| 摘要 | 第6-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 英文缩略表 | 第14-15页 |
| 第一章 文献综述 | 第15-25页 |
| 1.1 宰后肌肉变化与肉品质量 | 第15-16页 |
| 1.1.1 尸僵 | 第15页 |
| 1.1.2 成熟和嫩化 | 第15-16页 |
| 1.1.3 生鲜猪肉品质 | 第16页 |
| 1.2 PSE肉形成影响因素及控制技术 | 第16-20页 |
| 1.2.1 遗传因素 | 第16-18页 |
| 1.2.2 宰前处理 | 第18-19页 |
| 1.2.3 PSE肉控制技术 | 第19-20页 |
| 1.3 PSE肉与宰后糖酵解酶类 | 第20-22页 |
| 1.3.1 AMP-激活蛋白激酶 | 第20-21页 |
| 1.3.2 丙酮酸激酶 | 第21页 |
| 1.3.3 ATP酶 | 第21页 |
| 1.3.4 磷酸果糖激酶 | 第21-22页 |
| 1.4 TIGAR蛋白与无氧糖酵解 | 第22-24页 |
| 1.5 本研究的目的和意义 | 第24页 |
| 1.6 研究技术路线 | 第24-25页 |
| 第二章 TIGAR mRNA相对荧光定量RT-PCR方法的建立 | 第25-39页 |
| 2.1 前言 | 第25页 |
| 2.2 材料与试剂 | 第25-26页 |
| 2.2.1 实验材料及试剂 | 第25页 |
| 2.2.2 主要仪器 | 第25-26页 |
| 2.3 实验方法 | 第26-31页 |
| 2.3.1 总RNA提取 | 第26页 |
| 2.3.2 cDNA第一链的合成 | 第26-27页 |
| 2.3.3 cDNA质量的检测 | 第27页 |
| 2.3.4 构建pMD18-T-TIGAR及pMD18-T-β-actin克隆载体 | 第27-30页 |
| 2.3.5 荧光定量PCR标准曲线的建立 | 第30-31页 |
| 2.4 结果与分析 | 第31-37页 |
| 2.4.1 总RNA提取及质量检测 | 第31页 |
| 2.4.2 cDNA第一链检测 | 第31-32页 |
| 2.4.3 pTT与pTA重组质粒的验证 | 第32-33页 |
| 2.4.4 TIGAR及p-actin mRNA质粒标准品的线性扩增范围及灵敏度 | 第33-37页 |
| 2.5 讨论 | 第37页 |
| 2.6 本章小结 | 第37-39页 |
| 第三章 宰后不同时间TIGAR mRNA转录水平与肉品质相关性 | 第39-49页 |
| 3.1 前言 | 第39页 |
| 3.2 材料与方法 | 第39-41页 |
| 3.2.1 实验材料 | 第39页 |
| 3.2.2 实验试剂 | 第39页 |
| 3.2.3 主要仪器 | 第39-40页 |
| 3.2.4 测定方法 | 第40-41页 |
| 3.3 结果与分析 | 第41-44页 |
| 3.3.1 宰后不同时间肉品质指标测定结果 | 第41-43页 |
| 3.3.2 宰后不同时间TIGAR mRNA相对转录水平 | 第43-44页 |
| 3.3.3 宰后不同时间TIGAR mRNA相对转录水平与肉品质指标相关性 | 第44页 |
| 3.4 讨论 | 第44-48页 |
| 3.5 本章小结 | 第48-49页 |
| 第四章 不同品种猪TIGAR mRNA转录水平与肉品质相关性 | 第49-57页 |
| 4.1 前言 | 第49页 |
| 4.2 材料与方法 | 第49-51页 |
| 4.2.1 实验材料 | 第49页 |
| 4.2.2 实验试剂 | 第49页 |
| 4.2.3 主要仪器 | 第49-50页 |
| 4.2.4 实验方法 | 第50-51页 |
| 4.3 结果与分析 | 第51-54页 |
| 4.3.1 宰后45min不同品种猪各肉品质指标 | 第51-52页 |
| 4.3.2 不同品种猪宰后45min TIGAR mRNA相对转录水平测定结果 | 第52页 |
| 4.3.3 宰后不同品种猪TIGAR mRNA转录水平与肉品质相关性 | 第52-54页 |
| 4.4 讨论 | 第54-56页 |
| 4.5 本章小结 | 第56-57页 |
| 第五章 猪TIGAR蛋白体外表达、鉴定与纯化 | 第57-69页 |
| 5.1 前言 | 第57页 |
| 5.2 材料与方法 | 第57-64页 |
| 5.2.1 主要试剂 | 第57-58页 |
| 5.2.2 主要仪器 | 第58页 |
| 5.2.3 实验方法 | 第58-64页 |
| 5.3 结果与分析 | 第64-67页 |
| 5.3.1 pMD18-T-TIGAR及pET-26b(+)载体双酶切 | 第64页 |
| 5.3.2 菌液PCR鉴定重组pET-26b(+)-TIGAR表达载体 | 第64-65页 |
| 5.3.3 6×His-TIGAR融合蛋白的诱导表达 | 第65页 |
| 5.3.4 6×His-TIGAR融合蛋白可溶性分析 | 第65-66页 |
| 5.3.5 Western Blot检测6xHis-TIGAR融合蛋白 | 第66-67页 |
| 5.3.6 6×His-TIGAR融合蛋白分离纯化 | 第67页 |
| 5.4 讨论 | 第67-68页 |
| 5.5 本章小结 | 第68-69页 |
| 第六章 全文结论 | 第69-71页 |
| 6.1 本研究结论 | 第69页 |
| 6.2 有待于进一步解决的问题 | 第69-71页 |
| 参考文献 | 第71-78页 |
| 附录 | 第78-81页 |
| 1. 荧光PCR相对定量方法—2~(-△△Ct)法 | 第78-79页 |
| 2. pMD18-T载体示意图 | 第79页 |
| 3. pET-26b(+)载体示意图 | 第79-80页 |
| 4. TIGAR mRNA原核表达实验流程图解 | 第80-81页 |
| 致谢 | 第81-82页 |
| 作者简历 | 第82页 |
