摘要 | 第5-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
英语缩写词表 | 第9-11页 |
目录 | 第11-16页 |
第一章 绪论 | 第16-28页 |
1.1 金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)概述 | 第16-21页 |
1.1.1 金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)的生物学特性 | 第16页 |
1.1.2 金黄色葡萄球菌引起的食物中毒的流行状况 | 第16-17页 |
1.1.3 金黄色葡萄球菌的流行病学特点及致病机理 | 第17-18页 |
1.1.4 金黄色葡萄球菌分离鉴定方法 | 第18-21页 |
1.2 金黄色葡萄球菌分型研究进展 | 第21-23页 |
1.2.1 金黄色葡萄球菌分型方法简介 | 第21页 |
1.2.2 脉冲场凝胶电泳分型(Pulsed- Field Gel Electrophoresis, PFGE) | 第21-22页 |
1.2.3 多位点序列分型(MLST) | 第22-23页 |
1.2.4 金黄色葡萄球菌表面蛋白 A(Staphylococcus aureus ProteinA, Spa)基因多态性分型 | 第23页 |
1.3 金黄色葡萄球菌的耐药性 | 第23-26页 |
1.3.1 金黄色葡萄球菌耐药现状 | 第23-24页 |
1.3.2 金黄色葡萄球菌耐药机制 | 第24-26页 |
1.4 本课题的研究意义及主要内容 | 第26-28页 |
第二章 生猪肉中金黄色葡萄球菌的分离与鉴定 | 第28-36页 |
2.1 材料 | 第28-30页 |
2.1.1 菌株来源 | 第28页 |
2.1.2 主要仪器设备 | 第28-29页 |
2.1.3 主要试剂耗材 | 第29-30页 |
2.1.4 培养基和常用溶液的配置 | 第30页 |
2.1.5 统计学处理 | 第30页 |
2.2 实验方法 | 第30-32页 |
2.2.1 金黄色葡萄球菌的分离与鉴定 | 第30-32页 |
2.3 结果与分析 | 第32-35页 |
2.3.1 金黄色葡萄球菌检出情况 | 第32-34页 |
2.3.2 三类生猪肉金黄色葡萄球菌的污染情况 | 第34页 |
2.3.3 不同来源猪肉中金黄色葡萄球菌的检出率 | 第34-35页 |
2.4 讨论 | 第35-36页 |
第三章 金黄色葡萄球菌药物敏感性实验 | 第36-50页 |
3.1 材料 | 第36-39页 |
3.1.1 菌株来源 | 第36页 |
3.1.2 主要仪器设备 | 第36-37页 |
3.1.3 主要试剂耗材 | 第37-38页 |
3.1.4 培养基和常用溶液配制 | 第38-39页 |
3.1.5 统计学处理 | 第39页 |
3.2 实验方法 | 第39-44页 |
3.2.1 药敏纸片 | 第39-40页 |
3.2.2 质控菌株 | 第40-41页 |
3.2.3 纸片扩散法进行药敏实验 | 第41-42页 |
3.2.4 CTAB/NaCl 法提取金黄色葡萄球菌全基因组 DNA | 第42-43页 |
3.2.5 PCR 法检测 mecA 基因 | 第43页 |
3.2.6 琼脂糖凝胶电泳检测 PCR 扩增产物 | 第43-44页 |
3.3 结果与分析 | 第44-48页 |
3.3.1 34 株金黄色葡萄球菌对 12 种抗生素的耐药率 | 第44-45页 |
3.3.2 34 株金黄色葡萄球菌的耐药表型谱 | 第45-47页 |
3.3.3 不同来源金黄色葡萄球菌药敏结果分析 | 第47页 |
3.3.4 PCR 检测 mecA 基因 | 第47-48页 |
3.4 讨论 | 第48-50页 |
第四章 金黄色葡萄球菌的多位点序列分型 | 第50-63页 |
4.1 材料 | 第50-52页 |
4.1.1 菌株来源 | 第50页 |
4.1.2 主要仪器和设备 | 第50-51页 |
4.1.3 主要试剂耗材 | 第51-52页 |
4.1.4 常用溶液、试剂配制 | 第52页 |
4.2 实验方法 | 第52-57页 |
4.2.1 DNA 模板的制备 | 第52页 |
4.2.2 MLST 分型相关引物 | 第52-53页 |
4.2.3 PCR 反应体系 | 第53-54页 |
4.2.4 PCR 扩增条件 | 第54页 |
4.2.5 PCR 扩增产物的检测 | 第54页 |
4.2.6 PCR 产物测序及解析 | 第54-57页 |
4.3 结果与分析 | 第57-61页 |
4.3.1 PCR 扩增 7 个管家基因 | 第57页 |
4.3.2 金黄色葡萄球菌 MLST 序列分型结果 | 第57-58页 |
4.3.3 不同肉类种类来源金黄色葡萄球菌的 MLST 分型情况 | 第58-59页 |
4.3.4 不同来源金黄色葡萄球菌的 MLST 分型情况 | 第59-60页 |
4.3.5 金黄色葡萄球菌的 MLST 分型与抗生素药敏结果相关性 | 第60-61页 |
4.4 讨论 | 第61-63页 |
第五章 金黄色葡萄球菌第一类整合子的检测及其水平转移能力的研究 | 第63-77页 |
5.1 材料 | 第63-66页 |
5.1.1 菌株来源 | 第63页 |
5.1.2 主要仪器和设备 | 第63-64页 |
5.1.3 主要试剂耗材 | 第64-65页 |
5.1.4 常用溶液、试剂配制 | 第65-66页 |
5.2 实验方法 | 第66-70页 |
5.2.1 DNA 模板的制备 | 第66页 |
5.2.2 质粒 DNA 的提取 | 第66-67页 |
5.2.3 第一类整合子的检测与鉴定 | 第67-69页 |
5.2.4 转化实验 | 第69-70页 |
5.2.5 自然转移 | 第70页 |
5.3 结果与分析 | 第70-75页 |
5.3.1 第一类整合子系统的检测与分析 | 第70-73页 |
5.3.2 质粒抽提结果 | 第73-74页 |
5.3.3 定位第一类整合子系统 | 第74页 |
5.3.4 PCR 法验证化学转化实验 | 第74-75页 |
5.3.5 PCR 法验证自然转移实验 | 第75页 |
5.4 讨论 | 第75-77页 |
结论与展望 | 第77-79页 |
参考文献 | 第79-88页 |
附录 | 第88-90页 |
攻读硕士学位论文期间取得的主要成果 | 第90-91页 |
致谢 | 第91-92页 |
附件 | 第92页 |