| 摘要 | 第4-5页 |
| ABSTRACT | 第5-6页 |
| 英文略词与译名 | 第7-12页 |
| 第一章 绪论 | 第12-32页 |
| 1.1 β-1,3-葡聚糖 | 第12-14页 |
| 1.2 β-1,3-葡聚糖酶系 | 第14-15页 |
| 1.3 β-1,3-葡聚糖酶研究进展 | 第15-24页 |
| 1.3.1 β-1,3-葡聚糖酶的结构与功能 | 第15-23页 |
| 1.3.2 β-1,3-葡聚糖酶的应用 | 第23-24页 |
| 1.4 β-1,3-糖基转移酶研究进展 | 第24-26页 |
| 1.4.1 β-1,2,3-糖基转移酶催化特性和生理功能 | 第24-26页 |
| 1.4.2 β-1,3-糖基转移酶的应用 | 第26页 |
| 1.5 β-1,3-葡寡糖研究进展 | 第26-29页 |
| 1.5.1 β-1,3-葡寡糖 | 第26-27页 |
| 1.5.2 β-1,3-葡寡糖制备方法 | 第27-28页 |
| 1.5.3 β-1,3-葡寡糖的功能及应用 | 第28-29页 |
| 1.6 本课题研究的内容与意义 | 第29-32页 |
| 1.6.1 研究意义 | 第29-30页 |
| 1.6.2 研究内容 | 第30-32页 |
| 第二章 巴伦格兹类芽孢杆菌GH64家族β-1,3-葡聚糖酶的结构、功能及应用 | 第32-64页 |
| 2.1 引言 | 第32页 |
| 2.2 材料与方法 | 第32-40页 |
| 2.2.1 主要仪器和试剂 | 第32-33页 |
| 2.2.2 GH64家族β-1,3-葡聚糖酶(PbBg164A)的基因克隆 | 第33-34页 |
| 2.2.3 PbBg164A的表达和纯化 | 第34-36页 |
| 2.2.4 PbBg164A的晶体筛选及衍射数据收集 | 第36-37页 |
| 2.2.5 PbBg164A的结构解析 | 第37页 |
| 2.2.6 PbBg164A的酶学性质 | 第37-38页 |
| 2.2.7 PbBg164A的水解特性 | 第38-39页 |
| 2.2.8 β-1,3-葡聚糖(可得然多糖)结合力测定 | 第39页 |
| 2.2.9 PbBg164A制备β-1,3-葡寡糖的应用 | 第39-40页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第40-62页 |
| 2.3.1 PbBg164A的基因克隆及表达纯化 | 第40-41页 |
| 2.3.2 PbBg164A的底物特异性及水解特性 | 第41-43页 |
| 2.3.3 PbBg164A的酶学性质 | 第43页 |
| 2.3.4 PbBg164A的晶体筛选及衍射数据收集 | 第43-47页 |
| 2.3.5 PbBg164A的整体结构分析 | 第47-48页 |
| 2.3.6 PbBg164A-昆布六糖复合物结构分析 | 第48-49页 |
| 2.3.7 PbBg164A识别三股螺旋葡聚糖验证 | 第49-52页 |
| 2.3.8 PbBg164A的催化机理 | 第52-54页 |
| 2.3.9 GH64-TLP-Superfamily识别三股螺旋葡聚糖的结构基础 | 第54-56页 |
| 2.3.10 PbBg164A的N-端结构域功能 | 第56-58页 |
| 2.3.11 PbBg164A制备β-1,3-葡寡糖应用 | 第58-62页 |
| 2.4 本章小结 | 第62-64页 |
| 第三章 米黑根毛霉GH17家族β-1,3-葡聚糖基转移酶的结构、功能及理性设计改造 | 第64-94页 |
| 3.1 引言 | 第64页 |
| 3.2 材料与方法 | 第64-69页 |
| 3.2.1 主要仪器和试剂 | 第64页 |
| 3.2.2 米黑根毛霉总RNA的提取、mRNA的纯化及cDNA第一链的合成 | 第64-65页 |
| 3.2.3 GH17家族β-1,3-糖基转移酶(RmBgt17A)的基因克隆 | 第65-66页 |
| 3.2.4 RmBgt17A的表达和纯化 | 第66页 |
| 3.2.5 RmBgt17A及突变体的酶学性质 | 第66-67页 |
| 3.2.6 RmBgt17A及突变体的转糖苷/水解特性 | 第67-68页 |
| 3.2.7 RmBgt17A的晶体筛选及衍射数据收集 | 第68-69页 |
| 3.2.8 RmBgt17A结构解析 | 第69页 |
| 3.2.9 RmBgt17A转糖苷产物的分离鉴定 | 第69页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第69-92页 |
| 3.3.1 RmBgt17A的基因克隆、表达和纯化 | 第69-70页 |
| 3.3.2 RmBgt17A的催化特性及酶学性质 | 第70-73页 |
| 3.3.3 RmBgt17A转糖苷产物的分离鉴定 | 第73-74页 |
| 3.3.4 RmBgt17A的晶体筛选及衍射数据收集 | 第74-78页 |
| 3.3.5 RmBgt17A的总体结构 | 第78-80页 |
| 3.3.6 RmBgt17A的复合物结构 | 第80-82页 |
| 3.3.7 RmBgt17A转糖苷催化机理 | 第82-84页 |
| 3.3.8 RmBgt17A的进化分析 | 第84-85页 |
| 3.3.9 RmBgt17A的理性设计改造 | 第85-89页 |
| 3.3.10 RmBgt17A-E158A突变体的酶学性质 | 第89-90页 |
| 3.3.11 RmBgt17A-E158A突变体的底物特异性和动力学常数 | 第90-91页 |
| 3.3.12 RmBgt17A-E158A突变体的水解性质 | 第91-92页 |
| 3.3.13 RmBgt17A-E158A催化机制 | 第92页 |
| 3.4 本章小结 | 第92-94页 |
| 第四章 嗜热拟青霉GH16家族β-1,3-葡萄糖基转移酶的结构与功能研究 | 第94-116页 |
| 4.1 引言 | 第94页 |
| 4.2 材料与方法 | 第94-98页 |
| 4.2.1 主要仪器和试剂 | 第94-95页 |
| 4.2.2 嗜热拟青霉总RNA的提取、mRNA的纯化及cDNA第一链的合成 | 第95页 |
| 4.2.3 GH16家族β-1,3-糖基转移酶(PtBgt16A)的基因克隆 | 第95-96页 |
| 4.2.4 PtBgt16A的表达和纯化 | 第96页 |
| 4.2.5 PtBgt16A的酶学性质测定 | 第96页 |
| 4.2.6 PtBgt16A催化特性 | 第96-97页 |
| 4.2.7 PtBgt16A转糖苷产物的鉴定 | 第97页 |
| 4.2.8 PtBgt16A的晶体筛选及衍射数据收集 | 第97-98页 |
| 4.2.9 PtBgt16A的结构解析 | 第98页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第98-114页 |
| 4.3.1 PtBgt16A序列分析 | 第98-100页 |
| 4.3.2 PtBgt16A表达与纯化 | 第100-101页 |
| 4.3.3 PtBgt16A催化特性与底物特异性 | 第101-103页 |
| 4.3.4 PtBgt16A转糖苷产物鉴定 | 第103-106页 |
| 4.3.5 PtBgt16A酶学性质 | 第106页 |
| 4.3.6 PtBgt16A晶体筛选与数据收集 | 第106-109页 |
| 4.3.7 PtBgt16A的晶体结构 | 第109-110页 |
| 4.3.8 PtBgt16A特殊的催化凹槽 | 第110-113页 |
| 4.3.9 PtBgt16A的催化机理 | 第113-114页 |
| 4.4 本章小结 | 第114-116页 |
| 第五章 结论与建议 | 第116-118页 |
| 5.1 结论 | 第116-117页 |
| 5.2 本论文主要创新点 | 第117页 |
| 5.3 建议 | 第117-118页 |
| 参考文献 | 第118-130页 |
| 致谢 | 第130-132页 |
| 个人简历 | 第132-134页 |
| 附录 | 第134-140页 |
| 博士期间完成的其他研究工作 | 第140-142页 |
