摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-15页 |
第一章 绪论 | 第15-34页 |
·鸡蛋与蛋清 | 第15-17页 |
·鸡蛋 | 第15页 |
·蛋清的化学组成 | 第15-17页 |
·蛋清的研究现状 | 第17-21页 |
·提取溶菌酶 | 第17-19页 |
·蛋清的冷杀菌技术 | 第19页 |
·蛋清的功能性质 | 第19-21页 |
·蛋清酶水解物 | 第21页 |
·生物活性肽研究进展 | 第21-25页 |
·抗凝血肽研究进展 | 第22-23页 |
·抗氧化肽的研究进展 | 第23-25页 |
·本课题的立题背景和研究意义 | 第25-26页 |
·鸡蛋的深度开发和利用,增加鸡蛋附加值 | 第25页 |
·制备具有确切生物活性功能的活性肽,开发功能性配料 | 第25-26页 |
·主要研究内容 | 第26-27页 |
参考文献 | 第27-34页 |
第二章 抗凝血酶活性测定方法的建立 | 第34-45页 |
·前言 | 第34-35页 |
·材料和仪器 | 第35-36页 |
·原料 | 第35页 |
·试剂 | 第35页 |
·仪器 | 第35-36页 |
·实验方法 | 第36-38页 |
·凝血酶效价的测定 | 第36页 |
·纤维蛋白原含量的测定 | 第36页 |
·方法原理 | 第36页 |
·测量波长的确定 | 第36页 |
·pH 值的确定 | 第36-37页 |
·NaCl 浓度的确定 | 第37页 |
·未加抑制物的吸光值测定 | 第37页 |
·添加抑制物的吸光值测定 | 第37页 |
·EWPH 对凝血酶的抑制率Y 和抑制活性αi 的计算 | 第37页 |
·可信度判断 | 第37页 |
·测定方法的适用范围 | 第37-38页 |
·灵敏度测定 | 第38页 |
·重复性测定 | 第38页 |
·结果与讨论 | 第38-43页 |
·纤维蛋白原含量 | 第38页 |
·纤维蛋白凝固物的测定波长 | 第38-39页 |
·pH 对吸光值的影响 | 第39页 |
·NaCl 浓度对吸光值的影响 | 第39-40页 |
·可信度判断 | 第40-41页 |
·测定方法的适用范围 | 第41-42页 |
·灵敏度和重复性 | 第42-43页 |
·本章小结 | 第43页 |
参考文献 | 第43-45页 |
第三章 蛋清酶解前的热处理与水解物的脱盐方法研究 | 第45-65页 |
·前言 | 第45页 |
·材料和仪器 | 第45-47页 |
·材料 | 第45-47页 |
·仪器 | 第47页 |
·实验方法 | 第47-50页 |
·蛋白酶的活力测定及酶活残留率计算 | 第47页 |
·蛋白质含量的测定 | 第47页 |
·天然蛋清对酶抑制作用的测定 | 第47-48页 |
·在不同pH 下热处理的蛋清对酶抑制作用的测定 | 第48页 |
·在不同温度下热处理的蛋清对酶抑制作用的测定 | 第48页 |
·不同pH 下热处理蛋清的制备 | 第48页 |
·不同温度下热处理蛋清的制备 | 第48页 |
·蛋清的水解与水解度的测定 | 第48-49页 |
·圆二色性(Circular dichroic,CD)测定 | 第49页 |
·大孔吸附树脂的预处理 | 第49页 |
·静态吸附试验 | 第49-50页 |
·静态解吸试验 | 第50页 |
·DA201-C 大孔吸附树脂对EWPH 的静态吸附动力学 | 第50页 |
·DA201-C 大孔吸附树脂对EWPH 吸附行为的热动力学 | 第50页 |
·数据处理 | 第50页 |
·结果与讨论 | 第50-62页 |
·天然蛋清对酶的抑制作用 | 第50-51页 |
·不同pH 下热处理后蛋清的溶解性 | 第51-52页 |
·不同pH 值下热处理后的蛋清对蛋白酶的抑制作用 | 第52-53页 |
·不同温度热处理后的蛋清对蛋白酶的抑制作用 | 第53-54页 |
·热处理的起始pH 值和温度对DH 的影响 | 第54-55页 |
·蛋白质的二级结构对DH 的影响 | 第55-57页 |
·对EWPH 的静态吸附 | 第57-58页 |
·对EWPH 的静态解吸 | 第58-59页 |
·DA201-C 大孔吸附树脂对EWPH 的静态吸附动力学 | 第59页 |
·DA201-C 大孔吸附树脂对EWPH 的吸附热力学 | 第59-62页 |
·本章小结 | 第62页 |
参考文献 | 第62-65页 |
第四章 蛋清蛋白水解酶的筛选及其水解物的生化特性研究 | 第65-91页 |
·前言 | 第65-66页 |
·材料和仪器 | 第66页 |
·材料 | 第66页 |
·仪器 | 第66页 |
·实验方法 | 第66-71页 |
·酶活的测定 | 第66-67页 |
·水解蛋白酶水解蛋清能力的比较 | 第67-68页 |
·底物溶液的配制 | 第67页 |
·水解方法 | 第67页 |
·pH-stat 法 | 第67-68页 |
·不同DH 的蛋清蛋白水解物(EWPH)的制备方法 | 第68页 |
·DH 计算 | 第68页 |
·EWPH 的脱盐 | 第68页 |
·抗氧化活性测定 | 第68-69页 |
·对二苯代苦味酰基自由基(DPPH·)的清除作用 | 第68页 |
·对羟基自由基(·OH)的清除作用 | 第68-69页 |
·对超氧阴离子自由基(O2·-)的清除作用 | 第69页 |
·抗凝血酶活性 | 第69页 |
·蛋白质含量测定 | 第69页 |
·不同疏水性的EWPH 组分的制备 | 第69页 |
·凝胶过滤层析分离组分的制备 | 第69-70页 |
·氨基酸分析 | 第70页 |
·游离氨基酸分析 | 第70页 |
·相对分子质量分布测定 | 第70页 |
·水解物的疏水值计算 | 第70页 |
·体外模拟消化实验 | 第70-71页 |
·数据处理 | 第71页 |
·结果与分析 | 第71-87页 |
·不同蛋白酶水解蛋清能力的比较 | 第71-72页 |
·不同DH 的EWPH 的抗氧化活性 | 第72-74页 |
·对DPPH·的清除能力 | 第72-73页 |
·对·OH 的清除能力 | 第73-74页 |
·对O2·-的清除能力 | 第74页 |
·不同DH 的EWPH 的抗凝血酶活性 | 第74-75页 |
·两种EWPH 的氨基酸组成及营养评价 | 第75-77页 |
·两种EWPH 的游离氨基酸组成 | 第77-78页 |
·两种EWPH 的相对分子质量分布 | 第78-79页 |
·抗氧化活性组分的疏水性质 | 第79-81页 |
·抗凝血酶活性组分的疏水性质 | 第81页 |
·活性组分的相对分子质量分布 | 第81-82页 |
·抗凝血酶活性组分的氨基酸组成分析 | 第82-85页 |
·抗氧化活性与氨基酸组成的相关性 | 第85-86页 |
·峰2 和峰3 的相对分子质量分布 | 第86页 |
·体外消化对EWPH 的生物活性的影响 | 第86-87页 |
·本章小结 | 第87-88页 |
参考文献 | 第88-91页 |
第五章 酶膜生物反应器制备蛋清蛋白活性肽的研究 | 第91-103页 |
·前言 | 第91-92页 |
·材料和仪器 | 第92页 |
·材料 | 第92页 |
·仪器 | 第92页 |
·实验方法 | 第92-96页 |
·酶解工艺流程 | 第92-93页 |
·正交试验设计 | 第93-94页 |
·BP 人工神经网络的设计及对实验数据的拟合 | 第94-95页 |
·人工神经网络学习样本的选择与设计 | 第94页 |
·BP 人工神经网络设计 | 第94-95页 |
·BP 人工神经网络对酶解过程的优化 | 第95页 |
·蛋白质含量测定 | 第95页 |
·抗凝血酶活性测定 | 第95页 |
·抗氧化活性测定 | 第95页 |
·氨基酸分析 | 第95页 |
·游离氨基酸分析 | 第95页 |
·相对质量分布分析 | 第95-96页 |
·结果与讨论 | 第96-101页 |
·正交试验结果 | 第96页 |
·极差分析 | 第96-97页 |
·人工神经网络的预测与优化 | 第97-100页 |
·BP 网络的训练 | 第97-98页 |
·神经网络对酶解过程的优化 | 第98-100页 |
·EMBR 抗凝血酶产物的氨基酸分析及营养评价 | 第100页 |
·游离氨基酸分析 | 第100-101页 |
·相对分子质量组成 | 第101页 |
·本章小结 | 第101-102页 |
参考文献 | 第102-103页 |
第六章 抗凝血酶活性肽的分离纯化及构效关系研究 | 第103-121页 |
·前言 | 第103-104页 |
·材料与设备 | 第104-105页 |
·材料 | 第104页 |
·仪器 | 第104-105页 |
·实验方法 | 第105-107页 |
·凝血酶抑制率测定 | 第105页 |
·蛋白质含量的测定 | 第105页 |
·大孔吸附树脂层析分离活性肽 | 第105页 |
·凝胶层析分离活性肽 | 第105页 |
·半制备RP-HPLC 分离活性肽 | 第105页 |
·分析型RP-HPLC 分离活性肽 | 第105-106页 |
·MALDI-TOF-TOF MS 测定活性肽结构 | 第106页 |
·合成的活性肽分离纯化 | 第106页 |
·抗凝血酶活性肽抑制类型测定 | 第106页 |
·分子对接模型的构建 | 第106-107页 |
·结果与讨论 | 第107-119页 |
·大孔吸附树脂层析分离EWPH | 第107-108页 |
·Sephadex G-15 凝胶层析分离M75 组分 | 第108-109页 |
·半制备RP-HPLC 分离M75-G4 | 第109-110页 |
·分析型RP-HPLC 分离M75-G4-R2,M75-G4-R5,M75-G4-R7 | 第110-112页 |
·M75-G4-R2-r1, M75-G4-R5-r2, M75-G4-R7-r3, M75-G4-R7-r4 的纯度鉴定 | 第112-114页 |
·M75-G4-R7-r3 的结构表征 | 第114-115页 |
·M75-G4-R7-r3 抗凝血酶肽的抑制类型判断 | 第115-116页 |
·抗凝血酶活性肽(Leu-Val-Phe-Lys)的构效关系研究 | 第116-118页 |
·M75-G4-R2-r1、M75-G4-R5-r2、M75-G4-R7-r4 中主要母离子的结构表征 | 第118-119页 |
·本章小结 | 第119页 |
参考文献 | 第119-121页 |
主要结论 | 第121-123页 |
展望 | 第123-124页 |
论文创新点 | 第124-125页 |
附录A 合成肽(序列Leu-Val-Phe-Lys)的鉴定报告 | 第125-126页 |
附录B M75-G4-R2-r1 组分中活性肽的MS/MS 分析图谱 | 第126-130页 |
附录C M75-G4-R5-r2 组分中活性肽的MS/MS 分析图谱 | 第130-132页 |
附录D M75-G4-R7-r4 组分中活性肽的MS/MS 分析图谱 | 第132-135页 |
攻读博士学位期间发表的论文 | 第135-136页 |
致谢 | 第136页 |