酿酒酵母Pde1的细胞内定位与定位调控机制的研究
| 中文摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-8页 |
| 前言 | 第8-9页 |
| 第一章 文献综述 | 第9-21页 |
| ·细胞信号转导概述 | 第9-11页 |
| ·引言 | 第9页 |
| ·跨膜信号转导 | 第9-10页 |
| ·细胞表面受体的跨膜信号转换 | 第10页 |
| ·G 蛋白与跨膜细胞信号转导 | 第10-11页 |
| ·Ras-cAMP 信号通路 | 第11-20页 |
| ·cAMP 的发现及第二信使学说的提出 | 第11页 |
| ·Ras-cAMP 信号通路组成 | 第11-17页 |
| ·Ras 蛋白 | 第11-12页 |
| ·Cdc25 和Sdc25 | 第12-13页 |
| ·Ira1 和Ira2 | 第13页 |
| ·Cdc35/Cyr1 | 第13-14页 |
| ·Pde1 和Pde2 | 第14-16页 |
| ·Ras-cAMP 通路的其它成分 | 第16-17页 |
| ·cAMP 依赖性蛋白激酶(cAPK) | 第17页 |
| ·cAPK | 第17页 |
| ·Ras-cAMP 通路的反馈抑制调节 | 第17-18页 |
| ·葡萄糖诱导激活Ras-cAMP 通路 | 第18-20页 |
| ·葡萄糖诱导激发cAMP 信号 | 第18-19页 |
| ·葡萄糖信号分子的感受 | 第19-20页 |
| ·本课题研究工作的任务 | 第20-21页 |
| 第二章 实验材料与实验方法 | 第21-31页 |
| ·实验材料及仪器 | 第21-25页 |
| ·主要实验仪器 | 第21-22页 |
| ·试剂 | 第22-23页 |
| ·酶制剂 | 第23页 |
| ·菌株 | 第23页 |
| ·培养基 | 第23-24页 |
| ·溶液 | 第24-25页 |
| ·实验方法 | 第25-31页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第25页 |
| ·大肠杆菌的转化 | 第25-26页 |
| ·质粒的提取(CTAB 法) | 第26页 |
| ·酵母染色体的快速分离 | 第26-27页 |
| ·DNA 片段的回收纯化 | 第27页 |
| ·酵母细胞的转化 | 第27-28页 |
| ·PCR 反应体系 | 第28-29页 |
| ·酶切体系 | 第29页 |
| ·连接体系(20μl) | 第29-30页 |
| ·GFP 荧光定位观察方法 | 第30-31页 |
| 第三章 构建研究用质粒和菌株 | 第31-40页 |
| ·构建研究用质粒 | 第31-33页 |
| ·质粒V410 的构建 | 第31-33页 |
| ·构建PDE1 基因缺陷型菌株 | 第33-40页 |
| ·菌株YN100 和YN101 的构建 | 第33-36页 |
| ·菌株YN123 的构建 | 第36-40页 |
| 第四章 Pde1 蛋白的亚细胞定位 | 第40-54页 |
| ·概述 | 第40页 |
| ·结果 | 第40-50页 |
| ·葡萄糖对菌株YN123 的诱导效应 | 第40-43页 |
| ·葡萄糖对菌株YN100 的诱导效应 | 第43-46页 |
| ·葡萄糖对菌株YN101 的诱导效应 | 第46-50页 |
| ·Pde1 在已出芽的酵母细胞中的分布 | 第50-51页 |
| ·讨论 | 第51-54页 |
| ·葡萄糖诱导下Pde1 的亚细胞定位 | 第51-53页 |
| ·Pde1 在已出芽的酵母细胞中的分布 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-62页 |
| 附录 | 第62-64页 |
| 发表论文和参加科研的情况 | 第64-65页 |
| 致谢 | 第65页 |
