剂及分析软件第26-27页
        3.1.3 试验方法第27-29页
            3.1.3.1 猕猴桃果实miRNA的提取方法第27页
            3.1.3.2 Small RNA文库的构建第27-28页
            3.1.3.3 信息分析流程第28-29页
    3.2 结果与分析第29-43页
        3.2.1 测序质量第29-30页
        3.2.2 长度分布第30-32页
        3.2.3 公共及特有序列第32-33页
        3.2.4 sRNA的分类注释结果第33-34页
        3.2.5 已知miRNA和新miRNA的鉴定第34页
        3.2.6 '海沃德'猕猴桃中miRNA聚类表达模式图第34-36页
        3.2.7 已知miRNA的靶基因预测第36页
        3.2.8 已知miRNA的GO功能分析第36-40页
        3.2.9 '海沃德'猕猴桃果实后熟期表达量较高的miRNA第40-41页
        3.2.10 与内源激素相关的已知miRNA及其靶基因的预测第41-43页
    3.3 结论与讨论第43-44页
第4章 '海沃德'猕猴桃果实后熟相关miRNA表达差异的验证第44-50页
    4.1 材料与方法第44-47页
        4.1.1 试验材料第44页
        4.1.2 试验仪器、试剂第44页
        4.1.3 试验方法第44-47页
            4.1.3.1 miRNA反转录第45页
            4.1.3.2 qRT-PCR第45-47页
    4.2 结果与分析第47-48页
    4.3 结论与讨论第48-50页
第5章 乙烯利、ABA、1-MCP处理对'海沃德'猕猴桃后熟相关的6个miRNA表达差异的影响第50-62页
    5.1 材料与设备第50-51页
        5.1.1 材料与试剂第50-51页
        5.1.2 仪器与设备第51页
    5.2 试验方法第51-53页
        5.2.1 猕猴桃的处理第51-52页
            5.2.1.1 乙烯利和ABA处理第51页
            5.2.1.2 1-MCP处理第51页
            5.2.1.3 提取RNA果实的制备第51-52页
        5.2.2 硬度、可溶性固形物、乙烯测定方法第52页
        5.2.3 猕猴桃果实总RNA的提取第52-53页
            5.2.3.1 CTAB缓冲溶液的配置第52页
            5.2.3.2 操作步骤第52-53页
            5.2.3.3 CTAB法提取总RNA的质量检测第53页
        5.2.4 RNA反转录及荧光定量方法第53页
        5.2.5 试验数据分析第53页
    5.3 结果与分析第53-58页
        5.3.1 硬度变化结果第53-54页
        5.3.2 三种处理对可溶性固形物的影响第54页
        5.3.3 三种处理下'海沃德'猕猴桃乙烯释规律第54-55页
        5.3.4 三种处理下与内源激素相关的miRNA表达变化第55-58页
            5.3.4.1 不同处理下miR162a-3p和mi172c-3p的表达变化第55-56页
            5.3.4.2 不同处理下miR7545和miR9484的表达变化第56-57页
            5.3.4.3 不同处理下miR8129和mi5158的表达变化第57-58页
    5.4 结论与讨论第58-62页
        5.4.1 miR162a-3p和mi172c-3p表达变化与'海沃德'猕猴桃果实后熟第59页
        5.4.2 miR7545和miR9484表达变化与'海沃德'猕猴桃果实后熟第59-60页
        5.4.3 miR8129和mi5158的表达变化与'海沃德'猕猴桃果实后熟第60-62页
第6章 miR9484和miR7545的靶基因PYR/PYL、PP2C、ABF在乙烯利、ABA、1-MCP处理下的表达变化第62-70页
    6.1 材料与设备第62-63页
        6.1.1 试验材料与试剂第62页
        6.1.2 仪器与设备第62-63页
    6.2 试验方法第63-65页
        6.2.1 称猴桃的处理第63页
        6.2.2 猕猴桃果实总RNA的提取第63-64页
        6.2.3 反转录与荧光定量第64-65页
    6.3 结果与分析第65-67页
        6.3.1 乙烯利、1-MCP和ABA处理对miR9484的靶基因PP2C及ABF表达的影响第65页
        6.3.2 乙烯利、1-MCP和ABA处理对miR7545的靶基因PYR/PYL表达的影响第65-67页
    6.4 结论与讨论第67-70页
        6.4.1 '海沃德'猕猴桃果实PP2C、ABF及PYR/PYL表达变化与后熟进程第67-68页
        6.4.2 miR948与miR7545的表达变化靶基因PYR/PYL、PP2C、ABF的表达变化第68-70页
第7章 结论、创新点与展望第70-72页
    7.1 结论第70-71页
    7.2 创新点第71页
    7.3 展望第71-72页
参考文献第72-80页
致谢第80-82页
攻读硕士学位期间科研成果第82页

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