摘要 | 第1-13页 |
Abstract | 第13-16页 |
缩略语表 | 第16-17页 |
第一章 文献综述 | 第17-38页 |
1 卵类粘蛋白的分离纯化方法 | 第17-18页 |
2 卵类粘蛋白的理化性质 | 第18页 |
3 卵类粘蛋白的胰蛋白酶抑制活性 | 第18页 |
4 卵类粘蛋白的结构及组成 | 第18-21页 |
5 卵类粘蛋白的过敏原性 | 第21-32页 |
·食物过敏反应的定义及流行病学 | 第21页 |
·食物过敏反应的临床症状 | 第21-22页 |
·食物过敏反应的致病机理 | 第22-23页 |
·食物过敏原 | 第23-24页 |
·食物过敏原的鉴定 | 第24-27页 |
·双盲对照食物激发实验 | 第25页 |
·皮肤试验(SPT) | 第25页 |
·组胺释放实验 | 第25-26页 |
·IgE检测 | 第26-27页 |
·鸡蛋过敏反应的概况 | 第27-28页 |
·鸡蛋过敏反应的流行病学 | 第27页 |
·鸡蛋过敏原 | 第27-28页 |
·卵类粘蛋白的过敏反应 | 第28-32页 |
·卵类粘蛋白过敏原性概述 | 第28页 |
·卵类粘蛋白碳水化合物部分的过敏原性 | 第28-29页 |
·卵类粘蛋白三个功能域的不同过敏原性 | 第29-30页 |
·卵类粘蛋白的表位绘制 | 第30-32页 |
6 抑制卵类粘蛋白过敏原性的研究进展 | 第32-35页 |
·加热法抑制卵类粘蛋白的过敏原性 | 第32页 |
·基因重组法抑制卵类粘蛋白的过敏原性 | 第32-33页 |
·射线照射法抑制卵类粘蛋白的过敏原性 | 第33页 |
·化学修饰抗原或类变应原 | 第33-34页 |
·酶解法抑制卵类粘蛋白的过敏原性 | 第34页 |
·去糖基化作用 | 第34-35页 |
7 卵类粘蛋白的应用 | 第35页 |
·卵类粘蛋白特异性结合的IgE浓聚物预测症状性鸡蛋过敏反应 | 第35页 |
·卵类粘蛋白用作层析柱的吸附剂 | 第35页 |
·卵类粘蛋白用于一些药物的手性拆分 | 第35页 |
8 本课题主要研究内容及研究意义 | 第35-38页 |
·主要研究内容 | 第35-37页 |
·技术路线 | 第37页 |
·研究意义 | 第37-38页 |
第二章 鸡蛋清中卵类粘蛋白的分离纯化 | 第38-49页 |
1 材料与方法 | 第38-44页 |
·材料 | 第38-39页 |
·实验材料和试剂 | 第38-39页 |
·实验仪器与设备 | 第39页 |
·方法 | 第39-44页 |
·主要溶液的配制及材料的处理 | 第39-40页 |
·CHOM粗品的制备 | 第40-41页 |
·Sephadex G-25层析柱脱盐 | 第41页 |
·DEAE-32纤维素离子交换法纯化CHOM | 第41页 |
·CHOM纯品的制备 | 第41-42页 |
·产品鉴定与纯度,活性的测定 | 第42-43页 |
·CHOM回收率测定 | 第43-44页 |
·红外光谱检测 | 第44页 |
2 结果与分析 | 第44-48页 |
·Sephadex G-25层析柱脱盐 | 第44-45页 |
·DEAE-32纤维素离子交换法纯化CHOM | 第45页 |
·SDS-PAGE鉴定 | 第45-46页 |
·CHOM活性测定 | 第46页 |
·产品回收率测定 | 第46-47页 |
·红外光谱法测定CHOM二级结构的结果 | 第47-48页 |
3 小结与讨论 | 第48-49页 |
第三章 过敏动物模型的建立 | 第49-58页 |
1 材料与方法 | 第49-53页 |
·材料 | 第49-50页 |
·样品与试剂 | 第49页 |
·仪器与设备 | 第49页 |
·实验动物 | 第49-50页 |
·方法 | 第50-53页 |
·主要溶液的配制 | 第50页 |
·动物饲养与处理 | 第50页 |
·过敏原的配制 | 第50页 |
·致敏及激发方法的建立 | 第50-52页 |
·豚鼠过敏反应症状评分细则 | 第52页 |
·间接非竞争ELISA确定包被抗原的最佳工作浓度及抗血清中sIgG的效价 | 第52-53页 |
2 结果与分析 | 第53-56页 |
·过敏症模型建立结果 | 第53-54页 |
·包被抗原的最佳工作浓度及抗血清中sIgG的效价 | 第54-56页 |
·方阵滴定法测定抗原抗体的最佳组合 | 第54-55页 |
·抗体的ELISA效价 | 第55-56页 |
3 小结与讨论 | 第56-58页 |
第四章 热处理对卵类粘蛋白过敏原性的影响 | 第58-72页 |
1 材料与方法 | 第58-61页 |
·材料 | 第58-59页 |
·样品与试剂 | 第58页 |
·仪器与设备 | 第58-59页 |
·方法 | 第59-61页 |
·CHOM样品溶液的加热处理 | 第59页 |
·圆二色谱分析二级结构的变化 | 第59页 |
·ANS荧光探针光谱表征疏水性变化 | 第59页 |
·紫外光谱表征构象变化 | 第59-60页 |
·间接竞争ELISA法测定热处理卵类粘蛋白的过敏原性 | 第60页 |
·卵类粘蛋白热变性的D值、Z值的计算 | 第60-61页 |
2 结果与分析 | 第61-70页 |
·卵类粘蛋白微观构象的表征结果 | 第61-67页 |
·CD光谱研究热处理对卵类粘蛋白二级结构的影响结果 | 第61-63页 |
·ANS荧光探针光谱研究热处理对卵类粘蛋白表面疏水性的影响结果 | 第63-64页 |
·紫外光谱研究热处理对卵类粘蛋白的构象的影响结果 | 第64-67页 |
·间接竞争ELISA法测定热处理卵类粘蛋白的过敏原性结果 | 第67-68页 |
·建立标准曲线 | 第67页 |
·根据标准曲线求得热处理后能与sIgG结合的卵类粘蛋白的量 | 第67-68页 |
·卵类粘蛋白热变性的D值、Z值的计算 | 第68-70页 |
3 小结与讨论 | 第70-72页 |
第五章 美拉德反应对卵类粘蛋白过敏原性的影响 | 第72-84页 |
1 材料与方法 | 第72-74页 |
·材料 | 第72-73页 |
·样品与试剂 | 第72页 |
·仪器与设备 | 第72-73页 |
·方法 | 第73-74页 |
·美拉德反应产物的制备 | 第73页 |
·美拉德反应产物相对荧光强度的测定 | 第73-74页 |
·美拉德反应产物相对吸光度的测定 | 第74页 |
·间接竞争ELISA法测定卵类粘蛋白美拉德反应产物的过敏原性 | 第74页 |
2 结果与分析 | 第74-81页 |
·美拉德反应产物相对荧光强度的测定结果 | 第74-76页 |
·不同反应时间的美拉德反应产物的相对荧光强度的测定结果 | 第74-75页 |
·不同起始pH的美拉德反应产物的相对荧光强度的测定结果 | 第75页 |
·不同浓度果糖和CHOM的美拉德反应产物的相对荧光强度的测定结果 | 第75-76页 |
·美拉德反应产物相对吸光度的测定结果 | 第76-79页 |
·不同反应时间的美拉德反应产物的相对吸光度的测定结果 | 第76-77页 |
·不同起始pH的美拉德反应产物的相对吸光度的测定结果 | 第77-78页 |
·不同浓度果糖和CHOM的美拉德反应产物的相对吸光度的测定结果 | 第78-79页 |
·间接竞争ELISA法测定卵类粘蛋白美拉德反应产物的过敏原性结果 | 第79-81页 |
·建立标准曲线 | 第79页 |
·根据标准曲线求得发生美拉德反应后能与sIgG结合的卵类粘蛋白的量 | 第79-81页 |
3 小结与讨论 | 第81-84页 |
第六章 体外模拟胃肠道消化对卵类粘蛋白过敏原性的影响 | 第84-91页 |
1 材料与方法 | 第84-86页 |
·材料 | 第84-85页 |
·样品与试剂 | 第84-85页 |
·仪器与设备 | 第85页 |
·方法 | 第85-86页 |
·体外模拟胃肠液的配制 | 第85页 |
·体外胃肠液消化模拟 | 第85-86页 |
·消化产物的SDS-PAGE检验 | 第86页 |
·间接竞争ELISA法测定经体外模拟肠胃液消化后的卵类粘蛋白过敏原性 | 第86页 |
2 结果与分析 | 第86-90页 |
·SDS-PAGE表征卵类粘蛋白的胃液消化产物 | 第86-87页 |
·SDS-PAGE表征卵类粘蛋白的肠液消化产物 | 第87-88页 |
·间接竞争ELISA法测定经体外模拟肠胃液消化后的卵类粘蛋白过敏原性结果 | 第88-90页 |
·建立标准曲线 | 第88页 |
·根据标准曲线求得经胃液处理后能与sIgG结合的卵类粘蛋白的量 | 第88-89页 |
·根据标准曲线求得经肠液处理后能与sIgG结合的卵类粘蛋白的量 | 第89-90页 |
3 小结与讨论 | 第90-91页 |
第七章 结论 | 第91-94页 |
1 结论 | 第91-93页 |
2 本研究的创新点 | 第93-94页 |
参考文献 | 第94-101页 |
致谢 | 第101-102页 |
附录:研究生期间发表的论文列表 | 第102页 |