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蛋清卵类粘蛋白分离纯化、结构表征及其过敏原性的研究

摘要第1-13页
Abstract第13-16页
缩略语表第16-17页
第一章 文献综述第17-38页
 1 卵类粘蛋白的分离纯化方法第17-18页
 2 卵类粘蛋白的理化性质第18页
 3 卵类粘蛋白的胰蛋白酶抑制活性第18页
 4 卵类粘蛋白的结构及组成第18-21页
 5 卵类粘蛋白的过敏原性第21-32页
   ·食物过敏反应的定义及流行病学第21页
   ·食物过敏反应的临床症状第21-22页
   ·食物过敏反应的致病机理第22-23页
   ·食物过敏原第23-24页
   ·食物过敏原的鉴定第24-27页
     ·双盲对照食物激发实验第25页
     ·皮肤试验(SPT)第25页
     ·组胺释放实验第25-26页
     ·IgE检测第26-27页
   ·鸡蛋过敏反应的概况第27-28页
     ·鸡蛋过敏反应的流行病学第27页
     ·鸡蛋过敏原第27-28页
   ·卵类粘蛋白的过敏反应第28-32页
     ·卵类粘蛋白过敏原性概述第28页
     ·卵类粘蛋白碳水化合物部分的过敏原性第28-29页
     ·卵类粘蛋白三个功能域的不同过敏原性第29-30页
     ·卵类粘蛋白的表位绘制第30-32页
 6 抑制卵类粘蛋白过敏原性的研究进展第32-35页
   ·加热法抑制卵类粘蛋白的过敏原性第32页
   ·基因重组法抑制卵类粘蛋白的过敏原性第32-33页
   ·射线照射法抑制卵类粘蛋白的过敏原性第33页
   ·化学修饰抗原或类变应原第33-34页
   ·酶解法抑制卵类粘蛋白的过敏原性第34页
   ·去糖基化作用第34-35页
 7 卵类粘蛋白的应用第35页
   ·卵类粘蛋白特异性结合的IgE浓聚物预测症状性鸡蛋过敏反应第35页
   ·卵类粘蛋白用作层析柱的吸附剂第35页
   ·卵类粘蛋白用于一些药物的手性拆分第35页
 8 本课题主要研究内容及研究意义第35-38页
   ·主要研究内容第35-37页
   ·技术路线第37页
   ·研究意义第37-38页
第二章 鸡蛋清中卵类粘蛋白的分离纯化第38-49页
 1 材料与方法第38-44页
   ·材料第38-39页
     ·实验材料和试剂第38-39页
     ·实验仪器与设备第39页
   ·方法第39-44页
     ·主要溶液的配制及材料的处理第39-40页
     ·CHOM粗品的制备第40-41页
     ·Sephadex G-25层析柱脱盐第41页
     ·DEAE-32纤维素离子交换法纯化CHOM第41页
     ·CHOM纯品的制备第41-42页
     ·产品鉴定与纯度,活性的测定第42-43页
     ·CHOM回收率测定第43-44页
     ·红外光谱检测第44页
 2 结果与分析第44-48页
   ·Sephadex G-25层析柱脱盐第44-45页
   ·DEAE-32纤维素离子交换法纯化CHOM第45页
   ·SDS-PAGE鉴定第45-46页
   ·CHOM活性测定第46页
   ·产品回收率测定第46-47页
   ·红外光谱法测定CHOM二级结构的结果第47-48页
 3 小结与讨论第48-49页
第三章 过敏动物模型的建立第49-58页
 1 材料与方法第49-53页
   ·材料第49-50页
     ·样品与试剂第49页
     ·仪器与设备第49页
     ·实验动物第49-50页
   ·方法第50-53页
     ·主要溶液的配制第50页
     ·动物饲养与处理第50页
     ·过敏原的配制第50页
     ·致敏及激发方法的建立第50-52页
     ·豚鼠过敏反应症状评分细则第52页
     ·间接非竞争ELISA确定包被抗原的最佳工作浓度及抗血清中sIgG的效价第52-53页
 2 结果与分析第53-56页
   ·过敏症模型建立结果第53-54页
   ·包被抗原的最佳工作浓度及抗血清中sIgG的效价第54-56页
     ·方阵滴定法测定抗原抗体的最佳组合第54-55页
     ·抗体的ELISA效价第55-56页
 3 小结与讨论第56-58页
第四章 热处理对卵类粘蛋白过敏原性的影响第58-72页
 1 材料与方法第58-61页
   ·材料第58-59页
     ·样品与试剂第58页
     ·仪器与设备第58-59页
   ·方法第59-61页
     ·CHOM样品溶液的加热处理第59页
     ·圆二色谱分析二级结构的变化第59页
     ·ANS荧光探针光谱表征疏水性变化第59页
     ·紫外光谱表征构象变化第59-60页
     ·间接竞争ELISA法测定热处理卵类粘蛋白的过敏原性第60页
     ·卵类粘蛋白热变性的D值、Z值的计算第60-61页
 2 结果与分析第61-70页
   ·卵类粘蛋白微观构象的表征结果第61-67页
     ·CD光谱研究热处理对卵类粘蛋白二级结构的影响结果第61-63页
     ·ANS荧光探针光谱研究热处理对卵类粘蛋白表面疏水性的影响结果第63-64页
     ·紫外光谱研究热处理对卵类粘蛋白的构象的影响结果第64-67页
   ·间接竞争ELISA法测定热处理卵类粘蛋白的过敏原性结果第67-68页
     ·建立标准曲线第67页
     ·根据标准曲线求得热处理后能与sIgG结合的卵类粘蛋白的量第67-68页
   ·卵类粘蛋白热变性的D值、Z值的计算第68-70页
 3 小结与讨论第70-72页
第五章 美拉德反应对卵类粘蛋白过敏原性的影响第72-84页
 1 材料与方法第72-74页
   ·材料第72-73页
     ·样品与试剂第72页
     ·仪器与设备第72-73页
   ·方法第73-74页
     ·美拉德反应产物的制备第73页
     ·美拉德反应产物相对荧光强度的测定第73-74页
     ·美拉德反应产物相对吸光度的测定第74页
     ·间接竞争ELISA法测定卵类粘蛋白美拉德反应产物的过敏原性第74页
 2 结果与分析第74-81页
   ·美拉德反应产物相对荧光强度的测定结果第74-76页
     ·不同反应时间的美拉德反应产物的相对荧光强度的测定结果第74-75页
     ·不同起始pH的美拉德反应产物的相对荧光强度的测定结果第75页
     ·不同浓度果糖和CHOM的美拉德反应产物的相对荧光强度的测定结果第75-76页
   ·美拉德反应产物相对吸光度的测定结果第76-79页
     ·不同反应时间的美拉德反应产物的相对吸光度的测定结果第76-77页
     ·不同起始pH的美拉德反应产物的相对吸光度的测定结果第77-78页
     ·不同浓度果糖和CHOM的美拉德反应产物的相对吸光度的测定结果第78-79页
   ·间接竞争ELISA法测定卵类粘蛋白美拉德反应产物的过敏原性结果第79-81页
     ·建立标准曲线第79页
     ·根据标准曲线求得发生美拉德反应后能与sIgG结合的卵类粘蛋白的量第79-81页
 3 小结与讨论第81-84页
第六章 体外模拟胃肠道消化对卵类粘蛋白过敏原性的影响第84-91页
 1 材料与方法第84-86页
   ·材料第84-85页
     ·样品与试剂第84-85页
     ·仪器与设备第85页
   ·方法第85-86页
     ·体外模拟胃肠液的配制第85页
     ·体外胃肠液消化模拟第85-86页
     ·消化产物的SDS-PAGE检验第86页
     ·间接竞争ELISA法测定经体外模拟肠胃液消化后的卵类粘蛋白过敏原性第86页
 2 结果与分析第86-90页
   ·SDS-PAGE表征卵类粘蛋白的胃液消化产物第86-87页
   ·SDS-PAGE表征卵类粘蛋白的肠液消化产物第87-88页
   ·间接竞争ELISA法测定经体外模拟肠胃液消化后的卵类粘蛋白过敏原性结果第88-90页
     ·建立标准曲线第88页
     ·根据标准曲线求得经胃液处理后能与sIgG结合的卵类粘蛋白的量第88-89页
     ·根据标准曲线求得经肠液处理后能与sIgG结合的卵类粘蛋白的量第89-90页
 3 小结与讨论第90-91页
第七章 结论第91-94页
 1 结论第91-93页
 2 本研究的创新点第93-94页
参考文献第94-101页
致谢第101-102页
附录:研究生期间发表的论文列表第102页

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