| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 第一章 引言 | 第11-39页 |
| 1.1 花色苷概述 | 第11-15页 |
| 1.1.1 花色苷的结构及分布 | 第12-13页 |
| 1.1.2 花色苷的性质 | 第13-14页 |
| 1.1.3 花色苷的生态功能 | 第14-15页 |
| 1.2 葡萄果实与葡萄酒中的花色苷 | 第15-24页 |
| 1.2.1 葡萄果实和葡萄酒中的花色苷 | 第15-18页 |
| 1.2.2 葡萄果实中花色苷的生物合成 | 第18-20页 |
| 1.2.3 影响花色苷合成的因素 | 第20-24页 |
| 1.3 花色素的修饰 | 第24-28页 |
| 1.3.1 花色素的非糖苷化修饰 | 第25-26页 |
| 1.3.2 花色素的糖基化修饰 | 第26-28页 |
| 1.4 基因功能验证 | 第28-30页 |
| 1.4.1 植物启动子 | 第28-30页 |
| 1.4.2 植物转基因 | 第30页 |
| 1.5 植物次生代谢糖基转移酶的研究进展 | 第30-37页 |
| 1.5.1 植物糖基转移酶概述 | 第30-32页 |
| 1.5.2 糖基转移酶的结构 | 第32-33页 |
| 1.5.3 糖基转移酶的反应特性 | 第33-34页 |
| 1.5.4 天然产物的糖基化 | 第34-35页 |
| 1.5.5 葡萄中糖基转移酶研究进展 | 第35-37页 |
| 1.6 本研究目的和意义 | 第37-39页 |
| 第二章 ‘赤霞珠’葡萄果实中存在花色素双糖苷的质谱证据 | 第39-53页 |
| 2.1 实验材料 | 第39-40页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第39-40页 |
| 2.1.2 化学试剂 | 第40页 |
| 2.1.3 实验仪器 | 第40页 |
| 2.2 实验方法 | 第40-45页 |
| 2.2.1 葡萄果皮花色苷的提取 | 第40-41页 |
| 2.2.2 HPLC-ESI-MS检测葡萄果实花色苷 | 第41页 |
| 2.2.3 葡萄基因组DNA的提取 | 第41-42页 |
| 2.2.4 核酸电泳检测 | 第42页 |
| 2.2.5 基因组SSR-PCR扩增 | 第42-45页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第45-52页 |
| 2.3.1 ‘赤霞珠’葡萄果实中花色苷的检测 | 第45-49页 |
| 2.3.2 ‘赤霞珠’葡萄品种的鉴定 | 第49-52页 |
| 2.4 小结 | 第52-53页 |
| 第三章 ‘赤霞珠’葡萄Vv5GT候选基因的克隆及其生化鉴定 | 第53-93页 |
| 3.1 实验材料 | 第53-56页 |
| 3.1.1 植物材料 | 第53页 |
| 3.1.2 菌株和菌体 | 第53页 |
| 3.1.3 化学试剂 | 第53-54页 |
| 3.1.4 实验仪器 | 第54-55页 |
| 3.1.5 培养基的配制 | 第55页 |
| 3.1.6 溶液配制 | 第55-56页 |
| 3.2 实验方法 | 第56-69页 |
| 3.2.1 葡萄果实总DNA和RNA的提取 | 第56-57页 |
| 3.2.2 cDNA的合成 | 第57-58页 |
| 3.2.3 Vv5GT候选基因的合成 | 第58-60页 |
| 3.2.4 重组载体的构建及序列分析 | 第60-62页 |
| 3.2.5 Vv5GT候选基因表达载体的构建 | 第62-64页 |
| 3.2.6 Vv5GT重组蛋白的表达和纯化 | 第64-66页 |
| 3.2.7 Vv5GT重组蛋白酶学活性检测 | 第66-67页 |
| 3.2.8 重组Vv5GT3基本酶学特性研究 | 第67-69页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第69-92页 |
| 3.3.1 Vv5GT候选基因的扩增及序列分析 | 第69-78页 |
| 3.3.2 蛋白质功能预测 | 第78-80页 |
| 3.3.3 重组表达载体的构建与验证 | 第80-81页 |
| 3.3.4 Vv5GT重组蛋白的表达和纯化 | 第81-83页 |
| 3.3.5 重组Vv5GT的生化功能鉴定 | 第83-86页 |
| 3.3.6 重组Vv5GT3基本酶学特性研究 | 第86-92页 |
| 3.4 小结 | 第92-93页 |
| 第四章 Vv5GT3基因启动子的克隆及其对光强的响应 | 第93-110页 |
| 4.1 实验材料 | 第93-95页 |
| 4.1.1 植物材料 | 第93页 |
| 4.1.2 仪器 | 第93-94页 |
| 4.1.3 菌株和载体 | 第94页 |
| 4.1.4 药品与试剂 | 第94页 |
| 4.1.5 常用试剂配制 | 第94-95页 |
| 4.2 实验方法 | 第95-100页 |
| 4.2.1 葡萄果实理化指标的测定 | 第95页 |
| 4.2.2 目的基因转录水平表达的检测 | 第95-97页 |
| 4.2.3 葡萄Vv5GT3基因启动子序列的获得 | 第97-99页 |
| 4.2.4 启动子活性分析 | 第99-100页 |
| 4.2.5 序列分析 | 第100页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第100-109页 |
| 4.3.1 葡萄果实的基本理化指标 | 第100-101页 |
| 4.3.2 Vv5GT3基因在‘赤霞珠’果实中的表达 | 第101-102页 |
| 4.3.3 ‘赤霞珠’果实Vv5GT3基因启动子的克隆及序列分析 | 第102-108页 |
| 4.3.4 根癌农杆菌转化及鉴定 | 第108页 |
| 4.3.5 ‘赤霞珠’Vv5GT3启动子对光强的响应 | 第108-109页 |
| 4.4 小结 | 第109-110页 |
| 第五章 Vv5GT3在植物体内的功能验证 | 第110-131页 |
| 5.1 实验材料 | 第110-112页 |
| 5.1.1 植物材料 | 第110页 |
| 5.1.2 菌株和载体 | 第110页 |
| 5.1.3 化学试剂和试剂盒 | 第110-111页 |
| 5.1.4 试剂的配制 | 第111-112页 |
| 5.2 实验方法 | 第112-121页 |
| 5.2.1 Vv5GT3在植物体内的亚细胞定位 | 第112-115页 |
| 5.2.2 Vv5GT3在转基因烟草中的表达 | 第115-121页 |
| 5.3 结果与讨论 | 第121-130页 |
| 5.3.1 Vv5GT3在植物体内的亚细胞定位 | 第121-123页 |
| 5.3.2 Vv5GT3在转基因烟草中的表达 | 第123-130页 |
| 5.4 小结 | 第130-131页 |
| 第六章 总结与展望 | 第131-133页 |
| 6.1 全文总结 | 第131页 |
| 6.2 创新点 | 第131-132页 |
| 6.3 展望 | 第132-133页 |
| 参考文献 | 第133-150页 |
| 致谢 | 第150-151页 |
| 个人简介 | 第151页 |
