| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 目录 | 第9-13页 |
| 1 绪论 | 第13-27页 |
| 1.1 啤酒酿造过程简介 | 第13-14页 |
| 1.2 啤酒大麦淀粉降解的途径 | 第14-16页 |
| 1.2.1 水解途径 | 第14-15页 |
| 1.2.2 磷酸解途径 | 第15-16页 |
| 1.3 极限糊精酶及其抑制因子在制麦和啤酒酿造过程中的作用 | 第16-17页 |
| 1.4 极限糊精酶的研究进展 | 第17-20页 |
| 1.4.1 极限糊精酶的发现 | 第17页 |
| 1.4.2 极限糊精酶的作用 | 第17页 |
| 1.4.3 极限糊精酶的提取、纯化和鉴定 | 第17-18页 |
| 1.4.4 极限糊精酶活性的测定方法 | 第18-20页 |
| 1.5 极限糊精酶抑制因子 | 第20-21页 |
| 1.5.1 极限糊精酶抑制因子的发现 | 第20页 |
| 1.5.2 极限糊精酶抑制因子的作用 | 第20页 |
| 1.5.3 极限糊精酶抑制因子的提取、纯化和鉴定 | 第20-21页 |
| 1.5.4 极限糊精酶抑制因子的测定方法 | 第21页 |
| 1.6 极限糊精酶及其抑制因子在啤酒大麦发芽过程中的变化 | 第21-22页 |
| 1.7 极限糊精酶及其抑制因子在糖化酿造过程中的变化 | 第22-23页 |
| 1.8 应用过程中极限糊精酶及其抑制因子存在的问题 | 第23-24页 |
| 1.9 淀粉脱支酶及蛋白抑制因子的分离纯化 | 第24-25页 |
| 1.10 研究的目的、内容及意义 | 第25-27页 |
| 1.10.1 研究的目的及意义 | 第25-26页 |
| 1.10.2 研究的主要内容 | 第26-27页 |
| 2 大麦芽极限糊精酶的分离纯化及性质研究 | 第27-60页 |
| 2.1 实验用品 | 第27-28页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第27页 |
| 2.1.2 主要仪器设备 | 第27-28页 |
| 2.1.3 主要实验药品 | 第28页 |
| 2.2 实验方法 | 第28-40页 |
| 2.2.1 绿麦芽水分含量的测定 | 第28-29页 |
| 2.2.2 极限糊精酶活力的测定 | 第29-30页 |
| 2.2.3 蛋白质含量的测定 | 第30页 |
| 2.2.4 DNS 法测定还原糖量 | 第30-31页 |
| 2.2.5 极限糊精酶纯化方案 | 第31-32页 |
| 2.2.6 绿麦芽真空干燥条件的确定 | 第32-33页 |
| 2.2.7 极限糊精酶提取条件的确定 | 第33页 |
| 2.2.8 粗酶液样品制备 | 第33页 |
| 2.2.9 硫酸铵分步盐析 | 第33-34页 |
| 2.2.10 Sephadex G-25 凝胶过滤柱层析脱盐 | 第34页 |
| 2.2.11 DEAE Sepharose FF 离子交换柱层析纯化 | 第34-35页 |
| 2.2.12 Sephadex G-100 凝胶层析进一步纯化 | 第35页 |
| 2.2.13 SDS-PAGE 凝胶电泳[75] | 第35-37页 |
| 2.2.14 IEF 凝胶电泳[76] | 第37-38页 |
| 2.2.15 牛血清白蛋白（BSA）浓度对极限糊精酶活性的影响 | 第38页 |
| 2.2.16 还原剂 DTT 浓度对极限糊精酶活性的影响 | 第38页 |
| 2.2.17 酶的最适作用温度和热稳定性的测定 | 第38-39页 |
| 2.2.18 酶的最适作用 pH 和 pH 稳定性的测定 | 第39页 |
| 2.2.19 不同离子对酶活力的影响 | 第39页 |
| 2.2.20 金属离子对酶热稳定性的影响 | 第39页 |
| 2.2.21 酶的动力学性质 | 第39页 |
| 2.2.22 酶的底物特异性 | 第39-40页 |
| 2.3 实验结果与分析 | 第40-59页 |
| 2.3.1 绿麦芽真空干燥条件的确定 | 第40-42页 |
| 2.3.2 极限糊精酶提取条件的确定 | 第42-43页 |
| 2.3.3 硫酸铵分步盐析 | 第43-45页 |
| 2.3.4 Sephadex G-25 凝胶过滤除盐 | 第45-46页 |
| 2.3.5 DEAE Sepharose FF 离子交换柱层析纯化 | 第46-48页 |
| 2.3.6 Sephadex G-100 凝胶过滤柱层析进一步纯化 | 第48-49页 |
| 2.3.7 极限糊精酶的分离纯化结果 | 第49-51页 |
| 2.3.8 牛血清白蛋白（BSA）浓度对极限糊精酶活性的影响 | 第51-52页 |
| 2.3.9 还原剂 DTT 浓度对极限糊精酶活性的影响 | 第52-53页 |
| 2.3.10 温度对酶活力和酶稳定性的影响 | 第53-54页 |
| 2.3.11 pH 对酶活力和酶稳定性的影响 | 第54-56页 |
| 2.3.12 不同离子对酶活力的影响 | 第56页 |
| 2.3.13 金属离子对酶热稳定性的影响 | 第56-57页 |
| 2.3.14 酶动力学性质 | 第57-58页 |
| 2.3.15 酶的底物特异性 | 第58-59页 |
| 2.4 本章小结 | 第59-60页 |
| 3 大麦芽极限糊精酶抑制因子的分离纯化及性质研究 | 第60-78页 |
| 3.1 实验用品 | 第60-62页 |
| 3.1.1 实验材料 | 第60-61页 |
| 3.1.2 主要仪器设备 | 第61页 |
| 3.1.3 主要实验药品 | 第61-62页 |
| 3.2 实验方法 | 第62-67页 |
| 3.2.1 抑制因子活力的测定 | 第62页 |
| 3.2.2 蛋白质含量的测定 | 第62页 |
| 3.2.3 抑制因子纯化方案 | 第62-63页 |
| 3.2.4 抑制因子粗提取与热提取条件的确定 | 第63-64页 |
| 3.2.5 抑制因子粗提取 | 第64页 |
| 3.2.6 抑制因子热提取 | 第64页 |
| 3.2.7 羧甲基纤维素 CM-52 离子交换柱层析 | 第64-65页 |
| 3.2.8 Sephadex G-100 凝胶过滤柱层析 | 第65页 |
| 3.2.9 SDS-PAGE 凝胶电泳[75] | 第65-66页 |
| 3.2.10 IEF 凝胶电泳[76] | 第66页 |
| 3.2.11 pH 对抑制因子活力的影响 | 第66页 |
| 3.2.12 抑制因子对微生物普鲁兰酶、异淀粉酶、α-淀粉酶及麦芽α-淀粉酶和β-淀粉酶的影响 | 第66-67页 |
| 3.2.13 还原剂 DTT 对酶-抑制因子复合物的影响 | 第67页 |
| 3.3 实验结果与分析 | 第67-77页 |
| 3.3.1 抑制因子粗提取与热提取条件的确定 | 第67-69页 |
| 3.3.2 羧甲基纤维素 CM-52 离子交换柱层析 | 第69-71页 |
| 3.3.3 Sephadex G-100 凝胶过滤柱层析 | 第71-72页 |
| 3.3.4 抑制因子的分离纯化结果 | 第72-74页 |
| 3.3.5 pH 对抑制因子活力的影响 | 第74-75页 |
| 3.3.6 抑制因子对微生物普鲁兰酶、异淀粉酶、α-淀粉酶及麦芽α-淀粉酶和β-淀粉酶的影响 | 第75-76页 |
| 3.3.7 还原剂 DTT 对酶-抑制因子复合物的影响 | 第76-77页 |
| 3.4 本章小结 | 第77-78页 |
| 4 在离体的状态下极限糊精酶调控机制的研究 | 第78-91页 |
| 4.1 实验用品 | 第78-79页 |
| 4.1.1 实验材料 | 第78-79页 |
| 4.1.2 主要仪器设备 | 第79页 |
| 4.1.3 主要实验药品 | 第79页 |
| 4.2 实验方法 | 第79-81页 |
| 4.2.1 透析袋的处理 | 第79页 |
| 4.2.2 自由态和结合态极限糊精酶的稳定性 | 第79-80页 |
| 4.2.3 “巯基作用剂”对自由态和结合态极限糊精酶的影响 | 第80页 |
| 4.2.4 巯基蛋白酶抑制剂对自由态和结合态极限糊精酶的影响 | 第80页 |
| 4.2.5 “巯基作用剂”对结合态极限糊精酶释放的影响 | 第80-81页 |
| 4.2.6 巯基蛋白酶抑制剂对结合态极限糊精酶释放的影响 | 第81页 |
| 4.3 实验结果与分析 | 第81-90页 |
| 4.3.1 自由态和结合态极限糊精酶的稳定性 | 第81-83页 |
| 4.3.2 “巯基作用剂”对自由态和结合态极限糊精酶的影响 | 第83-86页 |
| 4.3.3 巯基蛋白酶抑制剂对自由态和结合态极限糊精酶的影响 | 第86-88页 |
| 4.3.4 “巯基作用剂”对结合态极限糊精酶释放的影响 | 第88-89页 |
| 4.3.5 巯基蛋白酶抑制剂对结合态极限糊精酶释放的影响 | 第89-90页 |
| 4.4 本章小结 | 第90-91页 |
| 5 结论与展望 | 第91-94页 |
| 5.1 主要结论 | 第91-92页 |
| 5.2 问题与建议 | 第92-93页 |
| 5.3 进一步工作的方向 | 第93-94页 |
| 参考文献 | 第94-99页 |
| 致谢 | 第99-100页 |
| 个人简历 | 第100页 |
| 发表的学术论文 | 第100-101页 |
