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半乳糖-O-乙酰转移酶基因的克隆表达及功能研究

摘要第1-5页
ABSTRACT第5-9页
1 前言第9-20页
   ·乳酸菌及其胞外多糖第9-14页
     ·胞外多糖的生理功能及应用第9-11页
     ·胞外多糖的生物合成第11-12页
     ·乳酸菌胞外多糖生物合成的功能基因研究第12-14页
   ·乙酰化第14-16页
     ·胞外多糖乙酰化第14页
     ·胞外多糖乙酰化后的影响第14-16页
   ·马奶酒样乳杆菌及其胞外多糖研究概况第16-18页
     ·马奶酒样乳杆菌基本特征第16-17页
     ·马奶酒样乳杆菌胞外多糖第17页
     ·马奶酒样乳杆菌ZW3第17-18页
   ·本论文研究目的、意义及主要内容第18-20页
     ·本论文研究目的、意义第18-19页
     ·本论文主要研究内容第19-20页
2 材料与方法第20-42页
   ·实验材料第20-27页
     ·菌种、质粒及引物第20-21页
     ·试剂第21-22页
     ·工具酶及DNA、蛋白质Marker第22-23页
     ·抗生素第23页
     ·主要仪器及设备第23-24页
     ·培养基第24-25页
     ·标准溶液的配制第25-27页
   ·试验方法第27-42页
     ·实验技术路线第27-28页
     ·基因WANG_1291编码的蛋白生物信息学分析第28页
     ·乳酸菌重组质粒pMG36e-1291与大肠杆菌重组质粒pET30a-1291的构建第28-32页
     ·乳酸乳球菌WH-C1/pMG36e-1291与大肠杆菌DH5α/pET30a-1291转化子的制备第32-34页
     ·乳酸乳球菌WH-C1/pMG36e-1291转化子的验证第34-35页
     ·大肠杆菌DH5α/pET30a-1291转化子的验证第35-36页
     ·大肠杆菌BL21(DE3)/pET30a-1291编码目的蛋白及蛋白保存第36-37页
     ·WANG_1291编码蛋白酶学活性的测定第37-38页
     ·WANG_1291编码蛋白酶的性质研究第38-40页
     ·乳酸乳球菌WH-C1/pMG36e-1291生长曲线与胞外多糖产量的测定第40-42页
3 结果与讨论第42-61页
   ·基因WANG_1291的蛋白生物信息学分析第42-46页
     ·同源性搜索与分析第42页
     ·WANG_1291蛋白理化特性的生物信息学分析第42-43页
     ·WANG_1291蛋白保守功能区分析第43-44页
     ·WANG_1291蛋白跨膜结构域分析第44-45页
     ·WANG_1291信号肽分析第45-46页
   ·大肠杆菌DH5α/pET30a-1291转化子的制备及目的蛋白表达第46-50页
     ·WANG_1291基因的扩增第46-47页
     ·构建重组质粒pET30a-1291第47-48页
     ·重组质粒pET30a-1291的验证第48-49页
     ·WANG_1291蛋白在大肠杆菌中的表达第49-50页
   ·WANG_1291编码蛋白酶活性测定第50-57页
     ·WANG_1291蛋白的纯化与定量第50-52页
     ·WANG_1291蛋白酶学活性定性第52-54页
     ·WANG_1291蛋白酶学性质研究第54-57页
   ·乳酸乳球菌WH-C1/pMG36e-1291转化子的制备第57-58页
     ·WANG_1291基因的扩增第57页
     ·构建重组质粒pMG36e-1291第57页
     ·重组质粒pMG36e-1291的酶切验证第57-58页
   ·乳酸乳球菌WH-C1/pMG36e-1291的生长曲线及产多糖量第58-61页
     ·乳酸乳球菌WH-C1/pMG36e-1291生长曲线第58-59页
     ·乳酸乳球菌WH-C1/pMG36e-1291胞外多糖产量第59-61页
4 结论第61-62页
5 展望第62-63页
6 参考文献第63-71页
7 致谢第71-72页
附录第72页

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