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枯草芽孢杆菌产酱香相关功能基因的筛选及初步研究

摘要第1-5页
Abstract第5-7页
第一章 前言第7-24页
   ·酱香型白酒第7-13页
     ·酱香型白酒的主体香气成分第7-8页
     ·酱香型白酒的酱香形成机制第8-13页
       ·酱香功能菌第8-9页
       ·美拉德反应第9-12页
       ·美拉德反应、酱香功能菌与酱香形成三者的关系第12-13页
   ·两种重要的研究技术在酱香型白酒研究中的应用第13-15页
     ·微生物学技术第13-14页
     ·分子生物学技术第14-15页
   ·功能基因的研究策略第15-21页
     ·抑制消减杂交技术第16-19页
     ·抑制消减杂交技术在细菌中的应用第19-21页
     ·芽孢杆菌比较基因组学研究进展第21页
   ·本研究立题依据及意义第21-23页
   ·研究内容第23页
   ·技术路线第23-24页
第二章 产酱香菌株与不产酱香菌株的筛选第24-28页
   ·材料第24-25页
     ·实验菌株第24页
     ·主要培养基第24-25页
     ·主要仪器第25页
   ·方法第25-26页
   ·结果第26-28页
第三章 枯草芽孢杆菌产酱香SSH文库构建第28-71页
   ·材料第28-29页
     ·实验质粒及菌株第28页
     ·引物第28-29页
     ·主要仪器第29页
     ·主要试剂第29页
   ·方法第29-47页
     ·氨苄青霉素抗性平板的制备第29-30页
     ·DH5α感受态细胞的制备第30-31页
     ·其它相关试剂的配制第31-32页
     ·枯草芽孢杆菌基因组DNA的提取及其浓度测定第32-33页
     ·抑制消减杂交第33-43页
       ·限制酶RsaI酶活性的检测第33-34页
       ·限制酶酶切双链DNA第34-35页
       ·Tester接头连接实验第35-37页
       ·接头连接效率的验证第37-38页
       ·第一轮消减杂交反应第38-39页
       ·第二轮消减杂交反应第39-40页
       ·第一次PCR扩增反应第40-41页
       ·第二次PCR扩增反应第41-42页
       ·消减效率分析第42-43页
     ·消减文库的构建第43-46页
       ·PCR产物的纯化第43-44页
       ·差异基因片段的克隆第44-46页
     ·文库差异基因的测序及生物信息学分析第46-47页
   ·结果与分析第47-71页
     ·基因组DNA的提取第47-48页
     ·抑制消减杂交第48-53页
       ·基因组DNA的酶切第48-49页
       ·Tester DNA的接头连接第49-50页
       ·差减后产物的两轮PCR扩增结果分析第50-51页
       ·消减效率分析第51-52页
       ·消减文库的构建结果分析第52-53页
     ·文库基因的测序及生物信息学分析第53-71页
       ·文库基因测序第53页
       ·文库基因的提取第53页
       ·文库基因序列注释第53-58页
       ·富集分析第58-62页
         ·GO富集分析第58-61页
         ·KEGG富集分析第61-62页
       ·酶分析第62页
       ·酶代谢产物分析第62-63页
       ·产酱香相关的基因预测第63-71页
第四章 讨论与结论第71-75页
   ·讨论第71-74页
     ·gyrA和yyb E与alsS代谢的相关性第71-72页
     ·gyr A、pheT、prfB等基因与美拉德反应的相关性第72-73页
     ·glgP与香味物质的相关性第73-74页
   ·本文主要结论第74-75页
参考文献第75-79页
致谢第79-80页
附录 Ⅰ第80-81页
附录 Ⅱ第81-85页
附录 Ⅲ第85-87页
附录 Ⅳ第87-90页

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