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雅致放射毛霉培养条件优化及apt1基因的克隆表达

摘要第1-6页
ABSTRACT第6-15页
第一章 ATP 合成及分析方法研究进展第15-29页
   ·ATP 概述第15-16页
   ·ATP 合成方法研究进展第16-19页
     ·以腺嘌呤为底物合成 ATP第16-17页
     ·以腺苷为底物合成 ATP第17-18页
     ·以 AMP 为底物合成 ATP第18页
     ·以 ADP 底物合成 ATP第18页
     ·以 IMP 为底物合成 ATP第18-19页
   ·ATP 的分析方法研究进展第19-21页
     ·琼脂糖平板电泳法第19-20页
     ·高效液相色谱法第20页
     ·纸电泳法第20页
     ·纸层析法第20页
     ·荧光素酶法第20-21页
     ·分光光度法第21页
     ·纤维素薄层层析法第21页
   ·ATP 的分离方法研究进展第21-22页
     ·阴阳离子交换柱联合分离法第21-22页
     ·阴离子交换柱联合吸附法第22页
     ·钠盐结晶法第22页
   ·前景与展望第22-23页
   ·选题意义、技术路线、研究内容及目标第23-25页
     ·选题意义第23页
     ·技术路线第23页
     ·研究内容第23-24页
     ·研究目标第24页
     ·创新点第24-25页
 参考文献第25-29页
第二章 ATP 转化菌种的形态及分子鉴定第29-46页
   ·前言第29-30页
   ·材料与方法第30-34页
     ·实验材料第30页
     ·培养基第30页
     ·溶液配制第30-31页
     ·仪器设备第31-32页
     ·菌株的分离纯化第32页
     ·形态鉴定第32页
     ·生理生化特性第32页
     ·分子鉴定第32-33页
     ·ATP 合成能力测定第33-34页
   ·结果及讨论第34-43页
     ·菌落形态特征鉴定第34页
     ·菌株形态鉴定第34-37页
     ·生理生化特性第37-40页
     ·分子鉴定第40-42页
     ·ATP 合成能力测定第42-43页
   ·本章小结第43-44页
 参考文献第44-46页
第三章 响应面法优化雅致放射毛霉糖化液菌体培养基第46-66页
   ·前言第46-47页
   ·材料与方法第47-48页
     ·菌种第47页
     ·培养基第47页
     ·试剂第47页
     ·仪器设备第47页
     ·糖化条件的优化第47页
     ·糖化液培养基的优化第47-48页
     ·验证实验第48页
   ·结果及讨论第48-64页
     ·糖化条件的优化第48-53页
     ·单因素实验第53-55页
     ·最陡爬坡实验第55-58页
     ·响应面优化糖化液培养基第58-61页
     ·响应面交互作用分析与优化第61-63页
     ·验证实验第63-64页
   ·本章小结第64页
 参考文献第64-66页
第四章 雅致放射毛霉遗传转化条件的确定第66-77页
   ·前言第66-67页
   ·材料与方法第67-69页
     ·菌种及质粒第67页
     ·主要试剂第67页
     ·溶液配制第67页
     ·培养基第67页
     ·仪器设备第67页
     ·原生质体的制备与再生第67-68页
     ·雅致放射毛霉对潮霉素 B 的敏感性试验第68页
     ·PEG -CaCl_2介导的原生质体转化第68-69页
     ·转化子的 PCR 鉴定第69页
     ·转化子遗传稳定性考察第69页
   ·结果及讨论第69-75页
     ·原生质体的制备第69-73页
     ·潮霉素 B 对雅致放射毛霉抑制浓度第73页
     ·转化子的筛选及鉴定第73-74页
     ·潮霉素 B 抗性转化子的稳定性第74-75页
   ·本章小结第75页
 参考文献第75-77页
第五章 apt1 基因在雅致放射毛霉中的克隆表达第77-89页
   ·前言第77-78页
   ·材料与方法第78-82页
     ·菌种第78页
     ·培养基第78页
     ·主要试剂第78页
     ·溶液配制第78页
     ·仪器设备第78页
     ·apt1 基因的获得第78-79页
     ·表达质粒 pCB1004 - Pgpd -apt1 的构建第79-80页
     ·表达质粒转化雅致放射毛霉第80-81页
     ·ATP 高产转化子的筛选及 P CR 鉴定第81页
     ·ATP 高产转化子遗传稳定性考察第81页
     ·apt1 基因转录水平的检测第81-82页
   ·结果与讨论第82-86页
     ·apt1 基因的获得第82-83页
     ·表达质粒的构建及双酶切鉴定第83-84页
     ·ATP 高产转化子的筛选第84-85页
     ·雅致放射毛霉重组子的 P CR 鉴定第85页
     ·ATP 高产转化子遗传稳定性考察第85页
     ·apt1 基因转录水平的检测第85-86页
   ·本章小结第86-87页
 参考文献第87-89页
第六章 总结与展望第89-91页
   ·总结第89-90页
   ·展望第90-91页
附录 1第91-93页
附录 2第93-94页
附录 3第94-95页
附录 4第95-96页
致谢第96-97页
攻读硕士学位期间主要科研成果第97页

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